蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)ppt課件-展示頁(yè)
2025-05-16 13:46本頁(yè)面
【正文】 (1) 已知一個(gè)八肽完全降解后，分析其組成為 Ala， Gly(2)， Lys， Met， Ser， Thr， Tyr (2) 該八肽用溴化氰（ CNBr）處理得到以下 2個(gè)片段，組成分 別如下： (a) Ala， Gly， Lys， Thr (b) Gly， Met， Ser， Tyr (3) 用胰蛋白酶處理得到以下 2個(gè)片段，組成分別如下： (a) Ala， Gly， (b) Gly， Lys， Met， Ser， Thr， Tyr， (4) 用胰凝乳 (糜 )蛋白酶處理得到以下 2個(gè)片段，組成分別如下： (a) Gly， Tyr， (b) Ala， Gly， Lys， Met, Ser, Thr， (5) 經(jīng)分析： N末端殘基是： Gly， C末端殘基是： Gly， 請(qǐng)確定該八肽的氨基酸序列 習(xí) 題 (1) CNBr水解 Met羧基形成的肽鍵，故可得： Gly(Tyr, Ser)Met , (Thr, Lys, Ala)Gly (a) Ala， Gly， Lys， Thr (b) Gly， Met， Ser， Tyr (2) 胰蛋白酶水解 Lys和 Arg羧基形成的肽鍵，故可得： Gly(Tyr, Ser, Met, Thr)Lys , AlaGly (a) Ala， Gly， (b) Gly， Lys， Met， Ser， Thr， Tyr (3) 糜蛋白酶水解 Phe, Trp,Tyr等疏水氨基酸羧基形成的肽 鍵 , 故可得： GlyTyr, (Ser, Met, Thr, Lys, Ala)Gly (a) Gly， Tyr， (b) Ala， Gly， Lys， Met, Ser, Thr， 綜合以上情況，根據(jù)片段重疊，推測(cè)該肽的序列為： GlyTyrSerMetThrLysAlaGly 答 案 課 后 習(xí) 題 已知一個(gè)七肽 (1) 經(jīng)分析它的氨基酸組成為： Lys、 Pro、 Arg、 Phe、 Ala、 Tyr和 Ser。由于二硫鍵在酸性條件下穩(wěn)定，因此確定二硫鍵位置時(shí)常用該酶處理 ? 嗜熱菌蛋白酶 (thermolysin) 含 Zn和 Ca的金屬酶， Zn是酶活力必需的， Ca與酶的熱穩(wěn)定性有關(guān)。氨基酸與多肽 ? 氨基酸的通式和構(gòu)型 (?氨基酸， L構(gòu)型 ) ? 幾種特殊的氨基酸 (酸性、堿性、帶芳香環(huán) ) ? 氨基酸的兩性電離和等電點(diǎn) pI ? 氨基酸 ?氨基參與的反應(yīng) (凱式定氮法，烴基化 ) ? 氨基酸 ?羧基和 ?氨基參與的反應(yīng) (茚三酮顯色 ) ? 氨基酸 R基參與的反應(yīng) (Folin酚反應(yīng) ，二硫鍵轉(zhuǎn)化 ) ? 氨基酸分離分析的原理，蛋白水解制備氨基酸 ? 多肽的命名 ? 常見(jiàn)多肽 (谷胱甘肽 ) 蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu) 一、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次 二、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu) 三、蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu) 四、超二級(jí)結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)域 五、蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu) 六、蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu) 一、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次 二、蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu) Primary structure 1．定義： 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序 (sequence)，一級(jí)結(jié)構(gòu)的主要連接鍵是肽鍵，通常將二硫鍵也歸屬于一級(jí)結(jié)構(gòu) 2．結(jié)構(gòu)特點(diǎn)： 蛋白質(zhì)的序列具有方向性，一般書(shū)寫(xiě)順序是從 N端到C端， 其主要作用是決定蛋白質(zhì)分子的高級(jí)結(jié)構(gòu)和功能 二硫鍵的形成 胰島素的一級(jí)結(jié)構(gòu) 蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)舉例 21aa 30aa 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定步驟 三 .肽鏈氨基酸組成分析 一 .蛋白質(zhì)中肽鏈的拆離 (亞基與分子間二硫鍵 ) 五 .肽鏈的部分降解及肽片斷的分離 四 .氨基酸末端分析 六 .肽段氨基酸組成分析及末端分析 七 .肽段序列重疊 二 .肽鏈分子內(nèi)二硫鍵的斷裂 八 .二硫鍵的定位 (1) 樣品準(zhǔn)備： 均一性、純度、相對(duì)分子量、 肽鏈數(shù)目、氨基酸組成 (2) 一般步驟： 單條多肽鏈準(zhǔn)備 至少兩套肽段序列測(cè)定 蛋白質(zhì)分子序列重建 一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定主要用 小片段重疊 的原理 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定 肽鏈間的結(jié)合 非共價(jià)鍵 血紅蛋白（四聚體） 烯醇化酶（二聚體） 共價(jià)鍵結(jié)合 胰島素 免疫球蛋白等 蛋白質(zhì)中肽鏈的拆離 非共價(jià)鍵連接的多肽鏈 溫和條件下可以解離 (變性劑或高濃度鹽 ) 通過(guò)二硫鍵連接的多肽鏈 需要較強(qiáng)的條件將二硫鍵切斷 還原法 (巰基化合物 ) 氧化法 (過(guò)氧酸 ) 蛋白質(zhì)中肽鏈的拆離 蛋白質(zhì)的氨基酸組成分析 蛋白質(zhì)完全水解后采用氨基酸自動(dòng)分析儀進(jìn)行分析 化學(xué)裂解法 酶水解法 溴化氰法 羥胺法 肽鏈的部分降解 溴化氰法 溴化氰對(duì) Met 羧基形成的肽 鍵特異 肽鏈的部分降解 羥胺法 羥胺能
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