質粒的提取與純化ppt課件-展示頁
2025-05-12 18:24本頁面
【正文】 3. 實驗儀器、材料與試劑 4. 實驗步驟 5. 實驗結果及討論 實驗目的 ? 了解堿法提取質粒的原理； ? 掌握堿法提取質粒的方法。 實驗原理 ? 質粒是一種細菌染色體外的、具有自主復制能力的、共價閉合環(huán)狀超螺旋結構的小型 DNA分子。 ? 這種方法是根據(jù)共價閉合環(huán)狀質粒 DNA與線性染色體 DNA在拓撲學上的差異來分離它們。當加入乙酸鉀恢復至中性時，染色體 DNA分子難以復性，而質粒DNA分子很快復性，離心時染色體 DNA與細胞碎片一起被沉淀出來，而質粒 DNA則留在上清液中。 實驗儀器、材料與試劑 （一） 儀器 1. 恒溫搖床 2. 超凈工作臺 3. 高壓滅菌鍋 4. 高速臺式離心機 5. 微量取液器 （二） 材料 ? 含 pBC KS質粒的大腸桿菌 DH 5α。 （三） 試劑 ? 1. LB液體培養(yǎng)基（ 1L） 胰蛋白胨 10g 酵母提取物 5 g NaCl 10 g 加去離子水至 800ml 攪拌，使溶質完全溶解，用NaOH調(diào)節(jié) pH值至 ，加入去 離子水至總體積為 1升，高壓蒸汽滅菌 20 分鐘。 ? 2. SolutionⅠ 50 mmol/L 葡萄
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