1質(zhì)粒dna的提取、酶切與電泳-展示頁
2024-08-19 07:13本頁面
【正文】 超聲波處理法 4 液氮研磨法 5 化學(xué)處理法 (SDS、 LDS，吐溫 80等） 6 生化法（溶菌酶、纖維素酶等） Home （二）核蛋白的解聚、變性蛋白的去除 核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)合力主要是正負靜電吸力 (核酸與堿性蛋白的結(jié)合 )、氫鍵和非極性的范德華力。 2）容易降解，保存在 4 ℃ 或液氮中； 3）提 RNA時， % DEPC浸泡器皿 37℃ 2 h。 使用注意： 1） DEPC也能破壞單鏈核酸中大部分腺嘌呤環(huán)。 (2) DEPC(二乙基焦碳酸鹽 ) (C2H5OCOOCOOC2H5) 粘性液體，很強的核酸酶抑制劑。 2 RNA酶（ RNAase)抑制劑 RNAase分布廣泛，極易污染樣品，而且耐高溫、耐酸、耐堿，不宜失活。 1 DNA酶抑制劑 1） 金屬離子螯合劑： DNA酶需要金屬二價離子 Mg2+、 Ca2+的激活，因此使用金屬二價離子螯合劑，可抑制 DNA酶活性。 4） 減少物理因素對核酸降解的 機械剪切力 . Home （二）防止核酸的生物降解 細胞內(nèi)或外來的各種核酸酶能消化核酸鏈中的磷酸二酯鍵，破壞核酸一級結(jié)構(gòu)。 2 分離核酸原則： 1）溫度 不要過高； 2） 控制一定的 pH值 范圍 (pH值 59)。 核酸樣品質(zhì)量將直接關(guān)系到實驗的成敗。 實驗題目 質(zhì)粒 DNA的提取、酶切與電泳 主講： 生物實驗教學(xué)中心 主要內(nèi)容 前言 一、核酸分離、純化原則 （一） 保持核酸分子一級結(jié)構(gòu)的完整性 （二） 防止核酸的生物降解 二、分離提取
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