1質(zhì)粒dna的提取、酶切與電泳(完整版)
【正文】 1 高速組織搗碎機(jī)搗碎 2 玻璃勻漿器勻漿 3 超聲波處理法 4 液氮研磨法 5 化學(xué)處理法 (SDS、 LDS，吐溫 80等） 6 生化法（溶菌酶、纖維素酶等） Home （二）核蛋白的解聚、變性蛋白的去除 核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)合力主要是正負(fù)靜電吸力 (核酸與堿性蛋白的結(jié)合 )、氫鍵和非極性的范德華力。 使用酚時(shí)應(yīng)注意 Home （三）核酸的沉淀 沉淀是濃縮核酸最常用的方法。 （ 3）聚乙二醇（ PEG） 優(yōu)點(diǎn)： 可用不同濃度的 PEG選擇沉淀不同相對分子質(zhì)量的 DNA片段。一般使用 0℃ 冰水， 1015min， DNA樣品足可達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求。 雙鏈 DNA樣品濃度 (μg/μl) = OD 260 核酸稀釋倍數(shù) 50/1000； RNA樣品濃度 (μg/μl) = OD 260 核酸稀釋倍數(shù) 40/1000。 2 溴乙錠熒光法測定核酸的含量 如果 DNA和 RNA的量很少或有較多雜質(zhì)的情況下，其含量可用溴乙錠熒光法測定。 。使用一系列已知的不同濃度 DNA溶液作標(biāo)準(zhǔn)對照，可比較出被測 DNA溶液濃度。 A：測 DNA： 純的 DNA樣品 OD260/OD280應(yīng)為 ， OD260m／OD230應(yīng)大于 。 測定濃度應(yīng)大于 μg/ml 。 注意： PEG沉淀一般需要加入 10mmol/L的 MgCl2。 1 核酸沉淀的鹽類及濃度 鹽 貯存液濃度（ mol/L) 終濃度 (mol/L) MgCl2 1 NaAc 3 () KAc 3 () NH4Ac 10 NaCl 5 LiCl 8 2 有機(jī)沉淀劑 （ 1）乙醇 優(yōu)點(diǎn)： 對鹽類沉淀少，沉淀中所含跡量乙醇易揮發(fā)除去，不影
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