1質(zhì)粒dna的提取、酶切與電泳(參考版)
2025-08-07 07:13本頁面
【正文】 。 ② 長期保存可以沉淀形式貯于乙醇中 。 Home （五）核酸的保存 1 對(duì) DNA 保存： ① DNA樣品溶于 TE， 4 ℃ 或 20 ℃ 保存； ② 長期保存樣品中可加入 1滴氯仿。使用一系列已知的不同濃度 DNA溶液作標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照，可比較出被測 DNA溶液濃度。 2 溴乙錠熒光法測定核酸的含量 如果 DNA和 RNA的量很少或有較多雜質(zhì)的情況下，其含量可用溴乙錠熒光法測定。 測定結(jié)果分析 B：測 RNA 純的 RNA樣品其 OD260／ OD280應(yīng)介于 間， OD260/OD230比值應(yīng)大于 。 2) 小于 ，表明樣品中存在蛋白質(zhì)或酚污染； 3) OD260/OD230小于 ，表明溶液中有殘存的鹽和小分子雜質(zhì)，如核苷酸、氨基酸、酚等。 A：測 DNA： 純的 DNA樣品 OD260/OD280應(yīng)為 ， OD260m／OD230應(yīng)大于 。 雙鏈 DNA樣品濃度 (μg/μl) = OD 260 核酸稀釋倍數(shù) 50/1000； RNA樣品濃度 (μg/μl) = OD 260 核酸稀釋倍數(shù) 40/1000。 c．測定待測樣品在 230nm、 260nm和 280nm的 OD值。 紫外分光光度計(jì)測定核酸濃度的操作步驟 a．吸取一定量的 DNA樣品或 RNA樣品，加水至特定體積后，轉(zhuǎn)入分光光度計(jì)的石英比色杯中。 測定濃度應(yīng)大于 μg/ml 。一般使用 0℃ 冰水， 1015min， DNA樣品足可達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求。 3 核酸沉淀的溫度和時(shí)間 一般強(qiáng)調(diào)，核酸沉淀在低溫長時(shí)間下進(jìn)行。 （ 4）精胺 精胺不是有機(jī)溶劑，但可快速有效沉淀 DNA。 注意： PEG沉淀一般需要加入 10mmol/L的 MgCl2。 （ 3）聚乙二醇（ PEG） 優(yōu)點(diǎn)： 可用不同濃度的 PEG
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