1質(zhì)粒dna的提取、酶切與電泳(存儲版)
【正文】 缺點(diǎn) ： 易使鹽類、蔗糖與 DNA共沉淀．異丙醇難以揮發(fā)除去。 3 核酸沉淀的溫度和時間 一般強(qiáng)調(diào)，核酸沉淀在低溫長時間下進(jìn)行。 c．測定待測樣品在 230nm、 260nm和 280nm的 OD值。 測定結(jié)果分析 B：測 RNA 純的 RNA樣品其 OD260／ OD280應(yīng)介于 間， OD260/OD230比值應(yīng)大于 。 ② 長期保存可以沉淀形式貯于乙醇中 。 Home （五）核酸的保存 1 對 DNA 保存： ① DNA樣品溶于 TE， 4 ℃ 或 20 ℃ 保存； ② 長期保存樣品中可加入 1滴氯仿。 2) 小于 ，表明樣品中存在蛋白質(zhì)或酚污染； 3) OD260/OD230小于 ，表明溶液中有殘存的鹽和小分子雜質(zhì)，如核苷酸、氨基酸、酚等。 紫外分光光度計(jì)測定核酸濃度的操作步驟 a．吸取一定量的 DNA樣品或 RNA樣品，加水至特定體積后，轉(zhuǎn)入分光光度計(jì)的石英比色杯中。 （ 4）精胺 精胺不是有機(jī)溶劑，但可快速有效沉淀 DNA。 （ 2）異丙醇 優(yōu)點(diǎn)： 需體積小，速度快，適于濃度低、體積大的DNA樣品沉淀。 在酚 /氯仿抽提核酸提取液時，需要振搖， 為防止起泡和促使水相與有機(jī)相的分離 ，再加上一定量的異戊醇（ 酚：氯：異戊醉 =25： 24： 1） 。 使用注意： 1） DEPC也能破壞單鏈核酸中大部分腺嘌呤環(huán)。 4） 減少物理因素對核酸降解的 機(jī)械剪切力 . Home （二）防止核酸的生物降解 細(xì)胞內(nèi)或外來的各種核酸酶能消化核酸鏈中的磷酸二酯鍵，破壞核酸一級結(jié)構(gòu)。 無論是進(jìn)行核酸結(jié)構(gòu)還是功能研究，首先需要對核酸進(jìn)行分離和純化。如 EDTANa2(乙二胺四乙酸二鈉 )、 8羥基喹啉； 2） 陰離于型表面活性劑： 如 SDS，該試劑除對核
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