【正文】 acaloid) （ 5） RNase阻抑蛋白（ RNasin） （ 6）氧釩核糖核苷復(fù)合物 (VanadylRibonucleoside Complex, VRC) Home 二 分離提取核酸的主要步驟 （一）細(xì)胞的破碎 1 高速組織搗碎機搗碎 2 玻璃勻漿器勻漿 3 超聲波處理法 4 液氮研磨法 5 化學(xué)處理法 (SDS、 LDS，吐溫 80等） 6 生化法（溶菌酶、纖維素酶等） Home （二）核蛋白的解聚、變性蛋白的去除 核酸與蛋白質(zhì)的結(jié)合力主要是正負(fù)靜電吸力 (核酸與堿性蛋白的結(jié)合 )、氫鍵和非極性的范德華力。 核酸樣品質(zhì)量將直接關(guān)系到實驗的成敗。 作用機制： 與蛋白質(zhì)中 His結(jié)合使蛋白變性。 缺點： 需要量大，一般要求低溫操作。 結(jié)論： 在波長 260nm紫外光下， 1 OD值的吸光度相當(dāng)于雙鏈 DNA濃度為 50μg/ml ；單鏈 DNA為 37 μg/ml ； RNA為 40 ug/ml。 注意： 此法的比較主要基于目測，是估計水平。 1）若 RNA樣品 OD260/OD280比值太小，說明有蛋白質(zhì)或酚的污染； 2）比值大于 ，可能被異硫氰酸胍等污染； 3） OD260/OD230比值小于 鹽存在。低溫長時間沉淀，易導(dǎo)致鹽與 DNA共沉淀，影響以后的實驗。 2）安全操作 酚腐蝕性很強，并可引起嚴(yán)重的灼傷，操作時應(yīng)戴手套。如 EDTANa2(乙二胺四乙酸二鈉 )、 8羥基喹啉； 2） 陰離于型表面活性劑： 如 SDS，該試劑除對核酸酶有抑制作用外，還能使蛋白質(zhì)變性，并與變性蛋白結(jié)合成帶負(fù)電荷的復(fù)合物，該復(fù)合物在高鹽溶液中沉淀。 4） 減少物理因素對核酸降解的 機械剪切力 . Home （二