【正文】 日本奧林巴斯有限公司 LRH250 生化培養(yǎng)箱 上海一恒科技有限公司 酶標(biāo)儀 美國(guó)分子儀器公司（ MDA） 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第三章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制機(jī)理研究 13 拮抗菌及其培養(yǎng) 見 。 幾丁質(zhì)與 NaCl 結(jié)合誘導(dǎo)對(duì) R. paludigenum 生防效力的影響 幾丁質(zhì)與 NaCl結(jié)合誘導(dǎo)后， R. paludigenum 對(duì)梨青霉病的抑制效果 ?? 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制效果研究 11 討論 試驗(yàn)結(jié)果表明： ?? 。 E: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin. Bars represent standard errors of three replications. 幾丁質(zhì)誘導(dǎo)后不同濃度 R. paludigenum 酵母的生防效果 實(shí) 驗(yàn)結(jié)果表明， ?? 。 C: R. paludigenum cultured in NYCB with % chitin。 E: %（ w/v）幾丁質(zhì) NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum. Fig. 23 Incidence of blue mold decay caused by Penicillium expansum on apples inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制效果研究 10 Notes: A: R. paludigenum cultured in NYDB。 C: %（ w/v）幾丁質(zhì) NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum。 C ont rol A B C D E020406080100bcccbbDIsease incidence (%)T reat m enta C ont A B C D E048121620bbbbbLesion diameter (mm)T reat m enta 圖 23 不同濃度幾丁質(zhì)培養(yǎng)后 第 5 天 R. paludigenum 對(duì)蘋果青霉病的生防效果 注： A: NYDB 培養(yǎng)的 R. paludigenum。s multiple range tests. 能用圖表示的結(jié)果最好用圖，不要用表格，數(shù)據(jù)盡量作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 能用圖表示的結(jié)果最好用圖，不要用表格，數(shù)據(jù)盡量作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 圖題五號(hào)字，加粗，居中排列，中文英對(duì)照一致，圖注字體為小五號(hào) 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制效果研究 9 6d 7d012345cbcabaababababLesion diameter (mm)D ay s af t er i nocul at i on(d) N Y D B N Y C B ( 0. 1%) N Y C B ( 0. 2%) N Y C B ( 1. 0%) N Y C B ( 2. 0%) a 圖 22 不同濃度幾丁質(zhì)培養(yǎng)后 R. paludigenum 對(duì)梨青霉病病斑直徑的影響 Fig. 22 Severity of blue mold decay caused by Penicillium expansum on pears inoculated with R. paludigenum cultured with different concentrations of chitin. Bars represent standard errors of three replications. Different letter indicates significant differences (P ) according to the Duncan39。 ?? 。采用 軟件作圖。 幾丁質(zhì)與 NaCl 結(jié)合誘導(dǎo)對(duì)拮抗酵母生防活性的影響 酵母活化和液體培養(yǎng)、菌體收集同 ， ?? 。 ?? 。 幾丁質(zhì)對(duì) R. paludigenum 生防效果的影響 不同濃度幾丁質(zhì)對(duì)拮抗酵母生防活性的影響 酵母活化和液體培養(yǎng)、菌體收集同 ， ?? 。 試劑 幾丁質(zhì)（ Chitin）為生化純?cè)噭?，使用前先研磨，并?100 目篩網(wǎng)過濾后備用。 哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制效果研究 7 病原菌培養(yǎng)和孢子懸浮液的制備 病原菌 病原菌為擴(kuò)展青霉（ Penicillium expansum）， ?? 。 材料和方法 主要儀器 TH3560 全自動(dòng)滅菌鍋 造鑫 (TSAO HSIN)企業(yè)有限公司 SWCJ1F 超凈工作臺(tái) 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司 SIGMA 3K15 離心機(jī) 德國(guó)希格瑪（ SIGMA）公司 QYC211 全溫空氣搖床 上海福瑪實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司 Sartrious 電子天平 北京賽多利斯天平有限公司 200 ?l、 1000 ?l、 5ml移液器 德國(guó) Eppendorf 公司 血球計(jì)數(shù)板（ 2516） 上海醫(yī)用光學(xué)儀器廠 光學(xué)顯微鏡 日本奧林巴斯有限公司 LRH250 生化培養(yǎng)箱 上海一恒科技有限公司 拮抗菌及其培養(yǎng) 拮抗菌 Rhodosporidium paludigenum，分離自中國(guó)東海近海海域，并經(jīng)英國(guó)國(guó)際微生物所菌種保存和鑒定中心（ CABI Bioscience Identification Services）鑒定。 章節(jié)間要有分頁符哈爾濱工業(yè)大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制效果研究 6 第二章 海洋酵母 R. paludigenum 對(duì)果實(shí)采后真菌病害抑制效果研究 前言 生物防治是采用微生物菌株或抗菌素類物質(zhì)，通過噴灑或浸漬果實(shí)處理，以降低或防 治果實(shí)采后病害的保鮮方法。但是要實(shí)現(xiàn)拮抗酵母的商業(yè)化推廣應(yīng)用，迫切需要解決的問題是提高其生物學(xué)效力。研究幾丁質(zhì)誘導(dǎo)后 R. paludigenum 對(duì)蘋果、梨采后主要真菌病害擴(kuò)展青霉（ P. expansum）體內(nèi)的抑制效果，篩選出最佳誘導(dǎo)劑量及誘導(dǎo)時(shí)間，并結(jié)合其他誘導(dǎo)因子為蘋果、梨采后病害提供一種安全、經(jīng)濟(jì)有效的防 治方法， 并對(duì)可能存在的相關(guān)機(jī)理，包括促進(jìn)酵母菌生長(zhǎng)、分泌抗菌物質(zhì)和誘導(dǎo)抗性等進(jìn)行系統(tǒng)研究。 ?? 。 ?? 基因工程技術(shù) 的應(yīng)用 利用分子生物學(xué)和基因工程的 手段研究拮抗菌的遺傳背景并開展相應(yīng)分子水平的改造是生物防治領(lǐng)域的一個(gè)研究熱點(diǎn)， ?? 。等（ 1998）研究表明通過低水分活度培養(yǎng) Candida sake 后其在采哈爾濱工業(yè)大學(xué) 工學(xué) 學(xué)士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 5 前使用時(shí)生長(zhǎng)數(shù)量明顯增加并增強(qiáng)了酵母的拮抗效力，其機(jī)理與積累糖醇和海藻糖有關(guān)； ?? 。 抗生素名稱 產(chǎn)生菌株 針對(duì) 病原菌 蒿屬香豆素、東莨菪亭 無名假絲酵母 (C. famata) 指狀青霉 毒性蛋白 (killer protein) 畢赤酵母屬 (Pichia sp.) 抗細(xì)菌物質(zhì) 羅倫隱球酵母 （ C. laurentii） 熒光假單胞菌、 Staphylococcus aureus 揮發(fā)性物質(zhì) 乳酸克魯維酵母 (Kluyveromyces lactis) 擴(kuò)展青霉 圖表在文中一定要有引用，且圖表緊隨文字描述之后 五號(hào)宋體加粗居中 三線表 哈爾濱工業(yè)大學(xué) 工學(xué) 學(xué)士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 4 表 12 采后拮抗 菌 對(duì)果實(shí)抗性的誘導(dǎo)及對(duì)抗性相關(guān)反應(yīng)的刺激 果實(shí) 拮抗菌 備注 蘋果 出芽短梗霉 C. saitoana 刺激果實(shí)幾丁質(zhì)酶、葡聚糖酶和 POD 誘導(dǎo)抗性，并刺激果實(shí)幾丁質(zhì)酶、 ?1,3葡聚糖酶 分泌 ?1,3葡聚糖酶 柚子 柑橘 C. oleophila 誘導(dǎo)抗性，并刺激果實(shí)乙烯、 PAL, 幾丁質(zhì)酶、 ?1,3葡聚糖酶、積累植保素等 刺激果實(shí)硫還原蛋白基因表達(dá) 刺激幾丁質(zhì)酶 cDNA 的表達(dá) 刺激 ?1,3內(nèi)葡聚糖酶基因表達(dá) 草莓 出 芽短梗霉 誘導(dǎo)抗性 櫻桃 番茄 膜 醭畢赤酵母 刺激果實(shí) POD，降低 CAT 和 SOD，提高總蛋白，增強(qiáng) 33和 47kDa 蛋白 刺激果實(shí)幾丁質(zhì)酶、 ?1,3葡聚糖酶 桃 、梨、棗、蘋果 羅倫隱球酵母 誘導(dǎo)果實(shí)抗性；刺激果實(shí)幾丁質(zhì)酶、 ?1,3葡聚糖酶、 POD和 PAL 活性 刺激果實(shí) ?1， 3葡聚糖酶基因表達(dá) 表 13 主要產(chǎn)抗生素菌株 抗生素名稱 產(chǎn)生菌株 作用對(duì)象 病原菌 伊枯草菌素 枯草芽孢桿菌 B3 核果類水果 M. fructicola 吡咯菌素 洋蔥假單胞菌 (P. cepacia) LT412W 梨果 、柑橘 核果類水果 擴(kuò)展青霉、灰葡萄 孢 丁香霉素 E 丁香假單胞桿菌 ESC10 和 ESC11（ BioSave） 檸檬 吡喃酮 木霉 草莓、蘋果 灰葡萄孢 拮抗菌生理調(diào)控及機(jī)理的研究 近年來，隨著拮抗菌和病原菌之間 的 細(xì)胞學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究的不斷深入發(fā)展，研究者發(fā)現(xiàn) 通過調(diào)節(jié)采后拮抗酵母的生理代謝機(jī)制可能是增強(qiáng)其拮抗能力的有效途徑之一（ Janisiewicz 和 Korsten, 20xx） 。 Janisiewicz et al., 1991）。 ?? 。這些胞外活性物質(zhì)可能參與了拮抗菌與病原菌之間的相互作用（ 表 11）。 ?? 。 ?? 。 采后拮抗酵母作用機(jī)制 根據(jù)已有的研究結(jié)果顯示，微生物對(duì)病原菌有直接作用和間接作用兩種方式，直接作用包括抗生作用和重寄生作用，間接作用包括營(yíng)養(yǎng)和空間的競(jìng)爭(zhēng)，胞外活性物質(zhì)的產(chǎn)生和誘導(dǎo)抗性等。 果 實(shí)采后 病害 生物防治 從可持續(xù)發(fā)展的角度出發(fā)，開發(fā)新型、高效且安全的有機(jī)、綠色的保鮮劑具有重大的社會(huì)意義和廣闊的應(yīng)用前景。低溫冷藏技術(shù)已經(jīng)在部分地區(qū)得到實(shí)際運(yùn)用，熱殺菌和輻照殺菌也是目前報(bào)道比較多的方法。 ?? 。 ?? 。 病原菌破壞植物自身防御機(jī)制 植物在遭到病原菌侵染時(shí)， 通過體內(nèi)木質(zhì)素和羥脯氨酸糖的沉積，植物抗菌素的積累，蛋白質(zhì)酶抑制劑和溶菌酶的合成來增強(qiáng)細(xì)胞壁的保衛(wèi)反應(yīng)。 致病因子 CAT 物種拉丁名第一次出現(xiàn)屬名寫出全稱，隨后用其縮寫 章 節(jié)， 小二黑體居中 ，下同 二級(jí)標(biāo)題， 小三黑體 ，下同 三級(jí)標(biāo)題，四號(hào) 黑體 ，下同 四級(jí)標(biāo)題，小四號(hào) 黑體 ，下同 哈爾濱工業(yè)大學(xué) 工學(xué) 學(xué)士學(xué)位論文 第一章 文獻(xiàn)綜述 2 活性氧（ Reactive Oxygen Species， ROS）在植物和微生物相互作用過程中具有重要作用（ Torres et al., 20xx)。 引用的參考文獻(xiàn)多于 1 篇時(shí)，按照論文發(fā)表時(shí)間的先后次序時(shí)行引用 采后病原真菌的致病機(jī)理 采后病原真 菌具有眾多而且復(fù)雜的致病機(jī)理，但其最終目的都是成功的侵染寄主。 ?? . 采后病原真菌的侵染方式 采后病原真菌主要通過 3 種途徑或方式入侵果實(shí)： (1)通過機(jī)械傷或蟲害等造成的傷口； (2)通過自然開放的皮孔、氣孔、果實(shí)和花梗結(jié)合部位； (3)通 過分泌寄主細(xì)胞壁水解酶等直接突破果實(shí)表皮的防御機(jī)制（ Prusky 和Lichter, 20xx）。 作者簽名： 日期： 年 月 日 導(dǎo)師簽名： 日期： 年 月 日 指導(dǎo)教師評(píng)閱書 指導(dǎo)教師評(píng)價(jià)： 一、撰寫（設(shè)計(jì)）過程 學(xué)生在論文（設(shè)計(jì)）過程中的治學(xué)態(tài)度、工作精神 □