乳酸菌的鑒定與乳酸菌的抑菌性畢業(yè)論文-文庫吧資料
2025-07-01 20:30本頁面
【正文】 化氫酶溶解在50mmol /L 的磷酸緩沖液( pH= )中配成母液,加入到發(fā)酵液中使過氧化氫酶的終濃度為5mg/mL,在37℃水浴中溫育2h后取出,檢測過氧化氫酶處理后發(fā)酵液的抑菌活性。 乳酸菌的抑菌實驗管碟法a) 將擴大培養(yǎng)的菌液進行離心(條件: 10000r/min,10min)；b) 在培養(yǎng)皿中加入約15ml的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基；c) 待第一層培養(yǎng)基冷卻后，加入混有致病菌的培養(yǎng)基約15ml；d) 待培養(yǎng)基冷卻后，加入牛津杯進行固定；e) 在牛津杯中加入菌液及無菌水進行對照(等邊三角形)；f) 將培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)(條件:37℃,24h)。 革蘭氏染色洗片→載玻片上滴一滴蒸餾水→玻璃棒蘸取一滴菌液在玻片上→晾干→結晶紫初染1min→水洗→晾干→碘液媒染30s→水洗→晾干→95%酒精脫色20s→水洗→晾干→番紅復染→水洗→晾干→鏡檢。以無菌操作取奶酪稀釋液1010105 ，加入15mL BCG牛乳培養(yǎng)基，帶培養(yǎng)基凝固后放入恒溫培養(yǎng)箱中，37℃恒溫培養(yǎng)24h。 樣品的處理奶酪的處理：以無菌操作取奶酪1g，放入含有9mL滅菌加熱至含40℃左右的生理鹽水的滅菌廣口瓶內，待奶酪溶解制成1:10的均勻稀釋液，并用無菌生理鹽水逐級稀釋至1010105。4H2O：分析純試劑,上海美興化工有限公司；吐溫80（聚山梨酯80）：分析純試劑,上海申宇醫(yī)藥化工有限公司。 試劑脫脂奶粉：光明乳業(yè)股份有限公司；%溴甲酚綠酒精溶液：自配；瓊脂：生化試劑,福建泉州市泉港化工廠；酵母膏：生化試劑,原上海酵母廠；蛋白胨：生化試劑,上海化學試劑采購供應站中心化工廠；牛肉膏：生化試劑,北京奧博星生物技術有限責任公司；葡萄糖：分析純試劑,國藥集團化學試劑有限公司；乙酸鈉：分析純試劑,成都科龍化工試劑廠；檸檬酸三銨：分析純試劑,上海試四赫維化工有限公司；磷酸氫二鉀：分析純試劑,上海光鏵科技有限公司；MgSO4SS培養(yǎng)基：牛肉粉5g、月示胨5g、乳糖10g、枸櫞酸鐵1g、瓊脂17g、蒸餾水1000mL。PY培養(yǎng)基（100mL）：，（鹽溶液成分:無水CaCl2 ，MgSO4 ，K2HPO4 ，KH2PO4 ，NaHCO3 ，NaCl ，將CaCl2和MgSO4一起溶解于300mL蒸餾水中，再加500mL蒸餾水，一邊攪拌一邊緩慢加入其他鹽類，繼續(xù)攪拌直到全部溶解，加蒸餾水定容至1000mL，混合后貯備于4℃)。4H2O 、吐溫80 、蒸餾水1000mL。H2O 、MgSO4(PH , 121℃滅菌20min) A、B液滅菌后在無菌狀態(tài)下混勻后倒平板。第2章 材料與方法 材料 樣品市售進口奶酪 培養(yǎng)基BCG培養(yǎng)基：A、B液滅菌后混勻。乳酸菌在發(fā)酵過程中可以產生一系列物質,能夠抑制或殺死一些食物腐敗菌,其中起主要抑菌作用的是細菌素,其具有一定的熱穩(wěn)定性,易被人體消化道的部分蛋白酶降解,并且不會在體內積蓄引起不良反應。本實驗欲從進口干酪中分離乳酸菌，并研究各種乳酸菌對食品中常見致病菌的抑制作用。這些抑菌物質不僅不破壞食品的風味和組織狀態(tài)，還可以抑制腐敗菌和病原菌的生長，從而防止腐敗，延長食品的保藏期。乳酸菌是正常人畜腸道中極為重要的生理菌群，擔負著人畜機體多種重要的生理功能，具有維持人體中微生態(tài)平衡作用。少數為異型發(fā)酵，如腸膜狀明串珠菌（Leuconostoc mesenteroides）是制藥工業(yè)上生產右旋糖酐（即代血漿）的重要菌種，但也是制糖工業(yè)的一種有害菌，常使糖汁發(fā)粘稠而無法加工。到目前為止，人類日常食用的泡菜、酸奶、醬油、豆豉等，都是應用乳酸菌這種原始而簡單的隨機天然發(fā)酵的代謝產物。今天，利用乳酸菌生產的健康食品已經一躍成為全世界關注的健康食品。 乳酸菌的研究歷史 早在20世紀初，俄國著名的生物學家梅契尼柯夫（Mechnikoff,18451916），在他獲得諾貝爾獎的“長壽學說”里已明確指出，保加利亞的巴爾干島地區(qū)居民，日常生活中經常飲用的酸奶中含有大量的乳酸菌，這些乳酸菌能夠定植在人體內，有效地抑制有害菌的生長，減少由于腸道內有害菌產生的毒素對整個機體的毒害，這是保加利亞地區(qū)居民長壽的重要原因。因為動物源取自動物，因菌種常處于相對不穩(wěn)定狀態(tài)，其生物功效也較不穩(wěn)定，且在大量食用時，很容易導致人體動物蛋白過敏，即排斥反應。 乳酸菌的類型乳酸菌大體上可分為兩大類。提高SOD酶活力，消除人體自由基，具抗衰老、延年益壽作用。免疫調節(jié)作用
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