乳酸菌畢業(yè)設計論-文庫吧資料
2025-06-11 07:25本頁面
【正文】 5ml； d) 待培養(yǎng)基冷卻后，加入牛津杯進行固定； e) 在牛津杯中加入菌液及無菌水進行對照 (等邊三角形 )； f) 將培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng) (條件 :37℃ ,24h)。 革蘭氏染色 洗片→載玻片上滴一滴蒸餾水→玻璃棒蘸取一滴菌液在玻片上→晾干→結晶紫初染 1min→水洗→晾干→碘液媒染 30s→水洗→晾干→ 95%酒精脫色 20s→水洗→晾干→番紅復染→水洗→晾干→鏡檢。以無菌操作取奶酪稀釋液 10 10 105 各 置于滅菌后的平板中，加入 15mL BCG 牛乳培養(yǎng)基，帶培養(yǎng)基凝固后放入恒溫培養(yǎng)箱 中， 37℃恒溫培養(yǎng) 24h。 樣品的處理 奶酪的 處理 ：以無菌操作取奶酪 1g，放入含有 9mL 滅菌加熱至含 40℃左右的 生理鹽水的滅菌廣口瓶內(nèi)，待奶酪溶解制成 1:10 的均勻稀釋液，并用無菌生理鹽水逐級稀釋至 10 10 105。 4H2O：分析純試劑 ,上海美興化工有限公司； 吐溫 80（聚山梨酯 80）：分析純試劑 ,上海申宇醫(yī)藥化工有限公司。 試劑 脫脂奶粉：光明乳 業(yè)股份有限公司； %溴甲酚綠酒精溶液：自配； 瓊脂：生化試劑 ,福建泉州市泉港化工廠； 酵母膏：生化試劑 ,原上海酵母廠； 蛋白胨：生化試劑 ,上海化學試劑采購供應站中心化工廠； 牛肉膏：生化試劑 ,北京奧博星生物技術有限責任公司； 葡萄糖：分析純試劑 ,國藥集團化學試劑有限公司； 中南大學 畢業(yè)設計（論文） 共 14 頁，第 5 頁 乙酸鈉：分析純試劑 ,成都科龍化工試劑廠； 檸檬酸三銨：分析純試劑 ,上海試四赫維化工有限公司； 磷酸氫二鉀：分析純試劑 ,上海光鏵科技有限公司； MgSO4 SS培養(yǎng)基：牛肉粉 5g、月示胨 5g、三號膽鹽 、枸櫞酸鈉 、乳糖 10g、枸櫞酸鐵 1g、硫代硫酸鈉 、中性紅 、煌綠 、瓊脂 17g、蒸餾水 1000mL。 PY 培養(yǎng)基（ 100mL） ： 蛋白胨 ， 酵母提取物 ， 無機鹽溶液 （ 鹽溶液成分 :無水 CaCl2 ， MgSO4 ， K2HPO4 ， KH2PO4 ，NaHCO3 ， NaCl ， 將 CaCl2和 MgSO4一起溶解于 300mL 蒸餾水中 ， 再加 500mL 蒸餾水 ， 一邊攪拌一邊緩慢加入其他鹽類 ， 繼續(xù)攪拌直到全部溶解 ，加蒸餾水定容至 1000mL， 混合后貯備于 4℃ )。 4H2O 、吐溫 80 、蒸餾水 1000mL。 H2O 、 MgSO4 (PH , 121℃滅菌 20min) A、B液 滅菌后在無菌狀態(tài)下混勻后倒平板。 中南大學 畢業(yè)設計（論文） 共 14 頁，第 4 頁 第 2 章 材料與方法 材料 樣品 市售進口奶酪 培養(yǎng)基 BCG 培養(yǎng)基： A、 B 液滅菌后混勻。乳酸菌在發(fā)酵過程中可以產(chǎn)生一系列物質 ,能夠抑制或殺死一些食物腐敗菌 ,其中起主要抑菌作用的是細菌素 ,其具有一定的熱穩(wěn)定性 ,易被人體消化道的部分蛋白酶降解 ,并且不會在體內(nèi)積蓄引起不良反應。本實驗欲從進口干酪中分離乳酸菌，并研究各種乳酸菌對食品中常見致病菌的抑制作用。這些抑菌物質不僅不破壞食品的風味和組織狀態(tài)，還可以抑制腐敗菌和病原菌的生長，從而防止腐敗，延長食品的保藏期。乳酸菌是正常人畜腸道中極為重要的生理菌群，擔負著人畜機體多種重要的生理功能 ，具有維持人體中微生態(tài)平衡作用。少數(shù)為異型發(fā)酵，如腸膜狀明串珠菌（ Leuconostoc mesenteroides）是制藥工業(yè)上生產(chǎn)右旋糖酐（即代血漿）的重要菌種，但也是制糖工業(yè)的一種 有 害菌，常使糖汁發(fā)粘稠而無法加工。到目前為止，人類日常食用的 泡菜 、酸奶、 醬油 、豆豉等，都是應用乳酸菌這種原始而簡單的隨機天然發(fā)酵的代謝產(chǎn)物。今天，利用乳酸菌生產(chǎn)的健康食品已經(jīng)一躍成為全世界關注的健康食品。 乳 酸菌的研究歷史 早在 20 世紀初， 俄國 著名的生物學家梅契尼柯夫（ Mechnikoff,18451916），在他獲得諾貝爾獎的 “ 長壽學說 ” 里已明確指出，保加利亞的 巴爾干 島地區(qū)居民，日常生活中經(jīng)常飲用的酸奶中含有大量的乳酸菌，這些乳酸菌能夠定植 在人體內(nèi)，有效地抑制有害菌的生長，減少由于腸道內(nèi)有害菌產(chǎn)生的毒素對整個機體的毒害，這是保加利亞地區(qū)居民長壽的重要原因。因為動物源取自動物，因菌種常處于相對不穩(wěn)定狀態(tài)，其生物功效也較不穩(wěn)定，且在大量食用時，很容易導致人體動物蛋白過敏，即排斥反應。 乳酸菌的類型 乳酸菌大體上可分為兩大類。 提高 SOD 酶活力 ，消除人體 自由基 ，具抗衰老、延年益壽作用。 免疫調(diào)節(jié)作用，增強人體 免疫力 和 抵抗力 。 抑制 腐敗菌 的繁殖，消解腐敗菌產(chǎn)生的毒素，清除腸道垃圾。 促進 蛋白質 、 單糖 及 鈣 、 鎂 等營養(yǎng)物質的吸收，產(chǎn)生 維生素 B 族 等大量有益物質。也完全符合諾貝爾得獎者生物學家 梅契尼柯夫 “ 長壽學說 ” 里所得出的結論，乳酸菌 =益生菌 =長壽菌。所以，有意增加人體腸道內(nèi)乳酸菌的數(shù)量就顯得非常重要。因此，人體內(nèi)乳酸菌數(shù)量的實際狀況，已經(jīng)成為檢驗人們是否健康長壽的重要指標。 而人體腸道內(nèi)乳酸菌擁有的數(shù)量，隨著人的年齡增長會逐漸減少，當人到老年或生病時，乳酸菌數(shù)量可能下降 100 至 1000 倍，直到老年人臨終完全消失。益生菌是一個龐大的菌群，有害菌也是一個不小的菌群，當益生菌占優(yōu)勢時（占總數(shù)的 80%以上），人體則保持健康狀態(tài)，否則處于亞健康或非健康狀態(tài)。 1. 1 乳酸菌的生理功能 在人體腸道內(nèi)棲息著數(shù)百種的細菌，其數(shù)量超過百萬億個。乳酸菌能夠將碳水化合物發(fā)酵成乳酸，因而得名。目前已被國內(nèi)外生物學家所證實，腸內(nèi)乳酸菌與健康長壽有著非常密切的直接關系 。這是一群相當龐雜的細菌，目前至少可分為 18 個屬，共有 200 多種。s manual of determinative bacteriology. Key words： La
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