食品質(zhì)量檢驗(yàn)員培訓(xùn)資料-文庫(kù)吧資料
2025-01-13 23:36本頁(yè)面
【正文】 未知樣品中加入一定量的標(biāo)樣，配成濃度為 Cx+△ C Cx+△ C2…一系列樣品，分別顯色后再測(cè)定吸光度為 A A2… 最后在坐標(biāo)紙上畫(huà)圖，以吸以為縱坐標(biāo)，以濃度 C為橫坐標(biāo)，分別畫(huà)出 △ C1 、 △ C2所對(duì)應(yīng)的 A A2等各點(diǎn)，連成直線后延長(zhǎng)，與橫軸的交點(diǎn) Cx。操作時(shí)應(yīng)注意配制標(biāo)樣的濃度要接近被測(cè)樣品的濃度，這樣能減少測(cè)量誤差。 配一個(gè)已知被測(cè)組分濃度為 Cs的標(biāo)樣，測(cè)其吸光度為 As，在同樣條件下再測(cè)未知品的吸光度為 Ax，通過(guò)比例計(jì)算可求出未知樣品的濃度 Cx。 這個(gè)方法簡(jiǎn)單方便，適用于多個(gè)樣品的系列分析。配制一系列適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，顯色后分別測(cè)定其吸光度，把吸光度 A對(duì)濃度 c作圖，即得工作曲線。27紫外可見(jiàn)分光光度法的定量方法 ：也稱工作曲線法，適用于大量重復(fù)的樣品分析，是應(yīng)用最多的方法。26紫外可見(jiàn)分光光度法的定量方法 紫外可見(jiàn)分光光度分析的定量依據(jù)是光吸收定律。 (1)控制被測(cè)溶液的濃度。 吸光度在 ～ 誤差最小。 (2)如果顯色劑或其他試劑有吸收，應(yīng)用空白溶液 (不加試樣的溶液 )作參比溶液。用此波長(zhǎng)測(cè)定，靈敏度雖有所下降，卻消除了干擾，提高了測(cè)定的準(zhǔn)確度和選擇性。如用此波長(zhǎng)測(cè)定鈷，則未反應(yīng)的顯色劑會(huì)造成干擾而降低測(cè)定的準(zhǔn)確度。但應(yīng)注意盡可能選擇 ε值隨波長(zhǎng)改變的變化不太大的波長(zhǎng)區(qū)域。使測(cè)定有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度。23紫外可見(jiàn)分光光度法 測(cè)量條件的選擇 顯色條件的選擇： ① 要注意顯色劑用量； ② 要注意酸度； ③ 顯色溫度 ④ 顯色時(shí)間。在分析工作中選擇合適的顯色反應(yīng)并嚴(yán)格控制反應(yīng)條件是十分重要的。12紫外可見(jiàn)分光光度法 比色皿（吸收池）13紫外可見(jiàn)分光光度法 檢測(cè)系統(tǒng)（光電池或光電倍增管，監(jiān)測(cè)器）1415紫外可見(jiàn)分光光度法 721型分光光度計(jì)16紫外可見(jiàn)分光光度法 722型分光光度計(jì)17紫外可見(jiàn)分光光度法 752型分光光度計(jì)18紫外可見(jiàn)分光光度法 754型分光光度計(jì) 732型分光光度計(jì) 7230型分光光度計(jì)19紫外可見(jiàn)分光光度法 北京普析通用儀器有限責(zé)任公司 T6 新銳分光光度計(jì)20紫外可見(jiàn)分光光度法 原理： 測(cè)定時(shí)，溶液中的物質(zhì)對(duì)光的吸收具有選擇性，其光能量減弱的程度和物質(zhì)的濃度有一定的比例關(guān)系 : 朗伯比爾定律 A=εcL 式中： A－－吸光度 ε －－摩爾吸收系數(shù) C－－溶液物質(zhì)的量濃度 L－－溶液的光徑長(zhǎng)度21紫外可見(jiàn)分光光度法 測(cè)量條件的選擇 顯色反應(yīng)及顯色條件的選擇： 在進(jìn)行光度分析時(shí)，首先要把待測(cè)組分轉(zhuǎn)變成有色化合物，然后進(jìn)行比色或光度測(cè)定。 主要部件 ： 光源、單色器、吸收池、檢測(cè)系統(tǒng)10紫外可見(jiàn)分光光度法 光源： 可見(jiàn)光區(qū)域用鎢燈（可發(fā)射出波長(zhǎng)為360～ 780nm的復(fù)合光） 紫外光區(qū)
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