【正文】 回收正丁醇 ,殘留物以 層析 ,以 %甲醇溶液洗脫 ,濃縮至干 ,殘留物加甲醇溶解并定量。以人參皂苷 ,或者紋股藍總苷 ,人 參皂苷、人參皂苷、人參二醇對照品計算含量。 湖北中醫(yī)學院 屆碩士畢業(yè)論丈 第頁絞股藍 %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質量標準的研究 ..大孔吸附樹脂一比色法 樣品乙醚脫脂后 ,用甲醇回流提取 ,回收甲醇 ,殘渣加 %氫氧 化鈉溶液溶解 ,加入到已處理好的大孔吸附樹脂柱上 ,用 %氫氧化 鈉溶液和水液沖洗后再用 %乙醇洗脫 ,收集乙醇洗脫液 ,蒸干 ,殘 渣加甲醇稀釋至刻度 ,加入 %香草醛冰醋酸溶液和高氯酸 ,予℃ 測定吸收 水浴中加熱 分鐘后 ,冰水浴冷卻 ,加入冰醋酸于 度”“ . 樣品以甲醇回流提取 ,殘渣加水溶解后通過預先處理好的大孔吸 附樹脂柱 ,以甲醇洗脫 ,洗脫液上氧化鋁柱 ,以 %甲 醇溶液洗脫 , 洗脫濃縮至干 ,殘留物加甲醇溶解并定量 ,加香草醛冰醋酸溶液和高 氯酸 ,置 ℃水浴中加熱 分鐘 ,冷后加冰醋酸 ,用分光光度法在波長處測定吸收度 ,并以人參皂甙。 絞股藍的含量測定 . 皂苷類成分的測定 由于絞股藍含有皂苷成分種類頗多 ,因而合理而精確地測定其皂 苷的含量不容易 .目前 ,使用高效液相色譜法測定絞股藍中單一的化 學成分的含量未見報道 .絞股藍的含量測定方法主要有 : ..重量法 采用水提液脫脂后 ,用正丁醇萃取 ,莘取物蒸干后 稱重 ,計算含量。有人曾做 了實驗 ,結果在紋股藍皂苷元的薄層色譜中在與人參二醇、人參三醇 對照品相對應的位置上無相同顏 色的斑點 ,改換多種展開系統(tǒng)屢試結 果均如此。 ?絞股藍皂苷經(jīng)酸水解后有與人參二醇和人參三 醇 ,值和顏色相同的斑點。 在提取方面 ,曾采用甲醇回流提取法提取 ,在甲醇提取前先用乙 醚回流提取以除去葉綠素及部分親脂性成分 ,甲醇提取物再用活性炭 脫色一次 ,回收甲醇后用正丁醇提取 。 另外在吸附劑方面使用硅膠及硅膠 。對照品也無對應 :: :: 的斑點。結果從色譜中可見到個不同產(chǎn)地的絞股藍樣品 ,除 在 ,值為 . 處有一具棕褐色淺蘭色熒光的斑點相一致外 ,其 它樣品的斑點均不一致 ,且與人參皂苷 ,、。吸取上述不同產(chǎn)地的供試品溶液及人參皂苷 ,、 .對照 品溶液 /各 ,分別點樣于同一含有羧甲基纖維素鈉為粘 :: : 合劑的硅膠薄層板上 ,以氯仿一醋酸乙酯一甲醇一水 , ℃以下放置的下層為展開劑 ,展開 ,取出 ,晾干。一。 或以絞股藍皂苷作為對照品 ,展開劑多是常用的人參皂苷展開劑 ,一 般所得 ?個斑點 ,與有些人參總皂苷樣品的色譜很相似 ,實際上反 映不出絞股藍的特點“”。供試品色譜中雖然斑點分離較理 想 ,但各地樣品的斑點數(shù)及 ,值或顏色都不盡相同”“”。對照品 ,加甲醇制成各含的 混合液 ,作為對照品溶液“”。 ,。 湖北中醫(yī)學院屆碩士畢業(yè)論文 第 頁絞股藍 %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質量標準的研究 參考文獻的方法”“““川 ,結果色譜圖大都存在雜質成分和葉綠 素干擾較大的缺點?！啊薄??絞股藍皂苷均具有四環(huán)三萜的達瑪烷型 結構 ,桔基均為低聚糖 ,其中種分別與人參皂苷。噴以對羥基苯甲醛一硫酸溶液 ,于 ℃加熱分鐘 ,可以見到 與對照藥材、絞股藍總苷、人參二醇和人參皂苷。顯色劑噴以 %硫酸乙醇溶液 ,于 ℃加熱 分鐘顯色 。氯仿一乙酸乙酯一甲醇 :。 .特殊毒性 微核試驗、 試驗 和睪丸生殖細胞染色體畸變分 析實驗”“ ,姊妹染色體互換試驗””均表明 ,絞股藍無致突變 作用。血常規(guī)、腎功能、肝功能、心電圖及心 ,肝 ,腎、睪丸的病 理檢查均無異常改變”“。為 . /”“。亦有報道 ,絞股藍總苷對小鼠腹腔注射 的 為 /,口服無毒性 。為 ./”” .不同產(chǎn)地的絞股藍 ~ 總苷和總苷Ⅱ腹腔注射 ,。 ./“” ,水提浸膏給小鼠腹腔注射 為 ./ ”” 。川 . 湖北中醫(yī)學院屆碩士畢業(yè)論文 第頁絞股藍 %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質量標準的研究 毒副作用 .土 .急性毒性 絞股藍提取物給小鼠灌胃的 ,。 對消化系統(tǒng)的影響 .保肝作用 絞股藍對四氯化碳肝損傷大鼠 ,有抑制受損肝組織 的脂質過氧化作用“”。 .防治糖皮質激素的副作用 絞股藍皂苷腹腔注射 ,能抑制地塞 米松所致的大鼠腎上腺、胸腺萎縮以及血漿皮質醇含量 減少”’”。川?！薄? .對學習記憶有促進作用””。 對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響 .鎮(zhèn)靜 ,催眠作用 絞股藍能抑制小鼠的自發(fā)活動 ,可明顯延長 小鼠巴比妥鈉睡眠時間 ,增強閡下巴比妥鈉的催眠作用”’”’“圳。絞股藍能防止正常細胞癌化 ,并促進細胞發(fā)揮 自我治愈的能力 ,引導癌化細胞恢復正?！?。 絞股藍總苷能恢復環(huán)磷酰胺所致的血 .對體液免疫功能的影響 清溶血素下降和增強脾淋巴細胞增殖反應 ,提高小鼠特異性抗體溶 血素含量和與含量”’” . 抗腫瘤作用 紋股藍皂苷對胃 .直腸 .乳腺 ,子宮、口腔、食道、 湖北中醫(yī)學院屆碩士畢業(yè)論丈 第 頁絞股藍 %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質量標準的研究 膽囊 ,胰腺、肝 .肺、前列腺、皮膚及其它腫瘤等均有抑制效果。 對免疫系統(tǒng)的影響 .對非特異性免疫的影響 紋股藍能增加正常小鼠脾臟和胸腺的 重量 ,對抗環(huán)磷酰胺所致小鼠脾臟 ,胸腺重量下降”’” . .對細胞免 疫功能的影響 絞股藍水提物喂養(yǎng) 天的大白鼠 ,其 淋巴細胞數(shù)增加顯著。 .降血糖和改善糖代謝作用 絞股藍水提物灌胃四氧嘧啶糖尿病 小白鼠 ,連續(xù)天 ,有明顯的降糖作用 ,并能明顯改善老年大鼠血糖 耐量低下”。絞股藍總皂苷給高脂小鼠、大鼠灌胃 ,連續(xù) 天 ,能顯著降低低密度脂蛋白和極低密度脂蛋白含量。 .延長動物壽命 紋股藍提取物 ,總苷和復方制劑均能顯著延長 雄性和雌性果蠅的平均壽命和最高壽命“’ ?。多搪水解產(chǎn)物中還含有鼠李糖 等”。同時還含有種人體必需的常量元素 :鈣、 磷、鉀、鈉、鎂“”。苯丙氨酸 .組氨酸 ,賴氨酸。 到人參皂苷 , 第頁 湖北中醫(yī)學院屆碩士畢業(yè)論文絞股藍 %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質量標準的研究 絞股藍皂苷的結構通式 絞股藍酮苷 人參二醇人參皂苷 黃酮類 絞股藍中的黃酮化合物有 ,一二羥基一’ ,一二甲氧基黃酮即 ,一二甲氧基山萘酚、蘆丁 、商陸苷 、喙果黃 素 、山萘酚 、商陸素 .槲皮素 ,異鼠李素 等““ ?。、 ,.、 :,?. 和也是絞股藍與人參的共有成分”。、’一丙二?；藚⒃碥铡? 、 ’二?；g股藍皂苷’ 。 第二節(jié) 化學成分研究概況 皂苷類 絞股藍全草主要化學成分為絞股藍皂苷 ,其基本化學結構為四環(huán) 三萜的達瑪烷型。喙果絞股藍在廣西壯族民間入藥 ,治療肝炎和慢性氣管炎。古籍本草記載及現(xiàn)代的《全國中草藥匯編》下冊、Ⅸ中藥大 辭典》等典籍上均以絞股藍為藥用正品。主要分布于瓊中、保亭 ,崖縣、東方等地。文獻報道貴州省絞股藍屬植物有種 ,即絞股藍丘 ? ‖、長梗紋股藍丘口 。白脈紋股藍、疏花絞股藍和毛果喙果絞股 藍為安徽特有種 ,光葉絞股藍、喙果統(tǒng)股藍、毛絞股藍、五柱絞股藍 為新發(fā)現(xiàn)的安徽地理分布新記錄植物 .四川省有絞股藍屬植物種 : 心籽紋股藍丘 ,長梗絞股藍 和絞股藍 丘。其中漿果類的絞 股藍亞屬有紋股藍口 .,光葉絞股藍護 ..毛絞股藍 正、白脈絞股藍占 .,歙縣絞股藍丘 。有光葉絞股藍 .、絞股藍岔 毛葉絞股藍擴 .、緬甸絞股藍 ,長梗絞股藍尻 ,.肋種絞股藍屬植物 .安徽省具有豐富的絞股藍種質資源和蘊藏 量 ,可以認為安徽是我國絞股藍屬植物的重要分布和分化中心之一。其中絞股藍和長梗絞股藍分布最廣 ,約占總面積的 %和 %, 其 它種占 %。國內(nèi)外學者 對其展開了大量的研究 ,現(xiàn)將其研究概況綜述如下 : 第一節(jié) 生藥學研究概況 絞股藍肋 ,Ⅱ歷Ⅳ力‖ ,為葫蘆科絞股 藍屬的多年生草質藤本植物。絞股藍味苦 ,微甘 ,性寒 ,歸心、肝 ,胃經(jīng) ,有止咳化痰 ,健脾理氣 。 .建立了絞股藍 %總皂苷的提取物的質量標準。 本課題的主要研究成果 : .建立了絞股藍 %總皂苷提取物提取、純化工藝。、對絞股藍 及其提取物指紋圖譜研究 ,能從整體上全面評價和控制中藥材和提取 物的質量 ,為管理部門對中藥材及其提取物的質量監(jiān)控提供科學的實 驗依據(jù)。、采用多學科綜合研究 ,以提取物過程 的本質變化為核心 ,制備提取物并建立符合規(guī)范化生產(chǎn)的、中國藥 典》能夠接受的提取物質量標準 ,實現(xiàn)中藥提取物規(guī)范化是中藥現(xiàn)代 化最重要課題之一。 中藥質量標準的研究是當前制約我國中藥發(fā)展的重要環(huán)節(jié)之一 , 它也是中藥現(xiàn)代化 ,產(chǎn)業(yè)化、國際化進程中的“瓶頸” ,重點解決好 這一問題對于保證中藥原料及產(chǎn)品質量 ,確保中藥的 安全、有效和穩(wěn) 定 ,建立統(tǒng)一的中藥行業(yè)生產(chǎn)規(guī)范 ,促進中藥國際化發(fā)展具有十分重 大的意義。 中藥指紋圖譜既能反映中藥提取物整體固有特征 ,又能 客觀評價中藥質量量化標準 ,是中藥質量標準研究中最重要 % 的課題之一。根據(jù)國家科 技部關于加快中藥材產(chǎn)業(yè)化發(fā)展步伐的決策及國家要求對絞股藍等 二十幾味常用中藥品種、中藥標準提取物進行重點開發(fā)研究的精神 , 本課題對絞股藍標準提取物的生產(chǎn)加工工藝及產(chǎn)品質量標準進行深 入細致的研究。因此 ,實現(xiàn)中藥提取物規(guī)范化是中藥現(xiàn)代化最