【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 。“。 對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響 .鎮(zhèn)靜 ,催眠作用 絞股藍(lán)能抑制小鼠的自發(fā)活動(dòng) ,可明顯延長(zhǎng) 小鼠巴比妥鈉睡眠時(shí)間 ,增強(qiáng)閡下巴比妥鈉的催眠作用”’”’“圳。 .鎮(zhèn)痛作用 絞股藍(lán)提取物能明顯抑制醋酸所致小鼠扭體反應(yīng) , 熱板法也顯示總苷浸膏對(duì)小鼠有顯著的鎮(zhèn)痛作用”。 .對(duì)學(xué)習(xí)記憶有促進(jìn)作用””。 對(duì)心血管系統(tǒng)的影響 .對(duì)心臟的作用 絞股藍(lán)水提液對(duì)離體兔心有增加冠脈流 量的作 用 ,使心率減慢 ,并降低心臟收縮的振幅 ,降低心肌耗氧 ,對(duì)心肌缺 血有保護(hù)作用“。’”。 .對(duì)血管、血壓的影響 絞股藍(lán)水提物能擴(kuò)張狗外周血管 ,增加 腦血流量 ,絞股藍(lán)總苷靜注對(duì)麻醉貓呈顯著降壓作用 ,維持時(shí)問(wèn)在 分鐘以上 ,且血壓下降程度與劑量呈依賴關(guān)系“。川。 對(duì)內(nèi)分泌的影響 .對(duì)腺體和性活動(dòng)的影響 絞股藍(lán)提取物灌胃能顯著增加未成熟 小白鼠睪丸 ,精囊、前列腺和子官的重量 ,提示有性激素樣作用“’”’”。 .防治糖皮質(zhì)激素的副作用 絞股藍(lán)皂苷腹腔注射 ,能抑制地塞 米松所致的大鼠腎上腺、胸腺萎縮以及血漿皮質(zhì)醇含量 減少”’”。 .對(duì)血漿促腎上腺皮質(zhì)激素的影響 腹腔注射紋股藍(lán)提 取物能明顯增加正常大鼠血漿的含量”。 對(duì)消化系統(tǒng)的影響 .保肝作用 絞股藍(lán)對(duì)四氯化碳肝損傷大鼠 ,有抑制受損肝組織 的脂質(zhì)過(guò)氧化作用“”。 .抗?jié)冏饔? 紋股藍(lán)總苷對(duì)水浸造成的應(yīng)激胃潰瘍有明顯的保 護(hù)作用 ,對(duì)幽門(mén)結(jié)扎大鼠胃潰瘍亦有一定抑制作用“。川 . 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第頁(yè)絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 毒副作用 .土 .急性毒性 絞股藍(lán)提取物給小鼠灌胃的 ,。為 .177。 ./“” ,水提浸膏給小鼠腹腔注射 為 ./ ”” 。絞股藍(lán)總苷浸膏小鼠灌胃 ,。為 ./”” .不同產(chǎn)地的絞股藍(lán) ~ 總苷和總苷Ⅱ腹腔注射 ,。分別為 . ./和 .? ./”引 。亦有報(bào)道 ,絞股藍(lán)總苷對(duì)小鼠腹腔注射 的 為 /,口服無(wú)毒性 。大鼠腹腔注射的 。為 . /”“。 .長(zhǎng)期毒性 :以每日 /絞股藍(lán)飼食給藥連續(xù) 天 ,大白鼠一 般狀態(tài)。血常規(guī)、腎功能、肝功能、心電圖及心 ,肝 ,腎、睪丸的病 理檢查均無(wú)異常改變”“。以每日 /劑量的絞股藍(lán)總苷連續(xù)喂藥一 個(gè)月的大鼠 ,其一般情況、體重增長(zhǎng) .進(jìn)食量 ,血尿常規(guī)和病理組織 學(xué)檢查均未發(fā)現(xiàn)異?！薄薄? .特殊毒性 微核試驗(yàn)、 試驗(yàn) 和睪丸生殖細(xì)胞染色體畸變分 析實(shí)驗(yàn)”“ ,姊妹染色體互換試驗(yàn)””均表明 ,絞股藍(lán)無(wú)致突變 作用。 第四節(jié)紋股藍(lán)質(zhì)量控制研究概況 絞股藍(lán)鑒別 絞股藍(lán)及其制劑的鑒別多用薄層層析法”“”’”’“’”’ ?,用硅膠、 硅膠 :,.等為吸附劑 ,以對(duì)照藥材、絞股藍(lán)總皂苷 ,人參二醇和人參 皂苷 ,對(duì)照檢測(cè) ,展開(kāi)劑為氯仿一乙酸乙酯一乙醇一水 : ::.: : 正丁醇一乙酸乙酯一水 :。氯仿一乙酸乙酯一甲醇 :。氯 : 仿一甲醇一水 : 等。顯色劑噴以 %硫酸乙醇溶液 ,于 ℃加熱 分鐘顯色 。噴以 %三氯化銻氯仿溶液 ,于 ℃加熱 分鐘 顯 色 。噴以對(duì)羥基苯甲醛一硫酸溶液 ,于 ℃加熱分鐘 ,可以見(jiàn)到 與對(duì)照藥材、絞股藍(lán)總苷、人參二醇和人參皂苷。相應(yīng)的斑點(diǎn) . 根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)“?！啊薄??絞股藍(lán)皂苷均具有四環(huán)三萜的達(dá)瑪烷型 結(jié)構(gòu) ,桔基均為低聚糖 ,其中種分別與人參皂苷。 ,:.和 :結(jié)構(gòu)一致 ,其苷元有人參二醇和人參三醇等。 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第 頁(yè)絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 參考文獻(xiàn)的方法”“““川 ,結(jié)果色譜圖大都存在雜質(zhì)成分和葉綠 素干擾較大的缺點(diǎn)。 取不同產(chǎn)地的樣品粉末各 ,置具塞錐形瓶中 ,加少量水使?jié)? 潤(rùn)疏松 ,加 以水飽和的正丁醇 ,密塞 ,振搖 分鐘 ,放置小 時(shí) ,濾過(guò) ,濾液加入 ~活性碳攪勻 ,置水浴上加熱 分鐘 ,濾 過(guò) ,濾液蒸干 ,加水 溶解 ,用正丁醇提取次 ,每次 ,合 并正丁醇提取液 ,置水浴上蒸干 ,殘?jiān)眉状悸褰庾鳛楣┰嚻啡? 液 .另取人參皂苷。 ,。和。對(duì)照品 ,加甲醇制成各含的 混合液 ,作為對(duì)照品溶液“”。照薄層色譜法中國(guó)藥典 年版一 部附錄Ⅵ試驗(yàn) ,吸取上述溶液各 ~ ,分別點(diǎn)于同一含羧 甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠薄層板上 ,以正丁醇一甲醇一氯仿一水 % :.::的下層溶液為展開(kāi)劑 ,展開(kāi) ,取出 ,晾干 ,噴以 硫酸乙醇溶液 ,于 ℃烘分鐘。供試品色譜中雖然斑點(diǎn)分離較理 想 ,但各地樣品的斑點(diǎn)數(shù)及 ,值或顏色都不盡相同”“”。 另根據(jù)文獻(xiàn)”” ,由于絞股藍(lán)皂苷分離提純較為困難 ,多數(shù)文獻(xiàn)在 進(jìn)行薄層色譜鑒別時(shí) ,均以日本文獻(xiàn)報(bào)道為依據(jù)”” ,以人參皂苷。 或以絞股藍(lán)皂苷作為對(duì)照品 ,展開(kāi)劑多是常用的人參皂苷展開(kāi)劑 ,一 般所得 ?個(gè)斑點(diǎn) ,與有些人參總皂苷樣品的色譜很相似 ,實(shí)際上反 映不出絞股藍(lán)的特點(diǎn)“”。取不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)樣品適量 ,粉碎成粗粉 , 分別取 ,置 帶塞錐形瓶中 ,加甲醇 ,超聲提取分鐘 , 濾過(guò) ,濾液蒸干 ,殘?jiān)盟芙?,加入已裝好的氧化鋁 日 一大孔吸附樹(shù)脂。一。 :柱 ,用乙醇 ,水預(yù)冼 , . 再依次用水 %乙醇 Ⅲ洗脫 ,棄去洗脫液 ,繼用 %乙醇 洗脫 ,收集洗脫液 ,蒸干 ,分別用甲醇溶解 ,作為供試品溶 液“”。吸取上述不同產(chǎn)地的供試品溶液及人參皂苷 ,、 .對(duì)照 品溶液 /各 ,分別點(diǎn)樣于同一含有羧甲基纖維素鈉為粘 :: : 合劑的硅膠薄層板上 ,以氯仿一醋酸乙酯一甲醇一水 , ℃以下放置的下層為展開(kāi)劑 ,展開(kāi) ,取出 ,晾干。噴以 %硫酸 乙醇溶液 ,于 ℃烘約 分鐘 ,于日光下觀察色譜或在紫外光下觀 湖北中醫(yī)學(xué)院屆碩士畢業(yè)論文 第頁(yè)絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝 、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 察其熒光色譜。結(jié)果從色譜中可見(jiàn)到個(gè)不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)樣品 ,除 在 ,值為 . 處有一具棕褐色淺蘭色熒光的斑點(diǎn)相一致外 ,其 它樣品的斑點(diǎn)均不一致 ,且與人參皂苷 ,、。 ,。對(duì)照品也無(wú)對(duì)應(yīng) :: :: 的斑點(diǎn)。在展開(kāi)劑方面曾以氯仿一甲醇一水 、 : : : 及氯仿一醋酸乙酯一甲醇一水 、正丁醇一甲醇一氯仿一水 : .::等不同的展開(kāi)系統(tǒng)展開(kāi) ,結(jié)果也得不到理想的共同色譜。 另外在吸附劑方面使用硅膠及硅膠 。,硅膠板展出 的斑點(diǎn)分離效果較差 ,且有拖尾現(xiàn)象 ,用硅膠板展出后噴 硫酸乙醇溶液烘烤易變焦 ,故 應(yīng)注意掌握烘烤條件。 在提取方面 ,曾采用甲醇回流提取法提取 ,在甲醇提取前先用乙 醚回流提取以除去葉綠素及部分親脂性成分 ,甲醇提取物再用活性炭 脫色一次 ,回收甲醇后用正丁醇提取 。蒸干正丁醇后用甲醇溶解作供 試品溶液進(jìn)行薄層層析 ,結(jié)果斑點(diǎn)清晰、無(wú)拖尾、雜質(zhì)干擾少 ,但此 法對(duì)不同產(chǎn)地的絞股藍(lán)重現(xiàn)性不好”” . 文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)“’。 ?絞股藍(lán)皂苷經(jīng)酸水解后有與人參二醇和人參三 醇 ,值和顏色相同的斑點(diǎn)。其他斑點(diǎn)也有較好的重現(xiàn)性。有人曾做 了實(shí)驗(yàn) ,結(jié)果在紋股藍(lán)皂苷元的薄層色譜中在與人參二醇、人參三醇 對(duì)照品相對(duì)應(yīng)的位置上無(wú)相同顏 色的斑點(diǎn) ,改換多種展開(kāi)系統(tǒng)屢試結(jié) 果均如此。 另外在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中曾分別對(duì)比考察過(guò)不同產(chǎn)地的紋股藍(lán)莖葉的 薄層層析 ,結(jié)果薄層色譜基本一致 ,提示絞股藍(lán)的莖葉均有絞股藍(lán)皂 苷。 絞股藍(lán)的含量測(cè)定 . 皂苷類(lèi)成分的測(cè)定 由于絞股藍(lán)含有皂苷成分種類(lèi)頗多 ,因而合理而精確地測(cè)定其皂 苷的含量不容易 .目前 ,使用高效液相色譜法測(cè)定絞股藍(lán)中單一的化 學(xué)成分的含量未見(jiàn)報(bào)道 .絞股藍(lán)的含量測(cè)定方法主要有 : ..重量法 采用水提液脫脂后 ,用正丁醇萃取 ,莘取物蒸干后 稱重 ,計(jì)算含量。另一種是樣品經(jīng)樹(shù)脂柱分離后稱重 ,計(jì)算含量。 湖北中醫(yī)學(xué)院 屆碩士畢業(yè)論丈 第頁(yè)絞股藍(lán) %總皂苷提取物制備工藝、指紋圖譜與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究 ..大孔吸附樹(shù)脂一比色法 樣品乙醚脫脂后 ,用甲醇回流提取 ,回收甲醇 ,殘?jiān)?%氫氧 化鈉溶液溶解 ,加入到已處理好的大孔吸附樹(shù)脂柱上 ,用 %氫氧化 鈉溶液和水液沖洗后再用 %乙醇洗脫 ,收集乙醇洗脫液 ,蒸干 ,殘 渣加甲醇稀釋至刻度 ,加入 %香草醛冰醋酸溶液和高氯酸 ,予℃ 測(cè)定吸收 水浴中加熱 分鐘后 ,冰水浴冷卻 ,加入冰醋酸于 度”“ . 樣品以甲醇回流提取 ,殘?jiān)铀芙夂笸ㄟ^(guò)預(yù)先處理好的大孔吸 附樹(shù)脂柱 ,以甲醇洗脫 ,洗脫液上氧化鋁柱 ,以 %甲 醇溶液洗脫 , 洗脫濃縮至干 ,殘留物加甲醇溶解并定量 ,加香草醛冰醋酸溶液和高 氯酸 ,置 ℃水浴中加熱 分鐘 ,冷后加冰醋酸 ,用分光光度法在波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度 ,并以人參皂甙。為對(duì)照品計(jì)算總皂甙含 量 ?. .. 比色法”“ ? %乙醇溶解 ,濾液蒸 樣品以水為溶劑提取 ,濃縮至浸膏狀 ,用 發(fā)至無(wú)醇味 ,再用水溶解 ,水溶液用乙醚脫脂后 ,用水飽和的正丁醇 萃取 ,萃取液減壓濃縮至干 ,殘?jiān)谜〈既芙?,移入容量瓶中 ,用 甲醇稀釋至刻度 .加 %香草醛冰醋酸溶液新配和高氯酸 , 恒溫 分鐘 ,取出 ,用水冷卻至室溫 ,加冰醋酸 ,搖勻 ,用分光光 度 法在波長(zhǎng) 測(cè)定吸收度。以人參皂苷 ,或者紋股藍(lán)總苷 ,人 參皂苷、人參皂苷、人參二醇對(duì)照品計(jì)算含量。此法還用于絞股 藍(lán)及其其制劑中總皂苷的含量測(cè)定。 ..柱層析一比色法“” 樣品以甲醇回流提取 ,回收甲醇 ,殘