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分子生物學(xué)試題-文庫(kù)吧資料

2025-08-10 14:16本頁(yè)面
  

【正文】 是 2’脫氧核苷三磷酸。如果在多克隆位點(diǎn)上插入外源DNA片段,將使lac Z基因滅活,不能生成半乳糖苷酶,結(jié)果菌落出現(xiàn)白色。(十)、藍(lán)白篩選的原理?答:某些質(zhì)粒帶有大腸桿菌的半乳糖苷酶基因片段,在半乳糖苷酶基因的基因區(qū)外又另外引入了一段含多種單一限制酶位點(diǎn)的DNA序列。 依賴(lài)DNA的RNA聚合酶:識(shí)別特異性啟動(dòng)子,RNA轉(zhuǎn)錄。 堿性磷酸酶:催化去除DNA、RNA等的5磷酸基團(tuán)。 末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶:將脫氧核糖核酸加到DNA的3末端。 逆轉(zhuǎn)錄酶:依賴(lài)于RNA的DNA聚合酶,這是一種有效的轉(zhuǎn)錄RNA成為DNA的酶,產(chǎn)物DNA又稱(chēng)互補(bǔ)DNA。 DNA聚合酶:催化單核苷酸鏈延伸。 DNA連接酶:將兩段DNA分子拼接起來(lái)的酶。 限制性核酸內(nèi)切酶:是細(xì)菌產(chǎn)生的一類(lèi)能識(shí)別和切割雙鏈DNA分子內(nèi)特定的堿基順序的核酸水解酶。 Ca2+CaM依賴(lài)的蛋白激酶使目標(biāo)蛋白磷酸化。 IP3 使鈣通道打開(kāi),細(xì)胞內(nèi)Ca2+升高? 活化后的G蛋白激活PLC? 信號(hào)分子與受體結(jié)合,引起受體構(gòu)象變化? AC催化ATP生成cAMP? 受體活化G蛋白? 途徑:? 轉(zhuǎn)錄因子的磷酸化及轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用:活化的ERK可以轉(zhuǎn)至細(xì)胞核內(nèi),使某些轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子發(fā)生磷酸化,從而影響基因的轉(zhuǎn)錄。 MAPK的級(jí)聯(lián)激活:Raf是一種MAPKKK,它作用于MEK,使之磷酸化而激活,活化的MEK在作用于MAPK家族的ERK1,使之磷酸化激活由此完成了三級(jí)激活。Raf是MAPK級(jí)聯(lián)反應(yīng)的第一個(gè)分子,由此啟動(dòng)了MAPK的三級(jí)激活過(guò)程。 低分子量G蛋白R(shí)as的活化:SOS可促進(jìn)Ras釋放GDP,結(jié)合GTP的反應(yīng),使Ras激活。 調(diào)控分子SOS的活化:SOS含有可與SH3結(jié)構(gòu)域相結(jié)合的富含脯氨酸基序,當(dāng)Grb2結(jié)合到磷酸化的表皮生長(zhǎng)因子受體后,它的兩個(gè)SH3結(jié)構(gòu)域即可結(jié)合SOS,使之活化。Grb2是作為接頭蛋白結(jié)合到受體上。 (2)、mRNA選擇性剪接對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的作用(3)、mRNA運(yùn)輸?shù)目刂疲ㄎ澹⑹荏w的特點(diǎn)?答:高度專(zhuān)一性;高度親和性;可逆性;可飽和性;特定的作用模式(六)、表皮生長(zhǎng)因子介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑?答:表皮生長(zhǎng)因子受體是一個(gè)典型的蛋白酪氨酸激酶受體,這個(gè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的主要步驟是: ⑷反式作用因子的組合式調(diào)控作用:每一種反式作用因子結(jié)合順式作用元件后雖然可以發(fā)揮促進(jìn)或抑制作用,但反式作用因子對(duì)基因調(diào)控不是由單一因子完成的而是幾種因子組合發(fā)揮特定的作用。⑵反式作用因子與順式作用元件的結(jié)合:反式作用因子被激活后,即可識(shí)別并結(jié)合上游啟動(dòng)子元件和增強(qiáng)子中的保守性序列,對(duì)基因轉(zhuǎn)錄起調(diào)節(jié)作用。 轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成過(guò)程為:TFⅡD結(jié)合TATA盒;RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合TFⅡDDNA復(fù)合物形成一個(gè)閉合的復(fù)合物;其他轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶結(jié)合形成一個(gè)開(kāi)放復(fù)合物。 協(xié)調(diào)調(diào)節(jié):乳糖操縱子中的I基因編碼的阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控與CAP的正調(diào)控兩種機(jī)制,互相協(xié)調(diào)、互相制約。所以,乳糖操縱子的這種調(diào)控機(jī)制為可誘導(dǎo)的負(fù)調(diào)控。(二)、乳糖操縱子的作用機(jī)制?答:乳糖操縱子的組成:大腸桿菌乳糖操縱子含Z、Y、A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶,此外還有一個(gè)操縱序列O,一個(gè)啟動(dòng)子P和一個(gè)調(diào)節(jié)基因I。原核基因組的特點(diǎn):①為一條環(huán)狀雙鏈DNA;②只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn);③具有操縱子結(jié)構(gòu);④絕大部分為單拷貝;⑤可表達(dá)基因約50%,大于真核生物小于病毒;⑥基因一般是連續(xù)的,無(wú)內(nèi)含子;⑦重復(fù)序列很少。 問(wèn)答題(一)、病毒、原核、真核基因組的特點(diǎn)?答:病毒基因組的特點(diǎn):① 順?lè)醋? CAP:是大腸桿菌分解代謝物基因活化蛋白,這種蛋白可將葡萄糖饑餓信號(hào)傳遞個(gè)許多操縱子,使細(xì)菌在缺乏葡萄糖時(shí)可以利用其他碳源。 周期蛋白:是一類(lèi)呈細(xì)胞周期特異性或時(shí)相性表達(dá)、累積與分解的蛋白質(zhì),它與周期素依賴(lài)性激酶共同影響細(xì)胞周期的運(yùn)行。核酸探針是指能識(shí)別特異堿基順序的帶有標(biāo)記的一段DNA或RNA分子。4 4 4 4 4 SSCP:?jiǎn)捂湗?gòu)象多態(tài)性檢測(cè)是一種基于DNA構(gòu)象差別來(lái)檢測(cè)點(diǎn)突變的方法。 三鏈DNA:當(dāng)某一DNA或RNA寡核苷酸與DNA高嘌呤區(qū)可結(jié)合形成三鏈,能特異地結(jié)合在DNA的大溝中,并與富含嘌呤鏈上的堿基形成氫鍵。 核酶:是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組成的酶,可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑??梢宰鳛橐环N調(diào)控特定基因表達(dá)的手段。3 3 RFLP:即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性,個(gè)體之間DNA的核苷酸序列存在差異,稱(chēng)為DNA多態(tài)性。 基因診斷:以DNA或RNA為診斷材料,通過(guò)檢查基因的存在、結(jié)構(gòu)缺陷或表達(dá)異常,對(duì)人體的狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過(guò)程。它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分,對(duì)病毒無(wú)復(fù)制作用,但是當(dāng)受到外界的條件激活時(shí)可產(chǎn)生誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生的作用。3 細(xì)胞癌基因:存在于正常的細(xì)胞基因組中,與病毒癌基因有同源序列,具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。 核酶:是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組成的酶,可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑??梢宰鳛橐环N調(diào)控特定基因表達(dá)的手段。3 3 RFLP:即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性,個(gè)體之間DNA的核苷酸序列存在差異,稱(chēng)為DNA多態(tài)性。 基因診斷:以DNA或RNA為診斷材料,通過(guò)檢查基因的存在、結(jié)構(gòu)缺陷或表達(dá)異常,對(duì)人體的狀態(tài)和疾病作出診斷的方法和過(guò)程。它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分,對(duì)病毒無(wú)復(fù)制作用,但是當(dāng)受到外界的條件激活時(shí)可產(chǎn)生誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生的作用。3 細(xì)胞癌基因:存在于正常的細(xì)胞基因組中,與病毒癌基因有同源序列,具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。包括病毒癌基因和細(xì)胞癌基因。 癌基因:是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)
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