微生物實(shí)驗(yàn)論文-文庫吧資料
2024-11-10 06:40本頁面
【正文】 白色菌也出現(xiàn)水解圈。 關(guān)產(chǎn)淀粉培養(yǎng)物中菌長的程度，打開平板蓋子，滴入少量碘液于平板 中，輕輕旋轉(zhuǎn)平板，使碘液均勻鋪滿整個(gè)平板。用記號筆在平板底部劃成 4 部分，將黃色菌、白色菌、粉色菌和 x菌（在剛果紅培養(yǎng)基上出現(xiàn)透明圈的菌）分別在不同的部分劃線接種，在平板的反面分別在 4 部分寫上菌名，將平板倒置在 30℃溫箱中培養(yǎng) 3 天。 黃色真菌（菌 4）接種在 馬鈴薯 培養(yǎng)基斜面上。 7H2O 、 KH2PO4 、 、 K2HO4 、CMC15g、（ NH4） 2SO4 、 — 、水1000mL。 鏡檢結(jié)果見表 1 和圖 4。 所需儀器或試劑：菌種 1， 2 的平板培養(yǎng)物、革蘭氏染色液（結(jié)晶紫碘液，番紅染液）、顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)、雙層瓶（內(nèi)裝香柏油和二甲苯）、擦鏡紙、蒸餾水等。此外，兩類菌的細(xì)胞壁等對結(jié)晶紫 — 碘復(fù)合物的通透性也不一致，陽性菌透性小，故不易被脫色，陰性菌透性大，易脫色。所以染色時(shí)的條件要嚴(yán)格控制。現(xiàn)在一般認(rèn)為革蘭氏陽性菌體內(nèi)含有特殊的核蛋白質(zhì)鎂鹽與多糖的復(fù)合物，它與碘和結(jié)晶紫的復(fù)合物結(jié)合很牢，不易脫色，陰性菌復(fù)合物結(jié)合程度底，吸附染料差，易脫色，這是染色反應(yīng)的主要依據(jù)。經(jīng)此方法染色后，細(xì)胞保留初染劑藍(lán)紫色的細(xì)菌為革蘭氏陽性菌；如果細(xì)胞中初染劑被脫色劑洗脫而使細(xì)菌染上復(fù)染劑的顏色 (紅色 )，該菌屬于革蘭氏陰性菌。革蘭氏染色法是細(xì)菌學(xué)中最重要的鑒別染色法。劃線完畢后，蓋上 皿蓋，倒置于溫室培養(yǎng)，至長出單菌落。 7H2O （或 MgSO4 ） KH2PO4 NaCl 纖維素 剛果紅 瓊脂 20g 水 1000mL pH （ 2）涂布平板 釋倍數(shù)分別為 10 10 107的樣品溶液涂布到纖維素剛果紅培養(yǎng)基上， 37℃培養(yǎng) 3— 4 d （ 3）菌落形態(tài)觀察 選取一株生長較好的白色菌株 （菌 1）和一株粉紅色菌株 （菌 2） 和一株水解圈非常明顯的菌株 （菌 3） 和一株 黃色 真菌 （菌4） 進(jìn)行劃線分離。 需要滅菌的儀器：無菌培養(yǎng)皿（ 12 個(gè)）、涂布器（ 3 個(gè)）、移液器、槍頭。然后換槍頭從此試管中吸取 1ml加入另一盛有 9ml無菌水的試管中，混合均勻，以此類推制成101,102,103,104, 105,106,107不同稀釋度的土壤溶液。 用量程為 1000181。 梯度稀釋 所需儀器：試管（ 8 支）、移液器、槍頭。在250ml 錐形瓶中裝入 50ml 培養(yǎng)基，放 5— 6顆玻璃珠，用 8 層紗布做成瓶塞，將瓶口塞緊，再在瓶塞外包裹兩層牛皮紙，用線繩扎緊，在 121℃下高壓蒸汽滅菌 20min。 7H2O KH2PO4 MgSO4 富集培養(yǎng)所需要的儀器有： 250ml 錐形瓶、天平、藥匙、玻璃棒、電爐、搖床、玻璃珠、稱量紙等。 分離與篩選 土壤懸液的制備 稱取土樣 5 g，迅速倒人帶玻璃珠的 45 mL 無菌水瓶中，振蕩 20 min，使土樣充分打散，即成為土壤懸液。另外，土樣的采集要選擇富含纖維素的環(huán)境，這是因?yàn)樵诶w維素含量豐富的環(huán)境，通常會聚集較多
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