【正文】 在同一個(gè)培養(yǎng)皿上接種得到的四種菌，根據(jù)產(chǎn)生水解圈大小的情況可推斷其產(chǎn)分解纖維素的酶的情況：水解圈的大小、是否清晰，可判斷各自的產(chǎn)酶能力以及酶系情況，一般水解圈較大表明其產(chǎn)酶能力較強(qiáng)；水解圈越清晰說(shuō)明纖維素降解得越徹底，酶類(lèi)也 就越齊全。因此，粉色菌和 x 菌為陽(yáng)性，黃色菌和白色菌為陰性。 操作步驟： 制片（涂布、干燥、固定）→結(jié)晶紫初染 1— 2min，水洗→碘液媒染 1min，水洗→乙醇脫色 30s，水洗→番紅復(fù)染 1min，水洗→干燥→鏡檢，油鏡觀察 。 (1) 鑒別培養(yǎng)基的制備 培 養(yǎng)基成分如下： 纖維素剛果紅培養(yǎng)基 （ NH4） 2SO4 MgSO4綜合各種因素，本小組分別從生科院南樓后的花園中和學(xué)生公寓 4號(hào)樓下的落葉堆下取土壤樣品。土壤中纖維素分解菌的分離和篩選及關(guān)于其部分特性的研究 摘 要 取適量的土壤樣品進(jìn)行蒸餾水溶解、富集培養(yǎng)、剛果紅纖維素培養(yǎng)基篩選等操作后，分離出能夠分解纖維素的細(xì)菌 和真菌 ，對(duì)這些菌進(jìn)行純培養(yǎng)，觀察其菌落顏色、形態(tài)等特征，并對(duì)所得菌用革蘭氏 染色 法染色。 分離與篩選 土壤懸液的制備 稱(chēng)取土樣 5 g，迅速倒人帶玻璃珠的 45 mL 無(wú)菌水瓶中，振蕩 20 min，使土樣充分打散，即成為土壤懸液。 7H2O （或 MgSO4 ） KH2PO4 NaCl 纖維素 剛果紅 瓊脂 20g 水 1000mL pH （ 2）涂布平板 釋倍數(shù)分別為 10 10 107的樣品溶液涂布到纖維素剛果紅培養(yǎng)基上， 37℃培養(yǎng) 3— 4 d （ 3）菌落形態(tài)觀察 選取一株生長(zhǎng)較好的白色菌株 （菌 1）和一株粉紅色菌株 （菌 2） 和一株水解圈非常明顯的菌株 （菌 3） 和一株 黃色 真菌 （菌4） 進(jìn)行劃線分離。 鏡檢結(jié)果見(jiàn)表 1 和圖 4。 不同 pH 對(duì)菌生長(zhǎng)的影響 方法 （ 1） 培養(yǎng)基成分：無(wú)機(jī)鹽營(yíng)養(yǎng)液 1000mL（ KH2PO4 2g、 MnSO4 、 ZnCl2 、CoCl2 、（ NH4） 2SO4 、 MgSO47H2O 、 CaCl2 、 FeSO4 5mg、水 1000mL，pH ）于直徑為 、長(zhǎng) 15cm 的試管中加入上述無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基 5mL，加入一條去淀粉處理的濾紙（ 6cm 1cm）垂直于試管中，用 酸和堿 調(diào)整它們的 pH 值，使之 pH 分別約為 4， 5， 6， 7， 8， 9， 10，并做好標(biāo)記。生理生化實(shí)驗(yàn)證明，平板上的黃色菌種和 X 菌種的水解圈都很大，表明它們的產(chǎn)酶能力都較強(qiáng)，并且黃色菌種水解圈更為清晰表明其酶系較為齊全。 不同菌株對(duì)纖維素類(lèi)物質(zhì)的分解能力不一樣。 結(jié)果 圖 6 甲基紅實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表 3 甲基紅實(shí)驗(yàn)結(jié)果 （ “ +”表示陽(yáng)性 ，“ — ”表示陰性 ） 名稱(chēng) 結(jié)果 黃色菌（菌 4） — 白色菌（菌 1） — 粉色菌（菌 2） + 水解圈菌（菌 3） + 結(jié)果分析： 見(jiàn)圖 6，表 3 滴入甲基紅試劑后，培養(yǎng)黃色菌和白色菌的培養(yǎng)液變?yōu)辄S色，而培養(yǎng)粉色菌