微生物實(shí)驗(yàn)論文(文件)
【正文】 物、革蘭氏染色液（結(jié)晶紫碘液，番紅染液）、顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)、雙層瓶（內(nèi)裝香柏油和二甲苯）、擦鏡紙、蒸餾水等。 7H2O 、 KH2PO4 、 、 K2HO4 、CMC15g、（ NH4） 2SO4 、 — 、水1000mL。用記號(hào)筆在平板底部劃成 4 部分，將黃色菌、白色菌、粉色菌和 x菌（在剛果紅培養(yǎng)基上出現(xiàn)透明圈的菌）分別在不同的部分劃線接種，在平板的反面分別在 4 部分寫(xiě)上菌名，將平板倒置在 30℃溫箱中培養(yǎng) 3 天。 結(jié)果 見(jiàn)圖 5，表 2 圖 5 淀粉水解實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表 2 淀粉水解實(shí)驗(yàn)結(jié)果（ “ +”表示陽(yáng)性，“ — ”表示陰性 ） 項(xiàng)目 水解結(jié)果 黃色菌 （菌 4） + 白色菌 （菌 1） + 粉色菌 （菌 2） — 水解圈菌（菌 3） + 結(jié)果分析：其中，加入碘液后不久，黃色菌和 x 菌就出現(xiàn)明顯的水解圈，不久，白色菌也出現(xiàn)水解圈。 結(jié)果 圖 6 甲基紅實(shí)驗(yàn)結(jié)果 表 3 甲基紅實(shí)驗(yàn)結(jié)果 （ “ +”表示陽(yáng)性 ，“ — ”表示陰性 ） 名稱 結(jié)果 黃色菌（菌 4） — 白色菌（菌 1） — 粉色菌（菌 2） + 水解圈菌（菌 3） + 結(jié)果分析： 見(jiàn)圖 6，表 3 滴入甲基紅試劑后，培養(yǎng)黃色菌和白色菌的培養(yǎng)液變?yōu)辄S色，而培養(yǎng)粉色菌和 x菌的培養(yǎng)液成為紅色，這說(shuō)明了四種細(xì)菌在培養(yǎng)的早期均產(chǎn)生有機(jī)酸，但粉色菌和 x 菌在培養(yǎng)后期仍能維持酸性 pH4，而黃色菌和白色菌則轉(zhuǎn)化有機(jī)酸為非酸性末端產(chǎn)物，如乙醇、丙酮酸等，使pH 升至大約 6。 （ 2） 滅菌后，在無(wú)菌條件下，將黃色菌接種于其中，再放入 30℃恒溫箱中培養(yǎng) 3 天。 見(jiàn)圖 7。之后接種到土豆培養(yǎng)基上進(jìn)行純培養(yǎng)。 不同菌株對(duì)纖維素類物質(zhì)的分解能力不一樣。 討論 通過(guò)本實(shí)驗(yàn)我們分離到了能分解纖維素的細(xì)菌，得到了他們的純培養(yǎng)。 參考文獻(xiàn) 、姚曉華、韋秉興、覃培升、屈達(dá)才， 2020，稻草秸稈纖維素分解菌的分離篩選，基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)， 28（ 3）：477— 480 ，秦魏， 2020，降解纖維素真菌的分離篩選及其環(huán)境適應(yīng)性初探，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)公報(bào)， 24（ 5） . 纖維素酶降解機(jī)制及纖維素酶分子結(jié)構(gòu)與功能研究進(jìn)展 . 自然科學(xué)進(jìn)展， 2020， 13(1):21 . 纖維素分解菌的分離與特性初探 . 黑 龍 江 八 一 農(nóng) 墾 大 學(xué) 學(xué) 報(bào) , 2020,01:019 。我們下一步想做的是提取 16sRNA，根據(jù) 16sRNA 的序列特征確定兩種菌的歸屬直至確定種 。生理生化實(shí)驗(yàn)證明，平板上的黃色菌種和 X 菌種的水解圈都很大，表明它們的產(chǎn)酶能力都較強(qiáng)，并且黃色菌種水解圈更為清晰表明其酶系較為齊全。 剛果紅纖維素培養(yǎng)基作為篩選菌種的培養(yǎng)基，可以很快識(shí)別出菌種講解纖維素能力的高低，大大方便了篩選得到較純菌種的工作。于是，我們重新做了稀釋，最終選擇稀釋了 105， 106， 107 倍等稀釋倍數(shù)較大的富集液用涂布器涂布在纖維素剛果紅平板培養(yǎng)基上，培養(yǎng)了三天后觀察到較明顯的四種菌落，粉紅色菌落，黃色菌落，白色菌落和產(chǎn)生有水解圈的 X菌?？傮w，黃色菌在不同 pH條件下纖維素分解酶活性大小為pH6pH5pH7pH8pH4。 不同 pH 對(duì)菌生長(zhǎng)的影響 方法 （ 1） 培養(yǎng)基成分：無(wú)機(jī)鹽營(yíng)養(yǎng)液 1000mL（ KH2PO4 2g、 MnSO4 、 ZnCl2 、Co
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