原核表達(dá)調(diào)控ppt課件-文庫吧資料
2025-05-12 18:02本頁面
【正文】 酸都不足時(shí)，核糖體翻譯移動(dòng)的速度就更慢，甚至不能占據(jù) A的序列，結(jié)果有利于 1+2和 3+4發(fā)夾結(jié)構(gòu)的形成，于是 RNA pol停止轉(zhuǎn)錄。 Trp的存在對(duì)終止轉(zhuǎn)錄是有效的，弱化子僅允許約 10%的 RNA聚合酶通過。 Trp濃度低時(shí)，生成 TrptRNAtrp量少，使核糖體停止在 mRNA上的 Trp密碼子 UGG處；使 A（ 1與 2）不能形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)；而 2+3形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，阻止了 3+4生成終止子； RNA pol可沿DNA繼續(xù)轉(zhuǎn)錄， trp操縱子就處于開放狀態(tài)。 但當(dāng) Trp缺乏時(shí)，聚合酶不終止，而是通讀 trp基因。 弱化子的負(fù)調(diào)控 原核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯幾乎同時(shí)進(jìn)行，在 Trp未達(dá)到能起阻遏作用的濃度時(shí)，從 Ptrp起始轉(zhuǎn)錄， RNA聚合酶沿 DNA轉(zhuǎn)錄合成 mRNA，同時(shí)核糖體結(jié)合在mRNA上開始翻譯。在 結(jié)構(gòu)基因 與 O 之間有一衰減子區(qū)域 ，該區(qū)域含有 4段特殊的序列，高濃度色氨酸時(shí)能形成不依賴 ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)， RNA聚合酶脫落，轉(zhuǎn)錄終止。 mRNA前導(dǎo)區(qū)的序列分析 ? trp前導(dǎo)區(qū)的堿基序列已經(jīng)全部測(cè)定，引人注目的是其中 4個(gè)分別以 3和 4表示的片段能以兩種不同的方式進(jìn)行堿基配對(duì)，有時(shí)以 12和 34配對(duì)，有時(shí)只以 23方式互補(bǔ)配對(duì)。 A C 當(dāng) A（ 1+2）形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)時(shí)， B就不能形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，卻有利于 C（ 3+4）生成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。 先導(dǎo)序列含有 3對(duì)反向重復(fù)序列 (A=1+2；B=2+3； C=3+4)。 先導(dǎo)序列包括起始密碼子 AUG和終止密碼子 UGA，它編碼了一個(gè) 14個(gè) AA的先導(dǎo)肽。 ? 在前導(dǎo)序列的第 10和第 11位上有 相鄰的兩個(gè)色氨酸密碼子 。弱化子為結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄設(shè)了一道關(guān)卡。 弱化子的共同特點(diǎn)是 某些外部因素控制著弱化子的發(fā)夾形成 。 mRNA合成起始以后 ， 除非培養(yǎng)基中完全沒有色氨酸 ， 轉(zhuǎn)錄總是在這個(gè)區(qū)域終止 ， 產(chǎn)生一個(gè)僅有 140個(gè)核苷酸的 RNA分子 ， 終止 trp基因轉(zhuǎn)錄 。在 L內(nèi)有一段 123~150bp的序列，它在轉(zhuǎn)錄起始后可調(diào)控轉(zhuǎn)錄過程的進(jìn)行。弱化作用產(chǎn)生的關(guān)鍵在于 trp mRNA的前導(dǎo)區(qū)?？墒?，在 trpR缺失突變體中，培養(yǎng)基中缺乏色氨酸比有色氨酸存在時(shí)操縱子的表達(dá)水平更高，說明色氨酸操縱子除受阻遏物調(diào)控外，還受另一機(jī)制的調(diào)控。 色氨酸操縱子的衰減調(diào)控 研究表明色氨酸操縱子存在兩種機(jī)制的調(diào)控。 這是一種負(fù)性調(diào)控，操縱子通常是開放轉(zhuǎn)錄的。細(xì)菌直接利用外界的 Trp。 在位于 65分鐘處還有一個(gè) trpS（ 色氨酸t(yī)RNA合成酶 ） ， 它與攜帶有色氨酸的 tRNATrp共同參與 trp操縱子的調(diào)控作用 。 ? trp操縱子中產(chǎn)生阻遏物的基因是 trpR， 該基因距 trp基因簇很遠(yuǎn) 。 調(diào)控基因 trpR的位置遠(yuǎn)離 PO結(jié)構(gòu)基因群， 在其自身的啟動(dòng)子作用下，以組成型方式低水平表達(dá)調(diào)控蛋白 R’； R’并無活性 。 輔阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控 與 lac操縱子的調(diào)控不同的是， 控制 Trp操縱子的阻遏蛋白的效應(yīng)物（ Trp ）不是一個(gè)誘導(dǎo)物（ inducer） , 而是一個(gè) 輔阻遏物（ corepressor）。 色氨酸操縱子通常處于開放狀態(tài)，其輔阻遏蛋白不能與操縱基因結(jié)合而阻遏轉(zhuǎn)錄。 tr
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