《原核表達調(diào)控》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 合酶通過。 但當 Trp缺乏時，聚合酶不終止，而是通讀 trp基因。在 結(jié)構(gòu)基因 與 O 之間有一衰減子區(qū)域 ，該區(qū)域含有 4段特殊的序列，高濃度色氨酸時能形成不依賴 ρ因子的轉(zhuǎn)錄終止信號， RNA聚合酶脫落，轉(zhuǎn)錄終止。 A C 當 A（ 1+2）形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)時， B就不能形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，卻有利于 C（ 3+4）生成發(fā)夾結(jié)構(gòu)。 先導序列包括起始密碼子 AUG和終止密碼子 UGA，它編碼了一個 14個 AA的先導肽。弱化子為結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄設(shè)了一道關(guān)卡。 mRNA合成起始以后 ， 除非培養(yǎng)基中完全沒有色氨酸 ， 轉(zhuǎn)錄總是在這個區(qū)域終止 ， 產(chǎn)生一個僅有 140個核苷酸的 RNA分子 ， 終止 trp基因轉(zhuǎn)錄 。弱化作用產(chǎn)生的關(guān)鍵在于 trp mRNA的前導區(qū)。 色氨酸操縱子的衰減調(diào)控 研究表明色氨酸操縱子存在兩種機制的調(diào)控。細菌直接利用外界的 Trp。 ? trp操縱子中產(chǎn)生阻遏物的基因是 trpR， 該基因距 trp基因簇很遠 。 輔阻遏蛋白的負調(diào)控 與 lac操縱子的調(diào)控不同的是， 控制 Trp操縱子的阻遏蛋白的效應(yīng)物（ Trp ）不是一個誘導物（ inducer） , 而是一個 輔阻遏物（ corepressor）。 trp操縱子 基因產(chǎn)物是 5個酶，分別是鄰氨基苯甲酸合成酶 (E)、鄰氨基苯甲酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶 (D)、磷酸核糖鄰氨基苯甲酸異構(gòu)酶 吲哚甘油磷酸合成酶 (C)、 色氨酸合成酶 β (B)和色氨酸合成酶 α (A) 。 分枝酸先在鄰氨基苯甲酸合成酶作用下生成鄰氨基苯甲酸，此后先與磷酸核糖焦磷酸中的磷酸核糖形成磷酸核糖鄰氨基苯甲酸，經(jīng)重排、脫羧和關(guān)環(huán)形成吲哚甘油磷酸，然后在色氨酸合成酶催化下先脫去 3磷酸甘油醛生成吲哚，最后吲哚與一個絲氨酸縮合形成色氨酸。二、 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控 1. 轉(zhuǎn)錄調(diào)控的原理 2. 原核生物轉(zhuǎn)錄調(diào)控的操縱子學說 3. 乳糖操縱子與負控誘導系統(tǒng) 4. 色氨酸操縱子與負控阻遏系統(tǒng) 5. 其他操縱子 6. 轉(zhuǎn)錄水平上的其他調(diào)控方式 4. 色氨酸操縱子 (trp operon) ? trp體系參與生物合成，它不受葡萄糖或 cAMPCRP的調(diào)控。 – 在許多細菌中， trpE和 trpG， trpC和 trpB分別融合成一個基因，產(chǎn)生具有雙重功能的蛋白質(zhì)。 這些基因只有在缺乏 Trp時，才被有效表達。而當色氨酸合成過多時，色氨酸作為輔阻遏物與輔阻遏蛋白結(jié)合而形成阻遏蛋白，后者與操縱基因結(jié)合而使基因轉(zhuǎn)錄關(guān)閉。 當提供足夠的 Trp時， Trp與 R’結(jié)合使其構(gòu)象改變而成為活性形式 R， R可與操縱基因 O特異性結(jié)合，阻遏結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄，R的阻遏能力僅為 lac I產(chǎn)物的 1/1000。 trpS (色氨酰 tRNA合成酶 ) trpa 當有足夠的 Trp時，操縱子自動關(guān)閉。 當有效應(yīng)物 (Trp)作用時，誘導使阻遏蛋白 R’構(gòu)象發(fā)生變化，能夠結(jié)合于操縱基因，則阻遏轉(zhuǎn)錄 。 弱化子與前導肽 當阻遏物對 trp操縱子的阻遏作用被解除，但細胞內(nèi)仍有一定濃度的色氨酸時，第二種調(diào)控機制使 trp操縱子的轉(zhuǎn)錄在抵達 trpE之前被提前終止，這種現(xiàn)象稱為弱化作用（ attenuation）， DNA中導致 mRNA合成提前終止的一段序列稱為弱化子（ attenuator）。
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