【正文】 。 mRNA前導(dǎo)區(qū)的序列分析 ? trp前導(dǎo)區(qū)的堿基序列已經(jīng)全部測(cè)定，引人注目的是其中 4個(gè)分別以 3和 4表示的片段能以兩種不同的方式進(jìn)行堿基配對(duì)，有時(shí)以 12和 34配對(duì)，有時(shí)只以 23方式互補(bǔ)配對(duì)。在 L內(nèi)有一段 123~150bp的序列，它在轉(zhuǎn)錄起始后可調(diào)控轉(zhuǎn)錄過(guò)程的進(jìn)行。 調(diào)控基因 trpR的位置遠(yuǎn)離 PO結(jié)構(gòu)基因群， 在其自身的啟動(dòng)子作用下，以組成型方式低水平表達(dá)調(diào)控蛋白 R’； R’并無(wú)活性 。 色氨酸合成主要分 5步完成，有 7個(gè)基因參與整個(gè)合成過(guò)程。 后者位于大腸桿菌染色體圖上 25分鐘處 ， 而前者則位于 90分鐘處 。 這個(gè)區(qū)域被稱為 弱化子 ， 該區(qū) mRNA可通過(guò)自我配對(duì)形成莖 環(huán)結(jié)構(gòu) 。低濃度色氨酸時(shí)則不能形成轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)，轉(zhuǎn)錄繼續(xù)。 阻遏與弱化作用的協(xié)調(diào) ? 細(xì)菌中為什么需要弱化子系統(tǒng)呢？ 一種可能是阻遏物從有活性向無(wú)活性的轉(zhuǎn)變速度較慢，需要一個(gè)能更快地做出反應(yīng)的系統(tǒng)，以保持培養(yǎng)基中適當(dāng)?shù)纳彼崴?。在大腸桿菌中阿拉伯糖的降解需要 3個(gè)基因： araB、araA和 araD，分別編碼 3個(gè)酶： araB基因編碼核酮糖激酶 (ribulokinase)， araA編碼 L阿拉伯糖異構(gòu)酶(Larabinose isomerase)， araD編碼 L核酮糖 5磷酸 4差向異構(gòu)酶 (Lribulose5phosphate4epimerase)。 DNA嚴(yán)重受損時(shí)， RecA與缺口處單鏈 DNA結(jié)合，被激活成蛋白酶，將 LexA切割成沒(méi)有阻遏活性的兩個(gè)片段，導(dǎo)致 SOS體系高效表達(dá)， DNA得到修復(fù)。 ? 沒(méi)有葡萄糖，也沒(méi)有阿拉伯糖，因?yàn)闆](méi)有誘導(dǎo)物，盡管有cAMPCAP與操縱區(qū)位點(diǎn)相結(jié)合， AraC蛋白仍以 Pr形式為主，無(wú)法與操縱區(qū) B位點(diǎn)相結(jié)合，無(wú) araBAD mRNA轉(zhuǎn)錄。 半乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)及特點(diǎn) 激酶 K UDP轉(zhuǎn)移酶 T 差向異構(gòu)酶 E 半乳糖 半乳糖 +葡萄糖 半乳糖 1磷酸 乳糖 UDP葡萄糖 UDP半乳糖 葡萄糖 UDP轉(zhuǎn)移酶 T 細(xì)胞壁 現(xiàn)在設(shè)想只有 galP1一個(gè)啟動(dòng)子，那么由于這個(gè)啟動(dòng)子的活性依賴于 cAMPCRP，當(dāng)培養(yǎng)基中有葡萄糖存在時(shí)就不能合成異構(gòu)酶。 b. 低色氨酸條件下，核糖體停在色氨酸密碼子附近，序列 1被核糖體覆蓋，序列 2和 3配對(duì)，因此阻止了 4之間形成轉(zhuǎn)錄終止發(fā)夾。 B C后是 poly(U)，即 C實(shí)際是一個(gè)終止子，如果轉(zhuǎn)錄 mRNA時(shí)它形成發(fā)夾結(jié)構(gòu)，就能使 RNA聚合酶停止轉(zhuǎn)錄而從 mRNA上脫離下來(lái)。 ? 在 Trp操縱子 PtrpO與 trpE間有一段 162bp的先導(dǎo)序列(leading sequence, L)。 也就是說(shuō)， Trp操縱子的調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物（阻遏物蛋白）無(wú)活性，不能與操縱基因結(jié)合；當(dāng) Trp存在時(shí)，它與阻遏物蛋白結(jié)合，誘導(dǎo)該蛋白構(gòu)象變化，能夠結(jié)合在操縱基因上并阻止轉(zhuǎn)錄。 ? 操縱子中各基因功能： – trpE和 trpG編碼鄰氨基苯甲酸合酶， – trpD編碼鄰氨基苯甲酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶， – trpF編碼異構(gòu)酶， – trpC編碼吲哚甘油磷酸合酶， – trpA和 trpB則分別編碼色氨酸合酶的 α和 β亞基。 在位于 65分鐘處還有一個(gè) trpS（ 色氨酸t(yī)RNA合