原核表達(dá)調(diào)控ppt課件(存儲(chǔ)版)
【正文】 T、 gal k）表達(dá)產(chǎn)生的異構(gòu)酶 (UDPgalactose4epimerase)、半乳糖 磷酸尿嘧啶核苷轉(zhuǎn)移酶(galactose transferase)和半乳糖激酶 (galactose kinase)參與 Gal代謝，形成 UDPGal，用于合成細(xì)胞壁。 araBAD和 araC基因的轉(zhuǎn)錄是分別在兩條鏈上以相反的方向進(jìn)行的。因?yàn)榕囵B(yǎng)基中含有葡萄糖，所以 cAMPCAP沒有與操縱區(qū)位點(diǎn)相結(jié)合， AraC蛋白處于 Pr形式并與 A位點(diǎn)結(jié)合，RNA聚合酶很少再與 Pc結(jié)合， araC基因雖然仍有轉(zhuǎn)錄，但受到抑制，只有少量 AraC蛋白形成，整個(gè)系統(tǒng)幾乎處于靜止?fàn)顟B(tài)。許多因素相互作用，才使基因表達(dá)更有效，更協(xié)調(diào)。 二組分調(diào)控系統(tǒng)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) ? 在較多的情況下，外部信號(hào)并不直接傳遞給調(diào)節(jié)蛋白，而是首先通過傳感器接收信號(hào)，然后以不同方式傳到調(diào)節(jié)部位，這個(gè)過程就是信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) (signal transduction)。這樣，阿拉伯糖的誘導(dǎo)作用就可以解釋為阿拉伯糖與 Pr的結(jié)合，使 Pr離開它的結(jié)合位點(diǎn)，然后，產(chǎn)生大量的 Pi，并與啟動(dòng)子結(jié)合。另外還有兩個(gè)遠(yuǎn)離此基因簇的基因araE和 araF，負(fù)責(zé)將阿拉伯糖運(yùn)入細(xì)胞。阻遏作用的信號(hào)是細(xì)胞內(nèi)色氨酸的多少，弱化作用的信號(hào)則是細(xì)胞內(nèi)載有色氨酸的 tRNA的多少，通過前導(dǎo)肽的翻譯來控制轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行。或者，弱化子系統(tǒng)主要是對(duì)外源色氨酸濃度做出反應(yīng)。 當(dāng)所有的氨基酸都不足時(shí)，核糖體翻譯移動(dòng)的速度就更慢，甚至不能占據(jù) A的序列，結(jié)果有利于 1+2和 3+4發(fā)夾結(jié)構(gòu)的形成，于是 RNA pol停止轉(zhuǎn)錄。 弱化子的負(fù)調(diào)控 原核生物轉(zhuǎn)錄和翻譯幾乎同時(shí)進(jìn)行，在 Trp未達(dá)到能起阻遏作用的濃度時(shí)，從 Ptrp起始轉(zhuǎn)錄， RNA聚合酶沿 DNA轉(zhuǎn)錄合成 mRNA，同時(shí)核糖體結(jié)合在mRNA上開始翻譯。 先導(dǎo)序列含有 3對(duì)反向重復(fù)序列 (A=1+2；B=2+3； C=3+4)。 弱化子的共同特點(diǎn)是 某些外部因素控制著弱化子的發(fā)夾形成 ?？墒牵?trpR缺失突變體中，培養(yǎng)基中缺乏色氨酸比有色氨酸存在時(shí)操縱子的表達(dá)水平更高，說明色氨酸操縱子除受阻遏物調(diào)控外，還受另一機(jī)制的調(diào)控。 在位于 65分鐘處還有一個(gè) trpS（ 色氨酸t(yī)RNA合成酶 ） ， 它與攜帶有色氨酸的 tRNATrp共同參與 trp操縱子的調(diào)控作用 。 色氨酸操縱子通常處于開放狀態(tài)，其輔阻遏蛋白不能與操縱基因結(jié)合而阻遏轉(zhuǎn)錄。 ? 操縱子中各基因功能： – trpE和 trpG編碼鄰氨基苯甲酸合酶， – trpD編碼鄰氨基苯甲酸磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶， – trpF編碼異構(gòu)酶， – trpC編碼吲哚甘油磷酸合酶， – trpA和 trpB則分別編碼色氨酸合酶的 α和 β亞基。 Trp操縱子的結(jié)構(gòu) 5個(gè)色氨酸合成代謝相關(guān)酶的基因構(gòu)成一個(gè)操縱子。 也就是說， Trp操縱子的調(diào)節(jié)基因的產(chǎn)物（阻遏物蛋白）無活性，不能與操縱基因結(jié)合；當(dāng) Trp存在時(shí)，它與阻遏物蛋白結(jié)合，誘導(dǎo)該蛋白構(gòu)象變化，能夠結(jié)合在操縱基因上并阻止轉(zhuǎn)錄。 缺乏 Trp時(shí)， Trp操縱子被打開， 5個(gè)結(jié)構(gòu)基因表達(dá)，產(chǎn)生 3個(gè)酶催化分支酸合成為 Trp。 ? 在 Trp操縱子 PtrpO與 trpE間有一段 162bp的先導(dǎo)序列(leading sequence, L)。 前導(dǎo)肽
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