核酸的分離純化ppt課件-文庫吧資料
2025-05-07 01:09本頁面
【正文】 速提取法廣泛使用 。 TE的 pH為 ， DNA的脫氨反應(yīng)減少 ， pH低 DNA易變性 。 三、核酸的鑒定與保存 瓊脂糖凝膠電泳： ? 以 EB為示蹤劑的核酸凝膠電泳可判定核酸制品的完整性 ? 基因組 DNA如果發(fā)生降解 ， 電泳圖呈拖尾狀 三、核酸的鑒定與保存 DNA的降解 三、核酸的鑒定與保存 完整的或降解很少的總 RNA電泳圖譜中 ， 三條 帶熒光強(qiáng)度應(yīng)呈特定的比值 。 比值升高或降低均提示制備的核酸純度不佳 。熒光強(qiáng)度的積分與溶液中核酸的含量呈正比 。 二、技術(shù)路線的設(shè)計 應(yīng)該清除的雜質(zhì)主要包括 : 蛋白質(zhì)、多糖及脂類物質(zhì)等 分離某一核酸分子時 ， 其它核酸皆為雜質(zhì) （二）核酸的分離與純化 二、技術(shù)路線的設(shè)計 （三）核酸的濃縮、沉淀與洗滌 ? 沉淀 是濃縮核酸最常用的方法 ? 常用的 鹽類 :醋酸鈉、醋酸鉀、醋酸銨、氯化鈉、氯化鉀及氯化鎂 ? 常用的 有機(jī)溶劑 :乙醇、異丙醇和聚乙二醇 ? 核酸沉淀常常含有少量共沉淀的鹽，需用70%～ 75%的乙醇洗滌去除 二、技術(shù)路線的設(shè)計 三、核酸的鑒定與保存 （一）核酸的鑒定 （二）核酸的保存 （一）核酸的鑒定 三、核酸的鑒定與保存 紫外分光光度法： 核酸分子中的堿基具有共軛雙鍵結(jié)構(gòu) ，可以吸收紫外線 ， 其最大吸收波長為 260nm。第五章 核酸的分離純化 溫州醫(yī)學(xué)院 彭 穎 ? DNA和 RNA是生物體中最重要的核酸分子 ， 是分子生物學(xué)和分子診斷的研究對象 ? DNA和 RNA的分離純化是分子生物學(xué)研究及分子診斷最基礎(chǔ)的工作 第五章 核酸的分離純化 核酸分離純化的原則 : ? 保持核酸一級結(jié)構(gòu)的完整性 ? 盡可能提高核酸制品的純度 第五章 核酸的分離純化 第一節(jié) 核酸分離純化的設(shè)計及原則 第二節(jié) 基因組 DNA的分離純化 第三節(jié) 質(zhì)粒 DNA的提取與純化 第四節(jié) RNA的分離純化 第五章 核酸的分離純化 第一節(jié) 核酸分離純化的設(shè)計及原則 一、材料與方法的選擇 二、技術(shù)路線的設(shè)計 三、核酸的鑒定與保存 第一節(jié) 核酸分離純化的設(shè)計及原則 一、材料與方法的選擇 （一） 材料與方法的選擇 （二） 選擇原則 （一） 材料與方法的選擇 不同的研究目的對核酸的完整性、純度、 產(chǎn)量及濃度有不同的要求。 ? 需考慮制備核酸所需的時間與成本 ? 應(yīng)選擇安全的試劑與制備方案 一、材料與方法的選擇 ， 保證核酸純度 盡量簡化分離純化步驟 ， 縮短提取時間 盡量避免各種有害因素對核酸的破壞
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