微生物限度檢查法純化水驗證方案-文庫吧資料
2024-11-03 19:11本頁面
【正文】 液，做活菌計數(shù)備用。 枯草芽孢桿菌 CMCC(B) 6350金黃色葡萄球菌 CMCC(B) 2600大腸埃希菌 CMCC（ B） 4410白色念珠菌 CMCC (F) 9800 黑曲霉 CMCC(F)98003。若試驗組的 菌回收率均不低于 70%，照該供試液制備方法和計數(shù)法測定供試品的細菌、霉菌及酵母菌；若任一次試驗中實驗組的菌回收率低于 70%，應(yīng)采用其他方法消除供試品的抑菌活 性，并重新進行方法驗證。 二 目的 建立該純化水的微生物限度檢查方法 ，并對其有效性進行評價，確保試驗方法的完整性，保證檢驗結(jié)果的可靠性。 題目 微生物限度檢查法純化水驗證方案 編號 起草人 審核人 批準(zhǔn)人 日期 日期 日期 頒發(fā)部門 質(zhì)量管理部 生效日期 制作備份 分發(fā)部門 質(zhì)量保證 室、 質(zhì)量控制 室 版本： 1 一 概述 本驗證是對細菌，霉菌酵母菌計數(shù)項下檢查法 2 薄膜過濾法進行細菌，霉菌及酵母菌的計數(shù)方法驗證。細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法的驗證至少應(yīng)進行 3 次獨立的平行試驗，并分別計算各試驗菌每次試驗的回收率。 三 范圍 ：純化水 四 參加人員 五 內(nèi)容 驗證需用儀器設(shè)備： 電熱恒溫培養(yǎng)箱、多用生化培養(yǎng)箱、蒸汽滅菌器 純化水微生物限度檢查質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn) 項目 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定 細菌 總數(shù)≤ 100 個 /ml 霉菌、酵母菌 細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法驗證結(jié)果判斷 在 3 次獨立的平行試驗中，稀釋劑對照組的 菌回收率應(yīng) 不低于 70%。 六 測試方法 供試品：制水間送水口 1 純化水 《中國藥典》 2020 年版二部微生物限度檢查 —— 薄膜過濾法 培養(yǎng)基及菌種 經(jīng)適用性檢查符合規(guī)定的培養(yǎng)基。 菌液制備 取新鮮的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌的 培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中， 經(jīng) ℃177。 取新鮮的白色念珠菌的培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基或改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基中， 經(jīng) ℃177。 取新鮮的黑曲霉培養(yǎng)物接種至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基，經(jīng) ℃177。然后吸出孢子懸液（用管口帶有薄的無菌棉花或紗布能過濾菌絲的無菌毛細吸管）至無菌試管內(nèi)，用含 %（ ml/ml）聚山梨酯80 的 ％無菌氯化鈉溶液制成每 1ml 含菌數(shù)為 50～ 100cfu 的菌懸液，做活菌計數(shù)備用。 菌液組： 分別取上述 5 種試驗菌懸液各 1ml，分別注入平皿中，立即傾注培養(yǎng)基，每株試驗菌平行制備 2 個平皿，按平皿菌落計數(shù)法測定其菌數(shù)。每株試驗菌平行制備 2個平皿，按平皿菌落計數(shù)法測定其細菌數(shù) 稀釋劑對照組： 用相應(yīng)的稀釋液即 無菌氯化鈉 蛋白胨緩 沖液代替供使品，加入各試驗菌 1ml，按實驗組供試液制備方法和菌落計數(shù)方法測定其菌數(shù) 。 備注：以上各菌懸液中大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌用 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 作為細菌計數(shù)； 白色念珠菌和 黑曲霉 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng) 作為霉菌酵母菌計數(shù)。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數(shù)。若同稀釋級別兩個平板的菌落平均數(shù)不小于 15，則兩個平板的菌落數(shù)不能相差 1 倍或以上。在特 殊情況下，若營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上長有霉菌和酵母菌，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基上長有細菌，則應(yīng)分別點計霉菌和酵母菌，細菌菌落數(shù)。 菌數(shù)報告規(guī)則 若濾膜上無菌落生長，以 1 報告菌數(shù)，或 1 乘以稀釋倍數(shù)的值報告菌落數(shù)。 七 異常情況處理 嚴(yán)格按照《微生物限度檢查法 SOP》操作，如在檢測中有不符合要求的情況出現(xiàn)，分析問題原因后，決定是否需對本方案中設(shè)定的微生物限度檢查方法進行修改，并重新進行驗證。 九 結(jié)論 ： 十 再驗證周期 國家相關(guān)微 生物限度檢查標(biāo)準(zhǔn)修改后需要對本方法重新進行再驗證。細菌、霉菌及酵母菌計數(shù)方法的驗證至少應(yīng)進行 3 次獨立的平行試驗，并分別計算各試驗菌每次試驗的回收率。 三 范圍 ：純化水 四 參加人員 驗證委員會負責(zé)驗證項目的確定； 質(zhì)控部負責(zé)該驗證方案的起草及組織實施；驗證小組負責(zé)驗證方案的審批； 質(zhì)控部參與驗證的實施及監(jiān)督 崗位職務(wù) 簽 名 組 長 質(zhì)量控制 室主任 成 員 質(zhì)量 保證室 成員 質(zhì)量控制 室 成員 質(zhì)量控制室 五 內(nèi)容 驗證需用儀器設(shè)備： 電熱恒溫培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、 純化水微生物
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