人教版教學(xué)課件12基因工程的基本操作程序修改版-文庫(kù)吧資料
2025-01-24 00:43本頁(yè)面
【正文】 個(gè)體生物學(xué)水平） 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 ① 方法 : 分 子 雜 交 方法 : 抗原抗體雜交 ② 過(guò)程 : 用上述探針和轉(zhuǎn)基因生物的 mRNA雜交 ,若出現(xiàn)雜交帶 ,表明目的基因轉(zhuǎn)錄出了 mRNA 歸納步驟 (四 )目的基因的檢測(cè)與鑒定 —— 檢查是否成功 檢測(cè) — 鑒定 —— ① 檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的 DNA 上是否插入了目的基因 ② 檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 mRNA ③ 檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等 方法 —— 方法 —— 方法 —— DNA分子雜交 分子雜交（注意與上不同之處） 抗原抗體雜交 歸納 : 基因工程的基本操作程序 1. 獲取目的基因 ?從基因文庫(kù) ?利用 PCR ?化學(xué)方法人工合成 2. 構(gòu)建基因表達(dá)載體 ?目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因 3. 將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 ?農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射法 4. 目的基因的檢測(cè)與鑒定 ?檢測(cè)：是否插入、轉(zhuǎn)錄、翻譯 ?鑒定： 練習(xí) 1： (2022理綜山東卷 )為擴(kuò)大可耕地面積，增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開(kāi)發(fā)利用備受關(guān)注。 注意 三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 （一）轉(zhuǎn)化： （二）方法 將目的基因?qū)? 植物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 動(dòng)物細(xì)胞 將目的基因?qū)? 微生物細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法 花粉管通道法 —— 顯微注射法 —— 感受態(tài)細(xì)胞 目的基因進(jìn)入 _________內(nèi)，并且在 受體細(xì)胞內(nèi)維持 _____和 _____的過(guò)程 受體細(xì)胞 穩(wěn)定 表達(dá) 將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法： （ 1） 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 ① 農(nóng)桿菌特點(diǎn)： 易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有感染能力 ② 原理： Ti質(zhì)粒上的 TDNA可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞染色體的 DNA上。 它們各自的作用是什么 ? 基因表達(dá)載體的組成： 復(fù)制原點(diǎn) +目的基因 +啟動(dòng)子 +終止子 +標(biāo)記基因 它們各自的作用是什么 ? 啟動(dòng)子： 位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能 驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得蛋白質(zhì) 終止子： 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷， 能終止 mRNA的轉(zhuǎn)錄 標(biāo)記基因 的作用是 為了 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái) ① 載體 與 表達(dá)載體 的區(qū)別：二者都有標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)兩部分 DNA片段。 氫鍵 單鏈 DNA 雙鏈 DNA鏈 PCR技術(shù)擴(kuò)增與 DNA復(fù)制的比較 PCR技術(shù) DNA復(fù)制 相同點(diǎn) 原理 原料 條件 不同點(diǎn) 解旋方式 場(chǎng)所 酶
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