人教版教學(xué)課件12基因工程的基本操作程序修改版-文庫(kù)吧
2025-01-03 00:43 本頁(yè)面
【正文】 _______________、 ___________ 、 ② 原理： __________ ④ 方式：以 _____方式擴(kuò)增，即 ____（ n為擴(kuò)增循 環(huán)的次數(shù)） ⑤ 結(jié)果： 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 DNA復(fù)制 四種脫氧核苷酸 一對(duì)引物 DNA聚合酶 指數(shù) 2n 使目的基因的片段在短時(shí)間內(nèi)成百萬(wàn)倍地?cái)U(kuò)增 要有一段已知目的基因的核苷酸序列（前提條件） ⑥ 過(guò)程： a、 DNA變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板 在熱作用下， _____斷裂，形成 ___________ b、退火 （ 復(fù)性 55℃ 65℃ ）：系統(tǒng)溫度降低，引 物與 DNA模板結(jié)合，形成局部 ________。 c、延伸 （ 70℃ 75℃ ）：在 Taq酶的作用下， 合成與模板互補(bǔ)的 ________。 氫鍵 單鏈 DNA 雙鏈 DNA鏈 PCR技術(shù)擴(kuò)增與 DNA復(fù)制的比較 PCR技術(shù) DNA復(fù)制 相同點(diǎn) 原理 原料 條件 不同點(diǎn) 解旋方式 場(chǎng)所 酶 結(jié)果 堿基互補(bǔ)配對(duì) 四種脫氧核苷酸 模板、能量、酶 DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化 體外復(fù)制 細(xì)胞核內(nèi) 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶 細(xì)胞內(nèi)的 DNA聚合酶 大量的 DNA片段 形成整個(gè) DNA分子 目的基因的 mRNA 單鏈 DNA (cDNA） 雙鏈 DNA (即目的基因 ) 反轉(zhuǎn)錄 合成 1）反轉(zhuǎn)錄法： 以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使 RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈 DNA，然后在酶的作用下合成雙鏈 DNA，從而獲得所需的基因。 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列 目的基因 推測(cè) 推測(cè) 化學(xué)合成 2）根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA法 ： 人工合成的目的基因 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 —— 基因工程的核心 目的： 所需物質(zhì)： 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。 它們各自的作用是什么 ? 基因表達(dá)載體的組成： 復(fù)制原點(diǎn) +目的基因 +啟動(dòng)子 +終止子 +標(biāo)記基因 它們各自的作用是什么 ? 啟動(dòng)子： 位于基因的首端的一段特殊的 DNA片斷，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能 驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA，最終獲得蛋白質(zhì) 終止子： 位于基因的尾端的一段特殊的 DNA片斷， 能終止 mRNA的轉(zhuǎn)錄 標(biāo)記基因 的作用是 為了 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái) ① 載體 與 表達(dá)載體 的區(qū)別：二者都有標(biāo)記基因和復(fù)制原點(diǎn)兩部分 DNA片段。表達(dá)載體在載體基礎(chǔ)上增加了 目的基因、啟動(dòng)子、終止子 三部分結(jié)構(gòu) ② 用到的工具
畢業(yè)設(shè)計(jì)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1