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(自創(chuàng))基因工程的基本操作程序-文庫(kù)吧

2025-02-18 14:33 本頁(yè)面


【正文】 聚合酶 細(xì)胞內(nèi)的 DNA聚合酶大量的 DNA片段 形成整個(gè) DNA分子模板 DNA95℃PCR的基本原理? PCR反應(yīng)條件? PCR過(guò)程? PCR的特點(diǎn) 50℃引物 1引物 2DNA引物PCR的基本原理? PCR反應(yīng)條件? PCR過(guò)程? PCR的特點(diǎn)引物 1引物 2DNA引物72℃Taq酶Taq酶PCR的基本原理? PCR反應(yīng)條件? PCR過(guò)程? PCR的特點(diǎn)72℃第 1輪結(jié)束第 2輪開始PCR的基本原理? PCR反應(yīng)條件? PCR過(guò)程? PCR的特點(diǎn)95℃50℃72℃TaqTaqTaqTaqPCR的基本原理? PCR反應(yīng)條件? PCR過(guò)程? PCR的特點(diǎn)72℃第 2輪結(jié)束思考?1個(gè) DNA分子進(jìn)行 PCR擴(kuò)增 ,循環(huán) 4次,理論上至少需要幾個(gè)引物?2( 2n1) (n為 循 環(huán) 次數(shù) )( 241) 2=30(三)人工合成? 已知其序列? 已知其 mRNA 的序列? 已知其翻譯產(chǎn)物的氨基酸序列基因比較小,核苷酸序列又已知。DNA合成儀合成儀目的基因的目的基因的 mRNA單鏈單鏈 DNA (cDNA))雙鏈雙鏈 DNA(即目的基因即目的基因 )反轉(zhuǎn)錄反轉(zhuǎn)錄合成合成1)反轉(zhuǎn)錄法:)反轉(zhuǎn)錄法: 以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使使 RNA為模板,反轉(zhuǎn)錄成互為模板,反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈補(bǔ)的單鏈 DNA,然后在酶的,然后在酶的作用下合成雙鏈作用下合成雙鏈 DNA,從而,從而獲得所需的基因。獲得所需的基因。蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的氨基的氨基酸序列酸序列mRNA的核苷的核苷酸序列酸序列結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)基因的核苷酸的核苷酸序列序列目的目的基因基因推測(cè)推測(cè)推測(cè)推測(cè) 化學(xué)化學(xué)合成合成2)根據(jù)已知的氨基酸序列合成)根據(jù)已知的氨基酸序列合成 DNA法法 ::人工合成的目的基因的具體方法– 從基因文庫(kù)中獲取– 利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增– 利用化學(xué)方法人工合成歸納:獲取目的基因的方法 科學(xué)家在培育抗蟲棉時(shí),經(jīng)歷了多次失敗,才獲得成功。 起初把蘇云金芽孢桿菌的 抗蟲基因 插入載體質(zhì)粒中,然后導(dǎo)入棉花的受精卵中,結(jié)果抗
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