人教版教學(xué)課件基因工程基本操作程序-文庫(kù)吧
2025-01-03 00:34 本頁(yè)面
【正文】 基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性 （ 4）從基因文庫(kù)中得到目的基因的方法 利用 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因 ① 概念： PCR全稱為 _______________，是一項(xiàng) 在生物 ____復(fù)制 ___________的核酸合成技術(shù)。 ② 原理： __________ 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 體外 特定 DNA片段 DNA復(fù)制 ③ 前提 __________ 一段已知目的基因的核苷酸序列 ④ 過(guò)程： a、 DNA變性 （ 90℃ 95℃ ）：雙鏈 DNA模板在熱作用下，_____斷裂，形成 ________ b、退火 （ 復(fù)性 55℃ 65℃ ）：系統(tǒng)溫度降低， 引物 與 DNA模板結(jié)合，形成局部________。 c、延伸 （ 70℃ 75℃ ）：在Taq酶 的作用下，合成與模板互補(bǔ)的 ________。 氫鍵 單鏈 DNA 雙鏈 DNA鏈 ：每重復(fù)一次，目的基因增加 ___倍 一 ：以 _____方式擴(kuò)增， 指數(shù) ⑤ 方式： ⑥ 條件： 模板 DNA（含目的基因） 四種脫氧核苷酸 1對(duì)引物 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶(Taq酶 ) 一段已知目的基因的核苷酸序列 過(guò)程： PCR反應(yīng)體系中目的基因成 指數(shù) (2n)形式擴(kuò)增 蛋白質(zhì)的氨基酸序列 mRNA的核苷酸序列 基因的核苷酸序列 目的基因 化學(xué)合成 推測(cè) 推測(cè) 人工合成法 基因較小，核苷酸序列已知（化學(xué)合成法） 化學(xué)法合成的目的基因含 內(nèi)含子、啟動(dòng)子和終止子 嗎？ 需要模板嗎？ 反轉(zhuǎn)錄法 mRNA RNA－ DNA雜合雙鏈 單鏈 DNA 雙鏈 DNA 逆轉(zhuǎn)錄酶 DNA聚合酶 （ 1）用一定的 _________切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出 ____________。 （ 2）用 ___________切斷目 的基因，使其產(chǎn)生 _____ ____________。 （ 3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的 ______處，再加入適量 ___________，形成了一個(gè)重組 DNA分子（重組質(zhì)粒） 限制酶 黏性末端 同一種限制酶 的黏性末端 切口 DNA連接酶 相同 : 第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建 基因表達(dá)載體的組成？ ① 使目的基因在受體細(xì)胞中 穩(wěn)定存在 ，并且可以 遺傳 給下一代 ② 使目的基因能夠 表達(dá)和發(fā)揮作用 基因表達(dá)載體 構(gòu)建的目的 ？（ P162） 目的基因必須在啟動(dòng)子與終止子之間 目的基因 啟動(dòng)子： 基因的首端， RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出 mRNA 終止子： 基因的尾端， 終止轉(zhuǎn)錄 標(biāo)記基因： 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因 思考： 作為基因工程表達(dá)載體，只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎？為什么？ 不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用，還需要有其他控制元件，如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是： （ 1） 生物之間進(jìn)行基因交流
試題試卷相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1