熒光顯微鏡及激光掃描共聚焦顯微鏡使用-文庫(kù)吧資料
2025-04-26 20:46本頁(yè)面
【正文】 處的光強(qiáng)遠(yuǎn)大于非焦點(diǎn)處的光強(qiáng)，而且非焦平面光被針孔濾去，因此共聚焦系統(tǒng)的景深近似為零，沿 Z軸方向的掃描可以實(shí)現(xiàn)光學(xué)斷層掃描，形成待觀察樣品聚焦光斑處二維的光學(xué)切片。以激光逐點(diǎn)掃描樣品，探測(cè)針孔后的光電倍增管也逐點(diǎn)獲得對(duì)應(yīng)光點(diǎn)的共聚焦圖像，轉(zhuǎn)為數(shù)字信號(hào)傳輸至計(jì)算機(jī)，最終在屏幕上聚合成清晰的整個(gè)焦平面的共聚焦圖像。兩者的幾何尺寸一致，約 100200nm； 相對(duì)于焦平面上的光點(diǎn)，兩者是共軛的，即光點(diǎn)通過(guò)一系列的透鏡，最終可同時(shí)聚焦于照明針孔和探測(cè)針孔。分光器將熒光直接送到探測(cè)器。但當(dāng)所觀察的熒光標(biāo)本稍厚時(shí)，普通熒光顯微鏡不僅接收焦平面上的光量，而且來(lái)自焦平面上方或下方的散射熒光也被物鏡接收，這些來(lái)自焦平面以外的熒光使觀察到的圖像反差和分辨率大大降低（即焦平面以外的熒光結(jié)構(gòu)模糊、發(fā)虛，原因是大多數(shù)生物學(xué)標(biāo)本是層次區(qū)別的重疊結(jié)構(gòu)）。 實(shí)驗(yàn)七 2 激光掃描共聚焦顯微鏡在生命科學(xué)中的應(yīng)用 實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求 1. 掌握激光掃描共聚焦顯微鏡的成像基本原理及其在生命科學(xué)中的應(yīng)用。 五、注意事項(xiàng) 六、作業(yè)與思考題： 的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。 2. 使用熒光顯微鏡時(shí)要注意不要直接觀察激發(fā)光源，保護(hù)眼睛。 熒光顯微鏡技術(shù)在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用 二、暗視野顯微鏡的成像原理 通過(guò)特殊的暗視野聚光器，使照明光線改
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