激光掃描共焦顯微鏡技術-文庫吧資料
2025-01-27 23:10本頁面
【正文】 激光的穿透力 、 樣品的透明度 Z軸的最大移動范圍 (166mm、 Zwide) 3. 樣品的最小光切厚度 : (載物臺最小移動距離為 40nm） 取決于 : 物鏡的 NA、針孔大小 Z軸的最小移動步距 : 40nm Z軸的分辨率 : mm 激光掃描共焦顯微鏡技術 4. 激光器 Ar激光器 : 458nm, 476nm, 488nm, 514nm GreNe : 543nm。 計算機以像點的方式將被探測點顯示在計算機屏幕上 ， 為了產生一幅完整的圖像 ， 由光路中的掃描系統(tǒng)在樣品焦平面上掃描 ， 從而產生一幅完整的 共焦圖像 。激光掃描共焦顯微鏡技術及應用 The techniques and application of Confocal Laser Scanning Microscopy 激光掃描共焦顯微鏡技術 ? 樣品要求 ? 原理 ? 功能 ? 在生物醫(yī)學中的應用 激光掃描共焦顯微鏡技術 人眼分辨率： 光學顯微鏡分辨率： 電子顯微鏡分辨率： 共焦顯微鏡分辨率： 二 、 原理 激光掃描共焦顯微鏡技術 原理小結 : Confocal 利用放置在光源后的 照明針孔 和放置在檢測器前的 探測針孔 實現(xiàn) 點 照明 和 點 探測 ， 來自光源的光通過照明針孔發(fā)射出的光聚焦在樣品焦平面的某個點上 ， 該點所發(fā)射的熒光成像在探測針孔上 ， 該點以外的任何發(fā)射光均被探測針孔阻擋 。 照明針孔 與 探測針孔 對 被照射點 或 被探測點 來說是 共軛 的 ， 因此被探測點即共焦點 ， 被探測點所在的平面即共焦平面 。 只要載物臺沿著 Z軸上下移動 ， 將樣品新的一個層面移動到共焦平面上 ， 樣品的新層面又成像在顯示器上 ， 隨著 Z軸的不斷移動 ， 就可得到樣品不同層面連續(xù)的光切圖像 。 HeNe: 633nm Ar激光器 (UV): 361nm ? 激光器的特點 : 1) 方向性好 : 激光基本延直線傳播 2) 單色性好 :??=108nm 3) 高亮度 : 激光方向性好 , 其在空間上的能量分布是高度 集中的 。 激光掃描共焦顯微鏡技術 : slow 220lines/s 512?512 23秒 slow2 440lines/s（ 2：雙向掃描） medium 450lines/s 512?512 medium2 900lines/s fast 1000lines/s 512?512 128?128 fast2 2022lines/s 7. 掃描密度 : 64?64 128?128 512?512 1024?1024 2048?2048 激光掃描共焦顯微鏡 技術的應用 The application of Confocal Laser Scanning Microscopy 激光掃描共焦顯微鏡應用 功能 . 、高分辨率圖像采集 、連續(xù)光學切片，顯微“ CT” Z軸（ xy平面）和 Y軸（ xz平面）方向進行光切 : xyt 、 xyzt 和 xt 掃描 9. 旋轉掃描 激光掃描共焦顯微鏡應用 應用 ? 定位 、 定量 ? 三維重組 ? 動態(tài)測量 ? 活細胞或組織內游離 Ca2+分布和濃度的變化 測量 (Mg2+ 、 Zn+ 、 Na+ 、 K+) ?自由基的檢測 ?藥物進入細胞的動態(tài)過程 、 定位分布及定量 ?蛋白質的轉位 激光掃描共焦顯微鏡應用 ? 活細胞內 H+濃度 （ pH值 ） 的測量 ? 線粒體 膜電位 的測量 ? 熒光漂白恢復 （ FRAP）
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