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正文內(nèi)容

熒光顯微鏡及激光掃描共聚焦顯微鏡使用(更新版)

  

【正文】 試劑與器材 青蛙、洋蔥、人正常肝組織切片和脂肪肝組織切片( HE染色) 甲醇、 1‰ 丫啶橙、濾紙、吸管、載玻片 熒光顯微鏡、暗視野顯微鏡、普通光學(xué)顯微鏡 四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)步驟 1. 蛙血細(xì)胞染色觀察:取少許蛙血 → 常規(guī)血涂片 → 涼干 → 甲醇固定 10 min → 1‰ 丫啶橙染色 5 min → 水洗 → 室溫干燥(濾紙擦干玻片底面) → 熒光顯微鏡觀察(先低倍后高倍觀察) (可在同一玻片上觀察未熒光染色的血細(xì)胞) 2. 取洋蔥 → 撕取一小片內(nèi)表皮 → 平面單層鋪展于玻片上 → 室溫涼干 → 1‰ 丫啶橙染色 5min → 水洗(用吸管,小心掉片) → 室溫干燥(或用濾紙擦干) → 熒光顯微鏡觀察 3. 暗視野顯微鏡觀察蛙血細(xì)胞(示范) 4. 觀察人正常肝組織切片和脂肪肝組織切片( HE染色) 1. 熒光顯微鏡要在光線盡量暗的環(huán)境下觀察。 一、激光掃描共聚焦顯微鏡的成像基本原理 2. 共聚焦掃描顯微鏡的成像原理 采用點(diǎn)光源照射標(biāo)本,在焦平面上形成一個(gè)輪廓分明的小的光點(diǎn),該點(diǎn)被照射后發(fā)出的熒光被物鏡收集,并沿原照射光路回送到由雙向色鏡構(gòu)成的分光器。把 XY平面(焦平面)掃描與 Z軸(光軸)掃描相結(jié)合,通過累加連續(xù)層次的二維圖像,經(jīng)過專門的計(jì)算機(jī)軟件處理,可以獲得樣品的三維圖像
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