熒光顯微鏡及激光掃描共聚焦顯微鏡使用(參考版)
2025-04-22 20:46本頁面
【正文】 五、注意事項 注意染色時間 注意避光 六、作業(yè)與思考題： 試述激光掃描共聚焦顯微鏡成像基本原理，并描述實驗中所觀察的現(xiàn)象 思考題： 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察到的圖象為什么比普通的熒光顯微鏡的清晰度、層次感要強許多？ 。 5. 滴一小滴甘油 /PBS封片劑 (， PBS:甘油 =1:9， v/v)封片 。 3. 滴加 DAPI溶液 100 ul室溫孵育 30 min。 ?觀察方式：以熒光為主 ?光源：激光（紫外、可見光、近紅外） ?照明方式：點照明、逐點掃描 ?成像方式：共聚焦、逐點成像 ?輸出：實時觀測 ,數(shù)字化圖像，可以進(jìn)行圖像處理和定量分析 ?多重染色樣品的觀察 LSCM的基本特點 3. 共聚焦掃描顯微鏡在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用 細(xì)胞結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)（如受體、抗原、抗體、酶、細(xì)胞 骨架蛋白等基因表達(dá)產(chǎn)物）、 DNA、 RNA等 細(xì)胞膜流動性（熒光光漂白恢復(fù)技術(shù)） 細(xì)胞內(nèi)氧自由基活性 細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化 膜電位 三、試劑與器材 青蛙 冷丙酮、 DAPI 、甘油 /PBS封片劑、濾紙、吸管、載玻片、蓋玻片 激光掃描共聚焦顯微鏡 四、實驗步驟 1. 取涂有細(xì)胞的載玻片（細(xì)胞涂在中間），冷丙酮 40C固定10 min。由于焦點
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