全內(nèi)反射熒光顯微鏡(參考版)
2025-05-16 02:56本頁(yè)面
【正文】 。 如細(xì)胞膜內(nèi)蛋白質(zhì)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，基底附近的細(xì)胞骨架，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)等。 展望前景 ? 雙色和多色全內(nèi)反射熒光激發(fā)在國(guó)際上剛嶄露頭角。（可選件） ? 底光口 使用 IX2TVR （ T型接口），獲得原始圖像。 ? 左側(cè)光口 ? 在這一光口上，原始圖像平面距顯微鏡鏡架 102mm，具有很大的靈活性，用以安裝濾色鏡轉(zhuǎn)盤(pán)或者超低 5X照相機(jī)適配器。 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入 ? 雙層多光口設(shè)計(jì)保證了輸入 /輸出靈活性 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入 ? 后上光口 ? 后上光口不改變載物臺(tái)高度，所以不影響鏡架穩(wěn)定性 這一光口可做光路輸入口，可裝一個(gè)附加熒光照明器 ? 右側(cè)光口 ? 右側(cè)光口裝置（ IX2RSPC2:可選件，視場(chǎng)數(shù)： 16）帶有一個(gè)結(jié)像透鏡，可以安裝一個(gè) C型接口 CCD照相機(jī)。 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入 ? 有效消除直到近紅外范圍的色差 ? 杰出的超級(jí)復(fù)消色差特點(diǎn)有效地消除了從可見(jiàn)光譜直到 1000nm范圍內(nèi)的色差 , 意味著從紫外到紅外范圍內(nèi)的成像都可以只用一個(gè)物鏡實(shí)現(xiàn)。 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入 ? 擁有更寬波長(zhǎng)范圍內(nèi)的高透過(guò)率 ? 內(nèi)置物鏡采用 UW多層鍍膜技術(shù)，能有效消除超寬譜帶上的反射，在可見(jiàn)光到近紅外光的波長(zhǎng)范圍內(nèi)能夠?qū)崿F(xiàn)平坦的高透過(guò)率，在近紅外和紫外范圍內(nèi)的透過(guò)率顯著提高。這種物鏡的新特性還包括精選了低自發(fā)熒光玻璃（通過(guò)全反射鍍膜和連接材料，顯著減少了自發(fā)熒光），提高了數(shù)值孔徑，增強(qiáng)了信號(hào)亮度。這意味著在一方面全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)將繼續(xù)和其它的顯微成像技術(shù)，如熒光相關(guān)光譜技術(shù)，熒光壽命成像技術(shù)以及原子力顯微術(shù)相結(jié)合；另一方面，繼續(xù)尋求成像原理上的突破，這也正是目前有待積極探索的課題。 表面或界面單分子的測(cè)定 展望前景 ? 不論是對(duì)物理成像學(xué)家還是對(duì)細(xì)胞生物學(xué)家而言，全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)均是一項(xiàng)新的技術(shù)。 縱向分辨力極高，特別適用于表面或界面單分子的測(cè)定。 雙光子激發(fā) 能 探索活細(xì)胞內(nèi)各種分子的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)，能實(shí)現(xiàn)在樣品中的高度精確定位。與聚焦平面共軛的針孔定位（即共焦）可避免來(lái)自檢測(cè)器之外的光，即從聚焦平面以外的其它地方反射 /發(fā)射過(guò)來(lái)的光。 ? TPLSM對(duì)生物系統(tǒng)和體內(nèi)細(xì)胞性質(zhì)具有高的分辨率，如細(xì)胞器，細(xì)胞連接，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度，細(xì)胞膜流動(dòng)性。與聚焦平面共軛的針孔定位（即共焦）可避免來(lái)自檢測(cè)器之外的光，即從聚焦平面以外的其它地方反射 /發(fā)射過(guò)來(lái)的光。 全內(nèi)反射的應(yīng)用比較 ? 共聚焦激光掃描顯微鏡（ CLSM） 和 雙光子激光掃描顯微鏡（ TPLSM） 則是可以檢測(cè)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)熒光的技術(shù)。 全內(nèi)反射的應(yīng)用比較 ?與其他生物單分子研究技術(shù)的比較 全內(nèi)反射熒光顯微鏡（ TIRFM） 共聚焦激光掃描顯微鏡（ CLSM） 雙光子激光掃描顯微鏡（ TPLSM） 全內(nèi)反射的應(yīng)用比較 ? 全內(nèi)反射熒光顯微鏡（ TIRFM） ? 全內(nèi)角反射熒光顯微鏡（ total internal reflection fluorescence microscope， TIRFM），利用光線全反射后在介質(zhì)另一面產(chǎn)生衰逝波的特性，激發(fā)熒光分子以觀察熒光標(biāo)定樣品的極薄區(qū)域，觀測(cè)的動(dòng)態(tài)范圍通常在 200 nm以下。 ? 結(jié)論：薄的光學(xué)層析層切片信噪比強(qiáng)；
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