全內(nèi)反射熒光顯微鏡介紹(參考版)
2025-05-06 18:43本頁(yè)面
【正文】 。 如細(xì)胞膜內(nèi)蛋白質(zhì)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，基底附近的細(xì)胞骨架，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)等。 展望前景l(fā) 雙色和多色全內(nèi)反射熒光激發(fā)在國(guó)際上剛嶄露頭角。（ T型接口），獲得原始圖像。（可選件）l 左側(cè)光口l 在這一光口上，原始圖像平面距顯微鏡鏡架 102mm，具有很大的靈活性，用以安裝濾色鏡轉(zhuǎn)盤(pán)或者超低 5X照相機(jī)適配器。DP30BW與同類(lèi)設(shè)備。l 右側(cè)光口l 右側(cè)光口裝置（ IX2RSPC2:可選件，視場(chǎng)數(shù)： 16）帶有一個(gè)結(jié)像透鏡，可以安裝一個(gè) C型接口 CCD照相機(jī)。 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l 雙層多光口設(shè)計(jì)保證了輸入 /輸出靈活性 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l 有效消除直到近紅外范圍的色差l 杰出的超級(jí)復(fù)消色差特點(diǎn)有效地消除了從可見(jiàn)光譜直到 1000nm范圍內(nèi)的色差 , 意味著從紫外到紅外范圍內(nèi)的成像都可以只用一個(gè)物鏡實(shí)現(xiàn)。新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l擁有更寬波長(zhǎng)范圍內(nèi)的高透過(guò)率l 內(nèi)置物鏡采用 UW多層鍍膜技術(shù)，能有效消除超寬譜帶上的反射，在可見(jiàn)光到近紅外光的波長(zhǎng)范圍內(nèi)能夠?qū)崿F(xiàn)平坦的高透過(guò)率，在近紅外和紫外范圍內(nèi)的透過(guò)率顯著提高。 UIS2系統(tǒng)在弱激發(fā)光下，能夠有效探測(cè)極弱熒光，從而建立了活細(xì)胞熒光成像的新標(biāo)準(zhǔn)。全內(nèi)反射熒光顯微鏡的改進(jìn)1. 光電探測(cè)設(shè)備探測(cè)效率和探測(cè)速度的提高l 新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入2. 單分子染色技術(shù)的發(fā)展新型的物鏡透鏡、聚光器和其它材料的引入l 超高的信噪比，能夠得到完美的圖像l 嶄新的 UIS2物鏡的信噪比優(yōu)越，高于現(xiàn)有物鏡50%。它的未來(lái)發(fā)展將是怎樣的呢？l 它將向著兩個(gè)前沿方向發(fā)展：技術(shù)上的進(jìn)一步創(chuàng)新和在新的細(xì)胞生命科學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。 全內(nèi)反射熒光法相對(duì)簡(jiǎn)單，費(fèi)用低廉 。 減少了光損傷，特別對(duì)需要條件溫和的生物體系有利TIRFM具有高度的界面（表面）特異性，可有效排除本體干擾，獲取界面信息。 不要求高于衍射極限的分辨率 TPLSM對(duì)生物系統(tǒng)和體內(nèi)細(xì)胞性質(zhì)具有高的分辨率。 生物單分子熒光檢測(cè)技術(shù)的比較共聚焦激光掃描顯微（ CLSM）雙光子激光掃描顯微鏡（ TPLSM）全內(nèi)反射熒光顯微鏡（ TIRFM）共同點(diǎn) 檢測(cè)細(xì)胞熒光物質(zhì)的技術(shù) —— 空間分辨熒光分析技術(shù)區(qū)別點(diǎn) CLSM提供了僅從單光學(xué)薄層收集光波的可能性。但是這個(gè)光學(xué)薄層的厚度大約為 500800nm，要大于全內(nèi)反射熒光顯微鏡的光學(xué)薄層的厚度（ 200nm）。l CLSM的重要優(yōu)勢(shì)在于，它提供了僅從單光學(xué)薄層收集光波的可能性。因?yàn)榧ぐl(fā)光呈指數(shù)衰減的特性，只有極靠近全反射面的樣本區(qū)域會(huì)產(chǎn)生熒光反射，大大降低了背景光噪聲干擾觀測(cè)標(biāo)的，故此項(xiàng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于細(xì)胞表面物質(zhì)的動(dòng)態(tài)觀察。全內(nèi)反射的應(yīng)用l在生物單分子研究中的應(yīng)用l 直接觀察細(xì)胞表面的生命活動(dòng) ,而不受細(xì)胞深層區(qū)域信號(hào)的干擾 .l 全內(nèi)反射熒光顯微術(shù)的熒光激發(fā)深度只在～ 200ｎｍ的薄層范圍內(nèi) ,從而成為研究細(xì)胞表面科學(xué)如生物化學(xué)動(dòng)力學(xué)、單分子動(dòng)力學(xué)的最有前途的光學(xué)成像技術(shù)。l 全內(nèi)反射顯微術(shù) : 典型的垂直照明深度100nm。片尺寸相當(dāng)?shù)墓鈱W(xué)切片。術(shù)相結(jié)合來(lái)研究將是未來(lái)發(fā)展的一個(gè)新的方向。結(jié)果的解釋具有一定的困難性。胞。 ? 用于用于 DNA大分子在液大分子在液 液、固液、固 液界面的單分液界面的單分子吸附行為子吸附行為 。利用全內(nèi)反射熒光顯微鏡結(jié)合后來(lái)發(fā)展的熒光共振能量轉(zhuǎn)移或者雙視角的光鏡可以看到的熒光共振能量轉(zhuǎn)移或者雙視角的光鏡可以看到離子通道與其配基或者調(diào)節(jié)子之間的相互作用，離子通道與其配基或者調(diào)節(jié)子之間的相互作用，同時(shí)可以在體內(nèi)跟蹤構(gòu)像變化與離子電流。熒光標(biāo)記的離子通道蛋白包埋到平面脂雙層中，然后用物鏡型全內(nèi)反射熒光顯微平面脂雙層中，然后用物鏡型全內(nèi)反射熒光顯微鏡觀察。? 目前，已經(jīng)發(fā)展了一種同時(shí)可以測(cè)電流和熒光信目前，已經(jīng)發(fā)展了一種同時(shí)可以測(cè)電流和熒光信號(hào)的實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)。? 單分子水平通道電流記錄可以通過(guò)使用膜片鉗方單分子水平通道電流記錄可以通過(guò)使用膜片鉗方法來(lái)檢測(cè)各種通道的電特性。 ? 離子通道通過(guò)負(fù)責(zé)神經(jīng)，肌肉興奮性細(xì)胞的質(zhì)膜離子通道通過(guò)負(fù)責(zé)神經(jīng)，肌肉興奮性細(xì)胞的質(zhì)膜調(diào)節(jié)離子電流和電化學(xué)勢(shì)。? 單配對(duì)熒光共聚焦也可以用在單分子水平單配對(duì)熒光共聚焦
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