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熒光顯微鏡及激光掃描共聚焦顯微鏡使用(完整版)

  

【正文】 激光掃描共聚焦顯微鏡觀察到的圖象為什么比普通的熒光顯微鏡的清晰度、層次感要強(qiáng)許多? 。 ?觀察方式:以熒光為主 ?光源:激光(紫外、可見(jiàn)光、近紅外) ?照明方式:點(diǎn)照明、逐點(diǎn)掃描 ?成像方式:共聚焦、逐點(diǎn)成像 ?輸出:實(shí)時(shí)觀測(cè) ,數(shù)字化圖像,可以進(jìn)行圖像處理和定量分析 ?多重染色樣品的觀察 LSCM的基本特點(diǎn) 3. 共聚焦掃描顯微鏡在生命科學(xué)研究中的應(yīng)用 細(xì)胞結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)(如受體、抗原、抗體、酶、細(xì)胞 骨架蛋白等基因表達(dá)產(chǎn)物)、 DNA、 RNA等 細(xì)胞膜流動(dòng)性(熒光光漂白恢復(fù)技術(shù)) 細(xì)胞內(nèi)氧自由基活性 細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度變化 膜電位 三、試劑與器材 青蛙 冷丙酮、 DAPI 、甘油 /PBS封片劑、濾紙、吸管、載玻片、蓋玻片 激光掃描共聚焦顯微鏡 四、實(shí)驗(yàn)步驟 1. 取涂有細(xì)胞的載玻片(細(xì)胞涂在中間),冷丙酮 40C固定10 min。分光器將熒光直接送到探測(cè)器。 2. 使用熒光顯微鏡時(shí)要注意不要直接觀察激發(fā)光源,保護(hù)眼睛。實(shí)驗(yàn)七 1 細(xì)胞熒光染色觀察與熒光顯微鏡的使用 (示范:細(xì)胞形態(tài)觀察與暗視野顯微鏡的使用) 實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c教學(xué)要求 1. 掌握熒光顯微鏡的成像基本原理及其使用; 2. 掌握暗視野顯微鏡的成像基本原理及其使用。 三、
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