熒光顯微鏡及激光掃描共聚焦顯微鏡使用-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)步驟 1. 蛙血細(xì)胞染色觀察：取少許蛙血 → 常規(guī)血涂片 → 涼干 → 甲醇固定 10 min → 1‰ 丫啶橙染色 5 min → 水洗 → 室溫干燥（濾紙擦干玻片底面） → 熒光顯微鏡觀察（先低倍后高倍觀察） （可在同一玻片上觀察未熒光染色的血細(xì)胞） 2. 取洋蔥 → 撕取一小片內(nèi)表皮 → 平面單層鋪展于玻片上 → 室溫涼干 → 1‰ 丫啶橙染色 5min → 水洗（用吸管，小心掉片） → 室溫干燥（或用濾紙擦干） → 熒光顯微鏡觀察 3. 暗視野顯微鏡觀察蛙血細(xì)胞（示范） 4. 觀察人正常肝組織切片和脂肪肝組織切片（ HE染色） 1. 熒光顯微鏡要在光線盡量暗的環(huán)境下觀察。 肪肝組織細(xì)胞。 一、激光掃描共聚焦顯微鏡的成像基本原理 2. 共聚焦掃描顯微鏡的成像原理 采用點(diǎn)光源照射標(biāo)本，在焦平面上形成一個(gè)輪廓分明的小的光點(diǎn)，該點(diǎn)被照射后發(fā)出的熒光被物鏡收集，并沿原照射光路回送到由雙向色鏡構(gòu)成的分光器。 這樣，來(lái)自焦平面的光，可以會(huì)聚在探測(cè)孔范圍之內(nèi)，而來(lái)自焦平面上方或下方的散射光都被擋在探測(cè)孔之外而不能成像。把 XY平面（焦平面）掃描與 Z軸（光軸）掃描相結(jié)合，通過(guò)累加連續(xù)層次的二維圖像，經(jīng)過(guò)專門(mén)的計(jì)算機(jī)軟件處理，可以獲得樣品的三維圖像。 4. PBS漂洗 3次，每次 5min
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