腫瘤藥理實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)-文庫(kù)吧資料
2025-09-05 20:03本頁(yè)面
【正文】 。該癌細(xì)胞惡性程度高，皮下、肌肉接種對(duì)藥物的 敏感性低，但可向肺轉(zhuǎn)移，靜脈接種可在肺形成瘤集落。重復(fù)實(shí)驗(yàn) T/C ≤ 42%，認(rèn)為有活性。取 Walker256瘤體制成瘤細(xì)胞懸液，按 106個(gè)細(xì)胞接種于大鼠大腿肌肉。 T/C大于 125%，并可重復(fù)，認(rèn)為有抗癌活性， T/C大于 150%，并可重復(fù)，認(rèn)為具有顯著活性。 T T0 殺傷率 (%) = 100% T T T0 50%生長(zhǎng)抑制所需的藥物濃度 (GI50) = 100% C T0 T T0 殺死 50%細(xì)胞所需的藥物濃度 (LC50)= 100% T0 (二 ) 在體試驗(yàn)法 小鼠白血病 L1210 系用甲基膽蒽誘發(fā) DBA/2小鼠而得。測(cè)試的細(xì)胞先用 TCA 固定，去除固定液，加入 SRB， 室溫下靜置， 然后去除未結(jié)合的 SRB， 用非緩沖 tris 堿液溶解結(jié)合的 SRB，在自動(dòng)化分光光度平板讀數(shù)儀（ 515nm波長(zhǎng)）測(cè)定 OD 值。 Do越小， 藥物的殺傷力越大， N越大殺死細(xì)胞的藥物劑量越大。在 16解剖顯微鏡下計(jì)數(shù)直徑大于75μ m的細(xì)胞集落。 2）半固體軟瓊脂培養(yǎng)法 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)的細(xì)胞，用含小牛血清的培養(yǎng)液稀釋成 1000細(xì)胞/ml的懸液；溶化 5%的瓊脂液，并按 1： 9的比例與含小牛血清的新鮮培養(yǎng)液混合，倒入 35mm培養(yǎng)皿（ 1ml/皿），室溫下待瓊脂凝固，取 ，加 5%瓊脂 , 加到已制備的瓊脂平皿中，室溫下凝固。本方法有貼壁法和半固體培養(yǎng)法兩種。 3） 取平臺(tái)期每毫升的細(xì)胞均數(shù)，比較細(xì)胞生長(zhǎng)的飽合密度（ Ns）。在培養(yǎng)后的的即刻、 7 天的細(xì)胞，用臺(tái)盼藍(lán)染色，細(xì)胞計(jì)數(shù)，然后取細(xì)胞對(duì)數(shù)對(duì)培養(yǎng)時(shí)間作圖可獲細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。根據(jù)公式 未染細(xì)胞數(shù) 活細(xì)胞率（ %） = 100% 細(xì)胞總數(shù) 生長(zhǎng)
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