腫瘤藥理實驗方法與技術(shù)-文庫吧資料
2024-09-12 20:03本頁面
【正文】 。該癌細胞惡性程度高，皮下、肌肉接種對藥物的 敏感性低，但可向肺轉(zhuǎn)移，靜脈接種可在肺形成瘤集落。重復(fù)實驗 T/C ≤ 42%，認為有活性。取 Walker256瘤體制成瘤細胞懸液，按 106個細胞接種于大鼠大腿肌肉。 T/C大于 125%，并可重復(fù)，認為有抗癌活性， T/C大于 150%，并可重復(fù)，認為具有顯著活性。 T T0 殺傷率 (%) = 100% T T T0 50%生長抑制所需的藥物濃度 (GI50) = 100% C T0 T T0 殺死 50%細胞所需的藥物濃度 (LC50)= 100% T0 (二 ) 在體試驗法 小鼠白血病 L1210 系用甲基膽蒽誘發(fā) DBA/2小鼠而得。測試的細胞先用 TCA 固定，去除固定液，加入 SRB， 室溫下靜置， 然后去除未結(jié)合的 SRB， 用非緩沖 tris 堿液溶解結(jié)合的 SRB，在自動化分光光度平板讀數(shù)儀（ 515nm波長）測定 OD 值。 Do越小， 藥物的殺傷力越大， N越大殺死細胞的藥物劑量越大。在 16解剖顯微鏡下計數(shù)直徑大于75μ m的細胞集落。 2）半固體軟瓊脂培養(yǎng)法 取對數(shù)生長的細胞，用含小牛血清的培養(yǎng)液稀釋成 1000細胞/ml的懸液；溶化 5%的瓊脂液，并按 1： 9的比例與含小牛血清的新鮮培養(yǎng)液混合，倒入 35mm培養(yǎng)皿（ 1ml/皿），室溫下待瓊脂凝固，取 ，加 5%瓊脂 , 加到已制備的瓊脂平皿中，室溫下凝固。本方法有貼壁法和半固體培養(yǎng)法兩種。 3） 取平臺期每毫升的細胞均數(shù)，比較細胞生長的飽合密度（ Ns）。在培養(yǎng)后的的即刻、 7 天的細胞，用臺盼藍染色，細胞計數(shù)，然后取細胞對數(shù)對培養(yǎng)時間作圖可獲細胞生長曲線。根據(jù)公式 未染細胞數(shù) 活細胞率（ %） = 100% 細胞總數(shù) 生長
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