腫瘤藥理實(shí)驗(yàn)方法與技術(shù)(編輯修改稿)
2024-10-10 20:03 本頁(yè)面
【文章內(nèi)容簡(jiǎn)介】 T0 T T0 殺死 50%細(xì)胞所需的藥物濃度 (LC50)= 100% T0 (二 ) 在體試驗(yàn)法 小鼠白血病 L1210 系用甲基膽蒽誘發(fā) DBA/2小鼠而得。取接種于 DBA/2小鼠第 6～7 天之腹水，制成細(xì)胞懸液，每只小鼠（ DBF1 或 CDF1）腹腔接種活細(xì)胞 1 105，觀察體重變化，計(jì)算平均存活時(shí)間 T/C（ T治療組存活時(shí)間， C對(duì) 照組存活時(shí)間）。 T/C大于 125%，并可重復(fù)，認(rèn)為有抗癌活性， T/C大于 150%，并可重復(fù)，認(rèn)為具有顯著活性。 大鼠 Walker256瘤 本瘤細(xì)胞接種在皮下或肌肉成為實(shí)體瘤，接種于腹腔則成為腹水瘤。取 Walker256瘤體制成瘤細(xì)胞懸液，按 106個(gè)細(xì)胞接種于大鼠大腿肌肉。計(jì)算瘤重和T/C。重復(fù)實(shí)驗(yàn) T/C ≤ 42%，認(rèn)為有活性。 Lewis 肺癌 是一個(gè)在 C57BL/6小鼠上發(fā)現(xiàn)的自發(fā)性肺內(nèi)未分化的上皮樣癌。該癌細(xì)胞惡性程度高，皮下、肌肉接種對(duì)藥物的 敏感性低，但可向肺轉(zhuǎn)移，靜脈接種可在肺形成瘤集落。方法是取接種于 C57BL/6小鼠肌肉或腋窩皮下的 13～ 15天的 Lewis肺癌，制成細(xì)胞懸液接種 2 106個(gè)細(xì)胞于 BDF1小鼠皮下或腹腔內(nèi)， 12天后處死動(dòng)物，作皮下接種者直接摘取腫瘤稱重，作腹腔接種者，將雙側(cè)后肢從髖關(guān)節(jié)處剪下，荷瘤肢重減去正常肢重即為瘤重。重復(fù)實(shí)驗(yàn) T/C≤ 42%為有活性。 二、抗癌作用機(jī)制研究 （一）藥物作用周期特異性研究 進(jìn)行藥物作用細(xì)胞周期性實(shí)驗(yàn)必須首先制備同步化的細(xì)胞，常用的體外培養(yǎng)細(xì)胞同步化的方法有機(jī)械振蕩法、雙胸苷同步法、含羞草氨酸 俘獲法和離心洗脫法。 機(jī)械振蕩法 機(jī)械振蕩法分離同步化細(xì)胞是基于單層貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞在進(jìn)入有絲分裂期時(shí) , 胞形變圓，松散地附在支持物上，利用搖晃或拍擊培養(yǎng)瓶可以剝離出這些細(xì)胞，利用此方法可以得到較純的 M 期細(xì)胞。雙胸苷同步法的原理是先以高濃度的 TdR處理細(xì)胞，使細(xì)胞內(nèi)的 dTTP升高，后者抑制 CDP 向 dCDP的轉(zhuǎn)變， DNA復(fù)制受阻， S期細(xì)胞停滯在S 期，其它期細(xì)胞積聚在 G1/S邊界；撤 TdR，讓原處于 S期的細(xì)胞完全越過(guò) S期，再給予TdR，讓越過(guò) S期的細(xì)胞進(jìn)入 G1/S邊
公司管理相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1