疫學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法(2)-文庫(kù)吧資料
2025-05-07 06:20本頁(yè)面
【正文】 （ 2）細(xì)胞分選； 高純度： 99%以上； 可分析小于 1/10000比例的稀有細(xì)胞群、 單細(xì)胞克隆等。67:44434450 Figure 3. mTNF induces infiltration of innate immune cells and angiostasis in tumors from TNFR1–/– but not TNFR1–/–/R2–/– mice. A to F, TNFR1–/– mice or TNFR1–/–/R2–/– mice were injected . with 5 x 106 of JmTNF10 cells. Ten days after tumor cell challenge, tissue sections of the injection site were stained for Mac1+ (A and B), Gr1+ (C and D), and CD31+ (E and F) cells as indicated. G and H, for confocal microscopy analysis, tissue sections were stained with Cy3labeled antiCD31 for blood vessel endothelial cells (green) and the VasoTACS in situ kit to detect apoptosis (red). Arrows, apoptotic endothelial cells in the tumor. ?成敗的關(guān)鍵因素 ： 組織的固定、包埋 抗體（特異性、濃度、孵育溫度和時(shí)間） 非特異性抗原的封閉 內(nèi)源性酶或自發(fā)熒光的消減 顯色 思考：為什么有的抗體能用于冰凍切片卻不能用于石蠟切片？ 3. Flow Cytometric analysis(流式細(xì)胞術(shù) ) FACS: (FluorescenceActivated Cell Sorter) BD FACSVantage BDCalibur ?測(cè)量對(duì)象 大小 懸浮在溶液中的相互離散顆粒 大小范圍： m 300 μ m 高等真核細(xì)胞 類型 酵母 細(xì)胞類型 細(xì)菌 多細(xì)胞的聚集體，如胰島等。 ?ELISA基本的實(shí)驗(yàn)過(guò)程 ?對(duì)照和標(biāo)準(zhǔn)曲線 陽(yáng)性對(duì)照 陰性對(duì)照 定量測(cè)定：標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線 待測(cè)樣品的合理稀釋 ?不同類型的檢測(cè)方法 2. Immunohistochemistry (免疫組化 ) 原理： 抗原抗體反應(yīng)，抗體標(biāo)記技術(shù)（熒光、酶） 用途： 組織或細(xì)胞內(nèi)抗原的定性和定位 流程： Copyright 169。 （ 2）酶標(biāo)記的抗原或抗體， 稱為 結(jié)合物 （ conjugate）； （ 3）酶反應(yīng)的底物。 , RIA. [Note: I do not pretend that the numbers in this figure are precise。2022 American Association for Clinical Chemistry Lequin, R. M. Clin Chem 2022。Hiles, 1968) E(L)I(S)A (Engvallamp。 Ratio最適比例 Sensitivity 敏感性 化學(xué)比色法： mg/ml 酶反應(yīng)測(cè)定法： 510μ g/ml (免疫測(cè)定中凝膠擴(kuò)散法和濁度法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿 ) 標(biāo)記的免疫測(cè)定法 ： ng/ml 水
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