20xx年醫(yī)學專題—糖類及蛋白質測定(精)(參考版)
2024-11-16 04:07本頁面
【正文】 ①最終測定的是總有機氮，而不只是蛋白質氮,第六十二頁，共六十二頁。氮基酸總量測定通常(tōngch225。如水解簡單蛋白質只得到氨基酸，但結合類蛋白質還含有非氨基酸成分。“膳食纖維”比“粗纖維”更能客觀、準確地反映食物的可利用率。果糖含有游離酮基，乳糖、麥芽糖含有游離的潛醛基。ir243。,第六十一頁，共六十二頁。,缺點 ①不如福林酚法靈敏，分析時至少(zh236。o)測定非多肽或非蛋白質來源的氮。,第五十九頁，共六十二頁。 2測定方法 (1)5mL雙縮脲試劑和lmL蛋白質溶液(1—10mg蛋白質／mL)混勻。,三、雙縮脲法 1原理 在堿性條件下，銅離子和多肽(至少有兩個(liǎnɡ ɡ232。 缺點 ①最終測定的是總有機氮，而不只是蛋白質氮； ②實驗時間長(至少需要2h才能完成)； ③精度差，精度低于雙縮脲法； ④所用試劑有腐蝕性。,優(yōu)點 ①可用于所有食品的蛋白質分析中； ②操作相對比較簡單； ③實驗費用較低； ④結果準確，是一種測定蛋白質的經(jīng)典力怯； ⑤用改進方法(微量凱氏定氮法)可測定樣品(y224。o)鹽酸標準液的體積，ml； V2——試劑空白消耗鹽酸標準液的體積，ml； N——鹽酸標準溶液的當量濃度； 0.014——1mol/L鹽酸標準溶液1ml相當于氮克數(shù)； m——樣品的質量(體積)，g(ml)； F——氮換算為蛋白質的系數(shù)。,（4）滴定 取下接收瓶，以0.05000mol/L（一般用0.01000 mol/L）鹽酸標準溶液滴定至灰色或藍紫色為終點。然后用少量水沖洗冷凝管下端外部。 夾緊螺旋夾，開始蒸餾。j237。 （3）蒸餾吸收 接收瓶內加入10ml(一般用30ml) 2%硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插入液面下； 吸取10.0ml樣品消化稀釋液由小玻杯流入反應室，并以10ml水洗滌小玻杯使流入反應室內，塞緊小玻杯的棒狀玻塞。,第五十五頁，共六十二頁。轉移至100ml容量瓶中，加水定容。,3 測定方法 （1）樣品處理 精密稱樣（約相當?shù)?0～40mg）→ 100ml定氮瓶 固體樣品0.2～2.0g 半固體樣品2～5g 液體樣品吸取10～20ml 加入催化劑、硫酸 0.2g硫酸銅，3g硫酸鉀、20ml(一般用5ml)硫酸， 硒催化劑1g、5ml硫酸 小心加熱，至無泡沫產(chǎn)生(chǎnshēng) 大火消化，至液體呈藍綠色澄清透明，再繼續(xù)加熱0.5h。,二、微量凱氏定氮法 1 測定原理同凱氏定氮法 2 主要(zhǔy224。,3 測定方法 （1）消化 （2）蒸餾(zhēngli,2 主要(zhǔy224。,第五十頁，共六十二頁。nlǐ) 樣品中的蛋白質和其他有機成分在催化劑存在下，被硫酸消化，總有機氮轉化成硫酸銨，在堿性條件下轉化為氨，通過水蒸汽將氨蒸餾至硼酸溶液中形成硼酸銨，用標準酸溶液滴定，測出樣品轉化后的氮含量。,167。 氮基酸總量測定通常采用酸堿滴定法，目前HPLC、氮基酸分析儀也已得到廣泛使用。,測定蛋白質的方法可分為兩大類： 一類是利用蛋白質的共性，即含氮量、肽鍵和折射率等測定蛋白質含量； 另一類是利用蛋白質中特定氨基酸殘基、酸性和堿性基因(jīyīn)以及芳香基團等測定蛋白質含量。pǐn)中蛋白質的含量,第四十七頁，共六十二頁。,第四十六頁，共六十二頁。)中具有凝結作用，而雞蛋卵清蛋白具有起泡能力。 (2)功能性質調查 不同種類食品中的蛋白質都有其獨特的食品功能性質，例如小麥面粉中的麥醇溶蛋白和麥谷蛋白具有成面團性，牛乳中的酪蛋白在干酪制作(zh236。,第四十五頁，共六十二頁。 目前已建立和完善了大量測定蛋白質的方法。 非蛋白氮可能來自于游離氨基酸、小肽核酸、磷脂、氨基糖、嘌呤以及某些維生素、生物堿、尿酸、脲和氨基離子，因此，食品中的總有機氮主要來自于蛋白質，小部分來自于非蛋白質組分的有機氮。,氮是存在于蛋白質中的特征元素，不同食品中蛋白質的含量相關很大。)、6mol/L鹽酸胍、有機溶劑和去垢劑所改變，其溶解性及功能性也可被變性劑所改變。 蛋白質有非常獨特的構型，它可被各種變性因素，如熱、酸、堿、8mol／L尿素(ni224。 蛋白質可以按照它的成分、結構、生物功能或者溶解特性來分類。 食品中的蛋白質種類非常復雜，其中很多已經(jīng)被純化和定性。ng)的測定,167。2 蛋白質含量(h225。 7 計算 多糖含量（%）=已糖0.9+戊糖0.88+糠醛酸0.81 膳食纖維（%）=水溶性非消化性多糖＋水不溶性非消化性多糖＋纖維素＋木質素,第四十三頁，共六十二頁。nɡ l232。nsh237。 （8）結果計算,第四十二頁，共六十二頁。)酸性洗滌劑，加熱回流2h。nɡ)洗滌纖維（ADF）的測定,1 原理 樣品經(jīng)磨碎烘干，用十六烷基三甲基溴化銨的硫酸溶液回流煮沸，除去細胞內容物，經(jīng)過濾、洗滌、烘干，殘渣即為
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