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正文內(nèi)容

生物制藥技術實驗指導-實驗三、四(參考版)

2024-10-24 19:03本頁面
  

【正文】 第五篇:實驗四電 子 科 技 大 學實驗報告學生姓名:學 號:指導教師: 實驗地點:實驗時間:一、實驗室名稱:Linux環(huán)境高級編程實驗室二、實驗項目名稱:插件框架實驗三、實驗學時:4學時四、實驗目的:需要說明為什么要進行本次實驗五、實驗內(nèi)容:PPT上的4個版本程序,以及綜合練習六、實驗步驟:PPT上的4個版本程序,以及綜合練習七、總結及心得體會:八、對本實驗過程及方法、手段的改進建議:報告評分:指導教師簽字:。掌握采用AZTEC算法壓縮ECG信號。將平穩(wěn)段和斜線段擴展成離散點來重建AZTEC數(shù)據(jù)。end end實驗結果:五,結果分析:、快速、產(chǎn)生固定的2:1的壓縮比。y0=yy(3)。)。,39。line(xx,yy,39。elsexx=[x0,n,nAZT(i)+1]。y0=yy(3)。)。,39。line(xx,yy,39。for i=1:2:mif AZT(i)0xx=[x0,n,n+AZT(i)]。x0=[0]。%描繪壓縮信號 m=length(AZT)。endsubplot(2,2,3)。Vmni=V。Vsi=V1。sgn=sgn*1。Tsi=0。_PLATEAU39。endif(V1Vsi)elseif T1VLthAZT=horzcat(AZT,[1*Tsi,Vsi,T1,V1])。if length(AZT)0 Vsi=AZT(end)。elseLineMode=39。_PLATEAU39。V1=(Vmx+Vmn)/2。while iLineLen=LineLen+1。VLth=1。LineLen=1。LineMode=39。Vmxi=x(i)。%AZTEC算法計算ECG信號 m=length(x)。%為y增加內(nèi)容end endsubplot(2,2,2)。%為y增加內(nèi)容else r=x1。if or(not(s1),s1+s2)==1 r=x2。s1=sign(x1x0)。x1=x(i+1)。y=[x(1)]。s1=0。plot(x)。線檢測線處理四. 實驗程序%轉折點算法計算ECG信號x=1*[0 0 0 0 042 0464246644662 6 12 8 016386084906632424 8 12 12 10 6 6 6 4 0 0 0 0 024 0 0 022 0 02222 0]。AZTEC算法:數(shù)據(jù)壓縮算法將原始ECG數(shù)據(jù)分為水平直線和斜線段。除了大振幅與陡峭的QRS復波外,對于ECG來說,100次/s的采樣速率是足夠的。在matlab中利用plot函數(shù)畫出其波形,并觀察其特點;;,觀察不同Vth, VLth參數(shù)下的壓縮信號波形。(有時可能因對照組處理不當而使其它組的讀數(shù)為負值,這時可以以蒸餾水作為空白。四環(huán)素標準品(1000U/ml)取1ml于50ml容量瓶中,加1ml濃度為6mol/L的HCl,水浴煮沸15min后,冷卻,稀釋至50ml,380nm測吸光度。實驗步驟:取上述保存的處理發(fā)酵液上清l ml(效價約為1000U/m1)于50ml容量瓶中,加入lml濃度為lg/l00ml EDTA溶液,加蒸餾水9ml,再加入lml濃度為3mol/L的NaOH,在20~25℃下保溫15min后,/L的HCl,煮沸15min后,冷卻,稀釋至刻度,在分光光度計上于440nm處測定其吸光度值。因四環(huán)素能和鈣鹽形成不溶性化合物,故發(fā)酵液中的四環(huán)素濃度不高,預處理時通常用草酸將發(fā)酵液酸化至pH=~,使四環(huán)素盡量溶解??傂r與四環(huán)素效價二者之差即為金霉素的效價。四環(huán)素和金霉素在酸性條件下,加熱,可產(chǎn)生黃色的脫水金霉素和脫水四環(huán)素,其色度與含量成正比。效價(titer或titre)是評價抗生素效能的標準,它代表抗生素對微生物的抗菌效力,也是衡量發(fā)酵液中抗生素含量的尺度,人們以1181。作展開劑中極少量強極性溶劑(%)或pH值的改變可顯著改善拖尾現(xiàn)象。要控制好點樣量,樣品太少,斑點不清楚,難以觀察,但樣品量太多時往往出現(xiàn)斑點太大或拖尾現(xiàn)象。注意事項:因四環(huán)素能和鈣鹽形成不溶性化合物,故發(fā)酵液中的四環(huán)素濃度不高,預處理時通常用草酸將發(fā)酵液酸化至pH=~,使四環(huán)素盡量溶解。4.熒光顯影待溶劑前沿展至板的一半以上時將層析板取出,標出溶劑前沿,于通風櫥中晾干,用氨水熏數(shù)秒鐘后即可在紫外燈下顯影,畫出黃色斑點,分別算出Rf值。然后將層析板置于盛有展開劑的層析缸中,在室溫下展層6~8h(與溫度有關)。(展開)用正丁醇:醋酸:水(4∶1∶5)的上相作展開劑。(一般效價在1000u/ml以上點3次,500~1000u/ml點4次,200~500u/ml點5次)。2.點樣~, ,10000 rpm,5min,備用。展開劑:正丁醇:醋酸:水(4∶1∶5)2L。本實驗以四環(huán)素、金霉素標準品溶液作為對照對發(fā)酵液進行鑒定。薄層色譜分析法由于簡便、快速,能有效地、直觀地反映藥品地真實性、穩(wěn)定性,現(xiàn)已成為藥物制劑的鑒別和質(zhì)量控制的行之有效的方法之一。通過這種展開操作,各成分呈斑點狀移動到各自的位置上,再根據(jù)Rf值的測定進行鑒定。薄層層析是以薄層材料為支持物,在密閉容器中,樣品在其上展開。當欲被分離的各種物質(zhì)在固定相和流動相中的分配系數(shù)不同時,它們就能被分離開。被分離物質(zhì)在兩相中都能溶解,但分配系數(shù)不同,展層時就會形成以不同速度向前移動的區(qū)帶。一般是水相和有機溶劑相。此外,近來 5 也應用親和層析,即將與基質(zhì)類似的化合物(通常為共價鍵)結合到固定相上,再利用其特異的親和性沉淀與其對應的特定的酶或蛋白質(zhì)。層析根據(jù)固定相與溶質(zhì)(試料)間親和力的差異分為吸附型、分配型、離子交換型層析等類型。用作固定相的有硅膠、活性炭、氧化鋁、離子交換樹脂、離子交換纖維等,或是在硅藻土和纖維素那樣的無活性的載體上附著適當?shù)囊后w。實驗三 四環(huán)素、金霉素的薄層層析鑒定(驗證型)實驗目的:掌握薄層層析的原理,四環(huán)素族抗生素的定性鑒定方法。六、結果與討論 .計算四環(huán)素的得率。五、注意事項1.純化攪拌時間不應少于2h,溶液溫度保持在15 ℃ 以下。結晶液全部倒入后,抽干。待濾液溫度冷至5 ~ 7 ℃ 時,徐徐加入經(jīng)過濾的濃氨水,并隨時用pH 試紙測定溶液的pH,當pH ~ 時(用酸度計測定),停止加入氨水,并繼續(xù)攪拌2 h,使結晶完全。將純化后的溶液緩緩倒入布氏漏斗,過濾濾液應完全澄清,否則必須重新過濾,直到完全澄清。2.純化在酸化反應的燒壞中,按酸化的發(fā)酵液凈體積,攪拌下依次緩慢加入純化劑(黃血酸鉀溶液、硫酸鋅溶液、硼砂溶液),每種溶液終濃度均為2 g/L,加入時間間隔15min,以便作用完全。四、實驗步驟 1.酸化取600ml 四環(huán)素發(fā)酵液,置裝有機械攪拌的1000 mL燒杯中,開始攪拌,待發(fā)酵液溫度降至20 ℃ 以下時,緩緩加入草酸溶液,草酸加入量為27~35g/L,并不時測定發(fā)酵液的pH。三、實驗試劑及儀器 1.試劑300 g/L草酸溶液、200 g/L 黃血酸鉀溶液、200 g/L 硫酸鋅溶液、200 g/L 硼砂溶液、濃氮水、3 g/L草酸溶液。(5)淋洗 雖然發(fā)酵液經(jīng)酸化后大部分四環(huán)素已溶入溶液中,但仍有部分殘存在菌渣中,且過濾不可能十分徹底。(3)過濾 通過過濾,使四環(huán)素溶液與菌絲體以及其他雜質(zhì)分離,再經(jīng)過復濾、精濾,進一步提高濾液質(zhì)址,得到澄清的濾液。(2)純化 純化劑(黃血鹽、硫酸鋅和硼砂)與草酸一起混合作用,可以除去發(fā)酵液中大量酸溶性蛋
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