【正文】 3/5/2023 122 3 對藥典重要建議 ? (1) 取消藥材標準 ? （ 2） 一藥一名 ? (3) 飲片和中成藥的標準要有相關(guān)性 3/5/2023 123 謝謝觀看 /歡迎下載 BY FAITH I MEAN A VISION OF GOOD ONE CHERISHES AND THE ENTHUSIASM THAT PUSHES ONE TO SEEK ITS FULFILLMENT REGARDLESS OF OBSTACLES. BY FAITH I BY FAITH 。注意 ? （ 3） 穩(wěn)定性指標 ? 有效期 。來源 (包括品種 ,生長環(huán)境 ,加工與炮制 ) ,性狀特征 ,顯微特征 (要注明粉末的規(guī)格 ,與中成藥對應(yīng) ), 3/5/2023 121 ? （ 2） 安全性指標 ? 有害物質(zhì)的限量指標； 范圍 。 效價或生物效應(yīng)比 。 ? 藥效組分的研究從經(jīng)方開始 。 ? 3．鐵鹽的檢查 ? 4．氯化物的檢查 3/5/2023 118 第 7章 中藥新藥質(zhì)量標準的制定 ? 1 現(xiàn)行國家中藥標準規(guī)定的主要內(nèi)容： ? (1)制定質(zhì)量標準的條件和內(nèi)容 ? (2)穩(wěn)定性 主要指的是中成藥 ? (3)對照品 藥材和化學(xué)單體 3/5/2023 119 2 現(xiàn)代中藥的標準 ? 以藥效組分為核心 ? 藥效組分能表述臨床療效特征 。 ? 2． 砷鹽的檢查 3/5/2023 117 ? 2．砷鹽的檢查 ? 某些中中藥及其制劑用的常水等都可能含有微量的砷鹽。 ? （ 三 ） 一般雜質(zhì)限量檢查 ? 1． 重金屬的檢查 ? 重金屬系指在實驗條件下能與硫化氫或硫化鈉作用顯色的金屬 。 目前世界各國對藥品和食品中黃曲霉毒素的限量作了嚴格的規(guī)定 （ 一般為 3～ 5μg/kg） 。 ? 一 、 有害物質(zhì)的檢查 ? （ 一 ） 黃曲霉毒素的分析 ? 黃曲霉毒素 （ aflatoxins） 為黃曲霉菌 （ Aspergillus flavus） 等一些菌類的代謝產(chǎn)物 ， 目前已發(fā)現(xiàn)的主要有 8種毒素 （ B1， B2，B2a， G1， G2， G2a， M1， M2） 。 ? 四、揮發(fā)油的含量測定 ? 相對密度在 。 ? 二、浸出物含量測定 ? 溶劑：水，醇，醚。 ? “中藥鑒定學(xué)是研究中藥鑒定方法及其質(zhì)量標準的應(yīng)用學(xué)科”這樣一個新概念，你是怎樣理解的？ 3/5/2023 114 第 5節(jié) 中藥的常規(guī)檢測項目 ? 一、水分測定 ? 藥典法：烘干法，甲苯法，減壓干燥法，氣相色譜法。 ? 。 ? 。 ? 。 ? 。對不同類群的蛋白質(zhì)系列進行比較常?？梢哉页霰Ｊ貐^(qū)域，并據(jù)此設(shè)計引物。 3/5/2023 110 primer ? 使用輔助軟件：如OLIGO(National Biosciences)和 Primer Select(DNASTAR ＩＮＣ )． ? ４．在引物中設(shè)計限制性內(nèi)切酶位點 可方便對ＰＣＲ產(chǎn)物的克隆，但引物末端至少留５～１０個保護堿基以利于酶解。到 3‘端的最后 5個堿基處時，引物的穩(wěn)定性會降低。引物設(shè)計的關(guān)鍵問題： ? 長度最好是 20個堿基以上 ? 引物的解鏈溫度（ Tm）值要大于 55℃ ? 引物的 GC含量應(yīng)接近 50%，最好在引物的 5‘端保持最高的穩(wěn)定性。最終產(chǎn)物取決于引物的濃度。 3/5/2023 108 PCR技術(shù)基本概念 ? PCR通常需要 2個位于待擴增片斷兩端的瓜聚核苷酸引物，這些引物分別與帶擴增片斷的兩條鏈互補并定向，使兩引物之間的區(qū)域得以通過聚合酶而擴增。 ? DNA應(yīng)當(dāng)完整，電泳檢查時可給出精確性高、重現(xiàn)性好的遷移帶型。 采用該技術(shù) ， 可以提煉出栽培和野生 、 道地和普通藥材等之間的特征 ，可望廣泛用于中藥的品種和質(zhì)量鑒定 。 它通過將總 RNA反轉(zhuǎn)錄成單鏈cDNA(plementary DNA)， 然后進行 PCR擴增反應(yīng) ， 分離出不同分子大小的 DNA， 挑選出有差異的表達基因進行序列分析 。 3/5/2023 105 DNA遺傳標記鑒定中藥的主要方法 ? DNA序列測定法 ， 隨機擴增多態(tài)性 DNA指紋分析（ random amplified polymorphic DNA,RAPD） ， 任意引物 PCR反應(yīng)技術(shù) （ arbitrarily primed PCR,APPCR） ，限制性內(nèi)切酶酶切片段長度多態(tài)性分析 （ restriction fragment length polymorphism， RFLP） ， PCR擴增特定片斷的限制性位點分析等方法 。 正是這種壓力的不同 ， 使得 DNA分子的不同區(qū)域有不同程度的遺傳多樣性 。 在DNA分子上 ， 有編碼與物種密切相關(guān)的基因區(qū)域 、 不十分密切相關(guān)的基因區(qū)域和非編碼基因區(qū)域 。 3/5/2023 103 （五） DNA遺傳標記鑒定法 ? DNA分子是由 G、 A、 C、 T 4種堿基 （ base pairs） 構(gòu)成 ， 為雙螺旋結(jié)構(gòu)的長鏈分子 ， 生物體特定的遺傳信息便包含在特定的堿基排列序列中 ， 遺傳上的差異便表現(xiàn)在 4種堿基排列順序的變化之中 ， 這就是生物的遺傳多樣性 。 3/5/2023 102 （四）純指標測定法 ? 單純指標測定法就是測定某藥物或某類藥物某一特性或某一藥理作用的強弱 。鑒于現(xiàn)時尚缺乏可靠的定量法，故可利用動物試驗以檢定藥物的效力。 3/5/2023 101 生物效價 ? 例如，《中國藥典》規(guī)定洋地黃制劑的質(zhì)量標準：洋地黃葉 (Folium Digitalis)要保證同樣洋地黃制劑的各種商品的效價一致，而并不是為了使不同的精制強心苷效價相等。中藥的效價通常以 1g中藥中所具有的“作用單位”數(shù)來表示。所以，就宜用生物檢定法進行效價測定。 換言之 ，是利用生物體的反應(yīng)來鑒定中藥有效成分的含量或效價 ， 測定藥物的療效和毒性 （ toxicity）的方法 。 如黃連 、 黃柏 、 黃芩等具清熱功效中藥的抑菌率或抗菌效價 (titer)的測定 ， 對洋地黃強心指標生物效價的測定等 。 如對中藥梔子的鑒別 。 由于染色體形態(tài)只能在細胞分裂的中 、后期觀察 ， 故本方法只適用于果實和種子類中藥的鑒定 。 3/5/2023 98 （二） 細胞生物學(xué)鑒定法 ? 細胞生物學(xué)鑒定法主要是采用染色體 （ chromosome）的分類技術(shù)對中藥進行鑒定 。 它是通過制備特 異 抗 原 試 劑 ， 采 用 免 疫 電 泳(immunoelectrophoresis)或瓊脂免疫擴散等方法達到鑒定目的的 。 ? 基因鑒定法包括 DNA（ deoxyribonucleic acid,脫氧核糖核酸 ） 遺傳標記鑒定法和 mRNA（ messenger ribonucleic acid， 信使 RNA） 差異顯示鑒定法等 。 該法以藥理作用和分子生物學(xué)為基礎(chǔ) ， 以生物統(tǒng)計為工具 ， 運用特定的實驗方法和病理模型 ， 通過被測物與相應(yīng)的對照品在一定條件下比較其產(chǎn)生特定生物反應(yīng)的劑量比例 ， 測出藥物的活性作用 。 ? 通常分為生物效應(yīng)鑒定法和基因鑒定法兩大類 。 3/5/2023 95 五、生物鑒定法 ? 生物鑒定 （ bioassay） 法又稱 “ 生物檢定 ” 或“ 生物測定法 ” 。 定量鑒定法簡稱定量法 ， 就是根據(jù)中藥含有的功效成分或主成分 ， 測定其相對的含量 ， 本法主要用于中藥的質(zhì)量評價和純度檢查 。 定性鑒定法簡稱定性法 ，就是根據(jù)中藥具有的各種特殊成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì) ， 進行的真?zhèn)舞b別 。 3/5/2023 91 理化鑒定的應(yīng)用范圍 ? 在中藥鑒定工作中 ， 理化鑒定法主要應(yīng)用下列幾個方面：對含有不同化學(xué)成分的同名異物或性狀相似且無明顯顯微特征中藥的鑒別；對粉末 、 破碎的中藥或其提取物 ， 靠外觀難以檢查 ， 而在其有效成分或主要化學(xué)成分已知的情況下 ， 用理化鑒定作為鑒別真?zhèn)蔚囊环N手段；在研究中藥或?qū)ふ掖闷愤^程中 ， 檢查比較不同品種所含的有效化學(xué)成分的變化情況； 3/5/2023 92 理化鑒定的應(yīng)用范圍 ? 對同品種 ， 不同產(chǎn)地 、 批次 、 采收時間和貯藏期限等中藥 ， 在投料前進行初步比較 ， 觀察所含成分的變化情況 ， 鑒定其是否符合規(guī)定的藥用標準；對已有質(zhì)量標準而且標準中規(guī)定有 “ 鑒別 ” 、“ 含量測定 ” 的中藥進行檢查；對書刊上記載有化學(xué)成分的中藥進行初步核對；對化學(xué)成分不明的中藥進行探查 ， 檢查所含化學(xué)成分的性質(zhì)和類型；檢查中藥不同藥用部位所含的化學(xué)成分 ， 從而確定有效成分的所在部位；用于中藥提取物的鑒定；用于尋找各類中藥的適宜采收期和中成藥生產(chǎn)工藝的考察 。生物物體、器官或組織等樣品制備過程比較簡單，除一般生物制片或超薄切片能掃描觀察外，不論是動植物藥材還是礦物藥材，均無須經(jīng)過超薄切片和染色等處理，只要是完整的直徑在 12mm、厚 3mm的物體或再稍大些的干燥樣品，將其粘貼在支架上，在真空噴度器內(nèi)鍍上 1層導(dǎo)電的金屬膜 (如金、鈀、鋁碳等 )以保持樣品表面處有 1種恒定的電勢，就能進行掃描獲得微細結(jié)構(gòu)特征。,1197。 ? 掃描電鏡是利用電子探針（ electron probe）在樣品表面逐點逐行地掃描，收集樣品產(chǎn)生的二次電子信號，用于觀察樣品形態(tài)特征的裝置。 在中藥鑒定工作中常使用掃描電子顯微鏡或分析電子顯微鏡 。 3/5/2023 89 電子顯微鏡鑒定技術(shù) ? 電子顯微鏡用于觀察藥材組織和細胞等的超微結(jié)構(gòu) 。顏色的描述 。細胞形狀的描述 。組織鑒定是粉末鑒定的基礎(chǔ) ， 以粉末鑒定應(yīng)用最為廣泛 。 3/5/2023 87 （二）顯微鑒定的主要內(nèi)容 ? 顯微鑒定的目的多數(shù)用于品種鑒定 ， 部分用于定量分析 。 3/5/2023 86 （一）顯微標本片的制備 ? 顯微標本片根據(jù)制作方法和保存的需要，分為半永久制片、永久制片和臨時制片 3大類。 3/5/2023 85 三、顯微鑒定法 ? 基本概念：顯微鑒定（ microscopical identification）法就是利用顯微鏡(microscope)、顯微技術(shù) (microscopy)及顯微化學(xué)方法等對中藥進行分析鑒定，以確定其真?zhèn)?、純度?purity）、品質(zhì)以及鑒別依據(jù)。 ? 。 3/5/2023 84 上一節(jié)需要掌握的關(guān)鍵問題 ? ？ ? ？ ? ？ ? 。 3/5/2023 83 性狀鑒定的內(nèi)容 ? 性狀鑒定描述要點 形狀、大小、表面、顏色、質(zhì)地、斷面、氣、味。 ? 性狀鑒定的基本步驟和基原鑒定一樣 ， 除對樣品仔細觀察并加以描述外 ， 有時亦需進行核對標本和核對文獻等工作 。 ? 特點：簡單 、 易行 、 迅速 。 具體地說 ，就是用眼看 、 手摸 、 鼻嗅 、 口嘗 、 感試等十分簡便的方法來鑒別中藥的真?zhèn)?、 純度或粗略估計品質(zhì)的優(yōu)劣 。 在實際工作中 ， 遇到的檢品多是不齊全的 ， 除了極個別的品種特征十分突出可以鑒別外 ，常須深入產(chǎn)地調(diào)查和采集實物 ， 了解其名稱 (俗名或土名 )、 分布 、 生境 、 習(xí)性 、 用藥習(xí)慣 、 采收加工等情況 ， 否則就無法著手鑒定 。 3/5/2023 79 鑒定的步驟與基本方法 ? ? （ 1） 觀察的順序及方法 采用先觀察整體 、 后觀察局部形態(tài)的原則 。 ? 特點：宏觀 。 3/5/2023 78 一、基原鑒定法 ? 基原鑒定 （ origin identification） 法 ， 又稱 “ 來源鑒定法 ” ， 它是中藥鑒定的基礎(chǔ) ，也是中藥研究 、 生產(chǎn) 、 開發(fā)利用的主要依據(jù) 。 3/5/2023 77 第 4節(jié) 中藥鑒定的方法 ? 中藥的鑒定方法主要有基原 (來源 )鑒定法 、 性狀鑒定法 、 顯微鑒定法 、 理化鑒定法 、 生物鑒定法 ， 簡稱為 “ 五大鑒定法 ” 。 ? 雜質(zhì)檢查方法：按規(guī)定的方法進行檢查。人為摻入的雜質(zhì)多見于貴重中藥 。 雜質(zhì)的存在將降低中藥的療效 ， 直接影響其質(zhì)量 ， 若存在有毒的雜質(zhì)還會危及患者的生命 ， 由此可見 ， 中藥的雜質(zhì)檢查對于保證臨床用藥的安全與有效亦具有十分重要的意義 。 以中藥材為例 ， 主要有下列內(nèi)容：來源 → 性狀 →鑒別 → 檢查 → 含量測定 。 ? 三 、 鑒定的項目及程序 ? 鑒定目的主要可分為 3個方面：真?zhèn)舞b別 ， 純度檢查 (檢查異質(zhì)有機物和一般雜質(zhì) )， 品質(zhì)鑒定 。 。 3/5/2023 75 第 2節(jié) 中藥鑒定的一般程序 ? 一般按照下列程序進行 。 3/5/2023 74 中國藥典的版本及基本內(nèi)容 ? 迄今為止，《中國藥典》發(fā)行了 7個版本。