【正文】 5 中藥資源的保護(hù)與開發(fā) ? 中藥鑒定學(xué)的長(zhǎng)期任務(wù)。 ? 評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量的先進(jìn)方法：能夠比較全面地反映中藥本質(zhì)的藥效組分鑒定； ? 能夠客觀地反映中藥效價(jià)或遺傳特征等指標(biāo)的“生物鑒定法”。 3/5/2023 11 1 中藥的品種鑒定 ? 品種鑒定是對(duì)中藥真?zhèn)魏突蔫b別 首要任務(wù) 。 3/5/2023 9 ? 中成藥 (Chinese patent medicine)[制劑 ]：以飲片為原料 ， 根據(jù)臨床處方的要求 ， 采用相應(yīng)的制備工藝和加工方法 ， 制備成的隨時(shí)可以應(yīng)用的劑型 ， 約 40余種劑型 。 ? 全書共收載基本中藥 293種，包括了部分蒙藥、藏藥、維藥和傣藥等具有民族用藥特征的藥物， ? 講授 36學(xué)時(shí) (約 100個(gè)品種 )。中藥鑒定學(xué) Identificology of Chinese Materia Medica 張貴君 教授 主編 科學(xué)出版社 北京市精品教材 3/5/2023 1 引言 ? 中藥鑒定學(xué)科的特點(diǎn) ? 是中藥專業(yè)的專業(yè)課程 ? 是中藥國(guó)際化的瓶頸 ? 發(fā)展方向趨向于《中藥組分鑒定學(xué)》（ Alignment Identificology of Chinese Materia Medica ） ? 中藥 (Chinese Materia Medica )與生藥（ Pharmacognosy。實(shí)驗(yàn) 36學(xué)時(shí)。 ? 中藥的方劑：已達(dá) 100 000余首 ， 已經(jīng)批準(zhǔn)生產(chǎn)的中成藥數(shù)量為 9 300余種 。 ? 商品中藥達(dá) 7 000余種 ， 其飲片 1 200種左右 、 中成藥 6 000種左右 。 3/5/2023 14 3 繼承和弘揚(yáng)祖國(guó)藥學(xué)遺產(chǎn) ? 商品中藥是傳承的 歷史任務(wù) 。 ? 有使用價(jià)值和一定源蘊(yùn)藏量的才稱之為資源。 ? 生藥學(xué)是從藥物學(xué)中分離出來(lái)的獨(dú)立學(xué)科 ， 當(dāng)時(shí)生藥學(xué)的基本任務(wù)是：研究商品生藥的來(lái)源 、 鑒定商品藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣 （ 品種和質(zhì)量 ） 。 1880年 ， 日本學(xué)者大井玄洞譯著生藥學(xué) ， 系由德文 “ Pharmakognosie” 一詞日譯而成 ， 并將生藥學(xué)研究的對(duì)象 “ drogen” 譯為 “ 生藥 ” 。 我國(guó)許多藥學(xué)工作者 ， 在中藥鑒定方面做出了很大的貢獻(xiàn) ， 他們運(yùn)用近代科學(xué)技術(shù) ， 對(duì)中藥進(jìn)行研究 、 調(diào)查 、 考證 ， 使中藥由傳統(tǒng)的經(jīng)驗(yàn)鑒別和質(zhì)量管理 （ quality management） 發(fā)展到了現(xiàn)代的科學(xué)方法 ， 擴(kuò)大了中藥資源和使用范圍 。 90年代中期 ， 出現(xiàn)了用 X衍射傅里葉譜分析研究道地藥材的實(shí)例；與此同時(shí) ，出現(xiàn)了非線性科學(xué)用于中藥分類的技術(shù) ， 如采用工程技術(shù)手段模擬生物神經(jīng)網(wǎng)結(jié)構(gòu) 、 特征 、 功能一類的人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)鑒定系統(tǒng) ， 并對(duì)厚樸等中藥進(jìn)行了質(zhì)量評(píng)價(jià)研究 。 3/5/2023 30 ? 近年來(lái) ， 由于邊緣學(xué)科新技術(shù)的發(fā)現(xiàn) ， 中藥鑒定的方法不斷創(chuàng)新 ， 隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué) 、 電化學(xué)分析 （ ECA） 技術(shù) 、 色譜與光譜聯(lián)用技術(shù) 、 差熱分析技術(shù) 、 免疫技術(shù) 、 電子計(jì)算機(jī)技術(shù) 、 X射線熒光光譜 （ XRF） 和等離子體光譜 （ ICP） 、 藥效學(xué)和藥動(dòng)學(xué)等邊緣學(xué)科現(xiàn)代先進(jìn)手段的應(yīng)用 ， 彌補(bǔ)了傳統(tǒng)中藥鑒定方法和技術(shù)上的不足 ， 使對(duì)中藥的品種鑒定與質(zhì)量評(píng)價(jià)從樸素的認(rèn)識(shí)論向客觀化 、 科學(xué)化的方法論方向邁出了關(guān)鍵的一步 。 栽培和養(yǎng)殖的藥用植物和動(dòng)物 ，以及利用生物技術(shù)繁殖的生物個(gè)體和產(chǎn)生的有效物質(zhì)屬于人工資源 (artificial resource)。 主要藥材資源有酸棗仁 Ziziphus jujuba . spinosa (Bunge) Hu ex H. F. Chou 、 黃芩S c u t e l l a r i a b a i c a l e n s i s G e o r g i、 知母Anemarrhena asphodeloides Bge.、 銀柴胡Stellaria dichotoma L. var. lanceolata Bge.、 北沙參 Glehnia littoralis Fr. Schmidt ex Miq.、 全蝎 Buthus martensii Karsch、 龍骨等 。因地處熱帶及亞熱帶的自然環(huán)境，有許多特有的天然藥材資源，如鉤藤 Uncaria rhynchophylla (Miq.) Jacks.、紅大戟 Knoxia valerianoides Thorel et Pitard、黃精Polygonatum kingianum Coll. et Hemsl.、金毛狗脊 Cibotium barometz (L.) J. Sm.、地楓皮Illicium difengpi K. I. B. et K. I. M.、千年鍵Homalomena occulta (Lour.) Schott等。 3/5/2023 44 青藏產(chǎn)區(qū) ? 包括西藏自治區(qū)大部分 、 青海南部 、 四川西北部和甘肅西南部 。 它是在分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種新興技術(shù)領(lǐng)域 。 截至1989年底 ， 全國(guó)中藥飲片生產(chǎn)廠家已達(dá)到 1 500多個(gè) ，而且所有飲片廠基本上實(shí)現(xiàn)了機(jī)械化 、 半機(jī)械化生產(chǎn) ，提高了飲片的產(chǎn)量和質(zhì)量 。 許多藥材由于天時(shí) 、 地利的生長(zhǎng)條件和多年來(lái)勞動(dòng)人民精心培植和加工 ， 逐步形成了歷史悠久 、 品種優(yōu)良 、 生產(chǎn)及加工技術(shù)成熟 、 質(zhì)量穩(wěn)定 、 臨床常用的著名藥材 。 ? 只有合理地 、 科學(xué)地保護(hù)中藥資源 ， 才能保證中藥產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展 。 這些情況 ， 不僅嚴(yán)重影響中藥材的供應(yīng) ， 而且關(guān)系到生態(tài)平衡 、環(huán)境惡化以及人類生存的大問(wèn)題 。 3/5/2023 57 二、中藥資源的開發(fā) ? 資源的開發(fā)是指人們對(duì)植物資源進(jìn)行勞動(dòng) ， 以達(dá)到利用所采取的措施 。 ? 、 植物的養(yǎng)殖 、 馴化和栽培研究 ， 要充分發(fā)揮藥材主產(chǎn)地的優(yōu)勢(shì) ， 全面實(shí)施 GAP標(biāo)準(zhǔn) ， 實(shí)現(xiàn)中藥材生產(chǎn)的集約化和規(guī)?；?。這些因素的變化可以引起中藥的內(nèi)在成分和外觀性狀發(fā)生較大的變化 。 3/5/2023 63 一、中藥材的傳統(tǒng)采收方法 ? 傳統(tǒng)采收方法的確定通常要考慮諸多自然因素，如藥材基源的生物學(xué)特性、藥用部位的生長(zhǎng)特點(diǎn)、成熟程度、采收的難易和產(chǎn)量等，以決定每種中藥材的采收時(shí)間和采收方法。 3/5/2023 67 第 5章 中藥的貯藏 ? 第 1節(jié) 中藥材貯藏中常見的變質(zhì)現(xiàn)象及其防治措施 ? 第 2節(jié) 中藥的貯藏保管方法 3/5/2023 68 ? 中藥的合理貯藏，對(duì)保證中藥的質(zhì)量穩(wěn)定有重要意義。 3/5/2023 73 第 1節(jié) 中藥鑒定的依據(jù) ? 主要依據(jù)國(guó)家頒布的有關(guān)藥品標(biāo)準(zhǔn) ， 其次是各省 (市 、 自治區(qū) )制訂的藥品標(biāo)準(zhǔn) ， 通常稱為“ 二級(jí)標(biāo)準(zhǔn) ” 。 ? 三 、 鑒定的項(xiàng)目及程序 ? 鑒定目的主要可分為 3個(gè)方面：真?zhèn)舞b別 ， 純度檢查 (檢查異質(zhì)有機(jī)物和一般雜質(zhì) )， 品質(zhì)鑒定 。 ? 雜質(zhì)檢查方法：按規(guī)定的方法進(jìn)行檢查。 3/5/2023 79 鑒定的步驟與基本方法 ? ? （ 1） 觀察的順序及方法 采用先觀察整體 、 后觀察局部形態(tài)的原則 。 ? 性狀鑒定的基本步驟和基原鑒定一樣 ， 除對(duì)樣品仔細(xì)觀察并加以描述外 ， 有時(shí)亦需進(jìn)行核對(duì)標(biāo)本和核對(duì)文獻(xiàn)等工作 。 3/5/2023 85 三、顯微鑒定法 ? 基本概念：顯微鑒定（ microscopical identification）法就是利用顯微鏡(microscope)、顯微技術(shù) (microscopy)及顯微化學(xué)方法等對(duì)中藥進(jìn)行分析鑒定，以確定其真?zhèn)?、純度?purity）、品質(zhì)以及鑒別依據(jù)。細(xì)胞形狀的描述 。 ? 掃描電鏡是利用電子探針（ electron probe）在樣品表面逐點(diǎn)逐行地掃描，收集樣品產(chǎn)生的二次電子信號(hào)，用于觀察樣品形態(tài)特征的裝置。 定性鑒定法簡(jiǎn)稱定性法 ，就是根據(jù)中藥具有的各種特殊成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì) ， 進(jìn)行的真?zhèn)舞b別 。 該法以藥理作用和分子生物學(xué)為基礎(chǔ) ， 以生物統(tǒng)計(jì)為工具 ， 運(yùn)用特定的實(shí)驗(yàn)方法和病理模型 ， 通過(guò)被測(cè)物與相應(yīng)的對(duì)照品在一定條件下比較其產(chǎn)生特定生物反應(yīng)的劑量比例 ， 測(cè)出藥物的活性作用 。 由于染色體形態(tài)只能在細(xì)胞分裂的中 、后期觀察 ， 故本方法只適用于果實(shí)和種子類中藥的鑒定 。所以，就宜用生物檢定法進(jìn)行效價(jià)測(cè)定。 3/5/2023 102 （四）純指標(biāo)測(cè)定法 ? 單純指標(biāo)測(cè)定法就是測(cè)定某藥物或某類藥物某一特性或某一藥理作用的強(qiáng)弱 。 3/5/2023 105 DNA遺傳標(biāo)記鑒定中藥的主要方法 ? DNA序列測(cè)定法 ， 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA指紋分析（ random amplified polymorphic DNA,RAPD） ， 任意引物 PCR反應(yīng)技術(shù) （ arbitrarily primed PCR,APPCR） ，限制性內(nèi)切酶酶切片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析 （ restriction fragment length polymorphism， RFLP） ， PCR擴(kuò)增特定片斷的限制性位點(diǎn)分析等方法 。 3/5/2023 108 PCR技術(shù)基本概念 ? PCR通常需要 2個(gè)位于待擴(kuò)增片斷兩端的瓜聚核苷酸引物，這些引物分別與帶擴(kuò)增片斷的兩條鏈互補(bǔ)并定向，使兩引物之間的區(qū)域得以通過(guò)聚合酶而擴(kuò)增。 3/5/2023 110 primer ? 使用輔助軟件：如OLIGO(National Biosciences)和 Primer Select(DNASTAR ＩＮＣ )． ? ４．在引物中設(shè)計(jì)限制性內(nèi)切酶位點(diǎn) 可方便對(duì)ＰＣＲ產(chǎn)物的克隆，但引物末端至少留５～１０個(gè)保護(hù)堿基以利于酶解。 ? 。 ? 四、揮發(fā)油的含量測(cè)定 ? 相對(duì)密度在 。 ? 2． 砷鹽的檢查 3/5/2023 117 ? 2．砷鹽的檢查 ? 某些中中藥及其制劑用的常水等都可能含有微量的砷鹽。來(lái)源 (包括品種 ,生長(zhǎng)環(huán)境 ,加工與炮制 ) ,性狀特征 ,顯微特征 (要注明粉末的規(guī)格 ,與中成藥對(duì)應(yīng) ), 3/5/2023 121 ? （ 2） 安全性指標(biāo) ? 有害物質(zhì)的限量指標(biāo)； 范圍 。注意 ? （ 3） 穩(wěn)定性指標(biāo) ? 有效期 。 ? 3．鐵鹽的檢查 ? 4．氯化物的檢查 3/5/2023 118 第 7章 中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定 ? 1 現(xiàn)行國(guó)家中藥標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的主要內(nèi)容： ? (1)制定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的條件和內(nèi)容 ? (2)穩(wěn)定性 主要指的是中成藥 ? (3)對(duì)照品 藥材和化學(xué)單體 3/5/2023 119 2 現(xiàn)代中藥的標(biāo)準(zhǔn) ? 以藥效組分為核心 ? 藥效組分能表述臨床療效特征 。 ? 一 、 有害物質(zhì)的檢查 ? （ 一 ） 黃曲霉毒素的分析 ? 黃曲霉毒素 （ aflatoxins） 為黃曲霉菌 （ Aspergillus flavus） 等一些菌類的代謝產(chǎn)物 ， 目前已發(fā)現(xiàn)的主要有 8種毒素 （ B1， B2，B2a， G1， G2， G2a， M1， M2） 。 ? 。對(duì)不同類群的蛋白質(zhì)系列進(jìn)行比較常?？梢哉页霰Ｊ貐^(qū)域，并據(jù)此設(shè)計(jì)引物。最終產(chǎn)物取決于引物的濃度。 它通過(guò)將總 RNA反轉(zhuǎn)錄成單鏈cDNA(plementary DNA)， 然后進(jìn)行 PCR擴(kuò)增反應(yīng) ， 分離出不同分子大小的 DNA， 挑選出有差異的表達(dá)基因進(jìn)行序列分析 。 3/5/2023 103 （五） DNA遺傳標(biāo)記鑒定法 ? DNA分子是由 G、 A、 C、 T 4種堿基 （ base pairs） 構(gòu)成 ， 為雙螺旋結(jié)構(gòu)的長(zhǎng)鏈分子 ， 生物體特定的遺傳信息便包含在特定的堿基排列序列中 ， 遺傳上的差異便表現(xiàn)在 4種堿基排列順序的變化之中 ， 這就是生物的遺傳多樣性 。中藥的效價(jià)通常以 1g中藥中所具有的“作用單位”數(shù)來(lái)表示。 如對(duì)中藥梔子的鑒別 。 ? 基因鑒定法包括 DNA（ deoxyribonucleic acid,脫氧核糖核酸 ） 遺傳標(biāo)記鑒定法和 mRNA（ messenger ribonucleic acid， 信使 RNA） 差異顯示鑒定法等 。 定量鑒定法簡(jiǎn)稱定量法 ， 就是根據(jù)中藥含有的功效成分或主成分 ， 測(cè)定其相對(duì)的含量 ， 本法主要用于中藥的質(zhì)量評(píng)價(jià)和純度檢查 。,1197。顏色的描述 。 3/5/2023 86 （一）顯微標(biāo)本片的制備 ? 顯微標(biāo)本片根據(jù)制作方法和保存的需要，分為半永久制片、永久制片和臨時(shí)制片 3大類。 3/5/2023 83 性狀鑒定的內(nèi)容 ? 性狀鑒定描述要點(diǎn) 形狀、大小、表面、顏色、質(zhì)地、斷面、氣、味。 在實(shí)際工作中 ， 遇到的檢品多是不齊全的 ， 除了極個(gè)別的品種特征十分突出