【正文】 2023年 12月 1日新版藥典實(shí)行前完成并注冊申報的生物等效性試驗(yàn)，結(jié)果按照 2023版藥典的規(guī)定判定；之后的按照新版藥典規(guī)定判定。 ? 中國藥典 2023版附錄生物等效性試驗(yàn)指導(dǎo)原則中，也已將 Cmax等效判定標(biāo)準(zhǔn)提高至幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間應(yīng)在 75％ ～ 133％ 范圍 。 ? 國內(nèi)判斷標(biāo)準(zhǔn)：我國 2023年頒布的指導(dǎo)原則中采用的等效性判定標(biāo)準(zhǔn)，要求受試制劑與參比制劑 AUC幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間在 80％ ～125％， Cmax幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間在 70％ ～ 143％范圍內(nèi) 。 ? 國外判斷標(biāo)準(zhǔn)： FDA采用的等效性范圍是受試制劑與參比制劑 AUC和Cmax幾何均值比的 90％ 置信區(qū)間均應(yīng)在 80％～ 125％ 范圍內(nèi)。 ? 1生物等效性的判定標(biāo)準(zhǔn) ? 生物等效性試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計分析，主要是用藥動學(xué)參數(shù) AUC和Cmax經(jīng)對數(shù)轉(zhuǎn)換后以多因素方差分析 (ANOVA)進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，然后用其幾何均值進(jìn)行雙側(cè)和單側(cè) t檢驗(yàn)以及計算 90％ 置信區(qū)間的方法來評價和判斷制劑問的生物等效性。 ? 舉例：比如對于普通制劑，通過預(yù)試驗(yàn)，可以避免第一取樣點(diǎn)已經(jīng)錯過了峰濃度的問題；對于緩釋制劑，可以發(fā)現(xiàn)是否存在時滯、突釋等現(xiàn)象。 體內(nèi)藥物釋放和吸收時間長， 通常會“跨越就餐時間”！ ? 預(yù)試驗(yàn) ? 建議：進(jìn)行正式的生物等效性試驗(yàn)之前，可先進(jìn)行較小樣本的預(yù)試驗(yàn) 通常為 6人。 ? 對于仿制緩釋制劑，均應(yīng)當(dāng)在空腹給藥生物等效的基礎(chǔ)上，進(jìn)行餐后給藥的生物等效性試驗(yàn)，證實(shí)在進(jìn)食狀態(tài)下與被仿品亦具有生物等效性。 ③ 參比制劑說明書中未陳述食物對吸收或者給藥方式的影響。這種情況下若受試制劑與參比制劑空腹給藥生物等效，則餐后給藥不等效的可能性很小。 免除餐后等效性試驗(yàn)的條件：對于仿制普通口服固體制劑，以下幾種情況可不進(jìn)行餐后生物等效性試驗(yàn)。 ? 國內(nèi)現(xiàn)狀：食物對生物利用度影響的研究在國內(nèi)尚未引起足夠的重視。 ? 餐后生物等效性 ? 原因：食物可改變藥物的生物利用度，不同制劑之間由于處方工藝的不同，食物對其釋藥及吸收的影響可能不同，有時雖然空腹服藥生物等效，但也可能餐后服藥的情況下出現(xiàn)不等效。監(jiān)管機(jī)構(gòu)必要時可對樣品的真實(shí)性進(jìn)行核查。 ? 藥品注冊申報單位在獲得生物等效性試驗(yàn)批件后，應(yīng)向試驗(yàn)機(jī)構(gòu) (臨床藥理基地 )提供試驗(yàn)樣品 (試驗(yàn)制劑及參比制劑 )，試驗(yàn)樣品的量應(yīng)不低于全檢需要量的 5倍。申報資料中應(yīng)詳細(xì)說明試驗(yàn)樣品及其保存條件，包括提交試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的樣品量、批號、含量，生物等效性試驗(yàn)中已使用的樣品量、剩余量，剩余樣品的保管單位、保管方式及相關(guān)責(zé)任人（可參考美國 FDA的相關(guān)指導(dǎo)原則）。 ? 存在的問題：未提供完整的試驗(yàn)圖譜，如僅提供了受試者樣品的測定圖譜，缺少方法學(xué)驗(yàn)證圖譜，缺少隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線、質(zhì)控樣品的測定圖譜等；或圖譜缺少重要的溯源信息，如未標(biāo)示分析日期和進(jìn)樣時問，未標(biāo)示受試者編碼、樣品編號等信息，未提供積分參數(shù)；有的采用不合理方式積分；有的采用了手動積分，但未提供合理的原因。③如果給藥后的藥物濃度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于基底，則不需要扣除。 ? 存在的問題：申報資料中隨行質(zhì)控不完善，如質(zhì)控樣品數(shù)不夠，達(dá)不到未知樣品總數(shù)的 5％ ；有的品種不是將質(zhì)控樣品合理分布于分析批的測定過程，而是集中在分析批的開始或結(jié)束前測定質(zhì)控樣品，導(dǎo)致了試驗(yàn)結(jié)果的可靠性不能得到保證。 ? 技術(shù)要求：相關(guān)指導(dǎo)原則中對隨行質(zhì)控樣本的數(shù)目、分布有明確的要求。 免疫法， LCMS(LCMS/MS)方法時較明顯。 ? 資料中研究設(shè)計不合理，如穩(wěn)定性的考察時間不夠，樣品濃度不夠 僅考察一個濃度等。 ? 測試樣品的穩(wěn)定性考察不完善 ? 被測試樣本從采樣到檢測周期一般需要幾周至幾個月完成，必須考察貯存和測試期間目標(biāo)物的穩(wěn)定性，并在申報資料中提供詳細(xì)的研究資料以及文獻(xiàn)資料，且不能僅以文獻(xiàn)資料代替。 技術(shù)要求： （ 1） 應(yīng)在符合 GMP條件下制備（但不一定必須要有 GMP證）；（ 2）采用的處方工藝、生產(chǎn)設(shè)備應(yīng)與今后擬上市產(chǎn)品一致；（ 3）規(guī)模應(yīng)達(dá)到中試以上 是真正用于人體的產(chǎn)品，審評人員對其質(zhì)量的關(guān)注度高于注冊生產(chǎn)三批 ? 生物樣本測定方法 ? 方法的專屬性或靈敏度不能滿足測試要求 ? 生物樣品測定及方法學(xué)驗(yàn)證與通常的藥學(xué)研究的有關(guān)物質(zhì)、含量測定等是完全不同的概念，因藥物濃度低，干擾因素多難度要遠(yuǎn)高于體外檢測。 ? （ 4）試驗(yàn)制劑與參比制劑的含量差異過大，又未進(jìn)行測定，導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)較大偏差而誤判。 ? （ 2）未在今后擬定的商業(yè)化大生產(chǎn)的車間、生產(chǎn)設(shè)備上制備，導(dǎo)致與今后上市銷售的產(chǎn)品存在一致性方面出現(xiàn)差異的可能性，且需要對在商業(yè)化生產(chǎn)線制備的樣品與等效性試驗(yàn)樣品的一致性進(jìn)行充分的研究對比，并在注冊資料中提交。 ? 原則上選擇原研廠產(chǎn)品，結(jié)果才能支持試驗(yàn)制劑與 原研產(chǎn)品治療學(xué)是否達(dá)到等效的判斷 ? 試驗(yàn)樣品的要求 ? 常見問題： ? （ 1）批量過低，很多采用實(shí)驗(yàn)室小試樣品進(jìn)行！放大后不符合生產(chǎn)的要求必須改變處方或工藝，導(dǎo)致需要重新再進(jìn)行等效性研究。否則會由于誤差的傳遞和放大，導(dǎo)致結(jié)果的把握度降低 結(jié)果不會被認(rèn)可而退審！ ? 上市后的變更研究注冊 ? 選擇原研藥而不是變更前的產(chǎn)品，包括藥學(xué)方面也必須與原研藥對比研究。 ? ? 與原研品的劑型對比。 實(shí)際資料中未按此要求提供。如普通片劑 /膠囊 原輔料等比例改變，緩釋膠囊（內(nèi)裝小丸）僅裝量變化。如無充分依據(jù)，則需要對每一個規(guī)格均進(jìn)行等效性試驗(yàn)。 ? 需要根據(jù)藥物的特性設(shè)計，如吸收的快 /慢、腸溶 /緩釋、半衰期長 /短等。 ? 取樣點(diǎn)設(shè)計不合理 ? 藥時曲線要能夠覆蓋吸收相、分布相和消除相。 ? 新藥研發(fā)中的意義 ? 在藥學(xué)研究的各項(xiàng)達(dá)到一致的前提下，與原研藥在相同條件下進(jìn)行人體生物等效性試驗(yàn)，驗(yàn)證其與原研藥的活性成分在吸收速度和吸收程度兩方面是否一致，進(jìn)而確定其臨床可替代性。如采用 HPLC法，供試品濃度很高。其中遺傳毒性雜質(zhì)在很低濃度時即可造成人體遺傳物質(zhì)的損傷，進(jìn)而導(dǎo)致基因突變并可能促使腫瘤的發(fā)生，各發(fā)達(dá)國家和組織均嚴(yán)格控制此類雜質(zhì)。 如出現(xiàn)高于質(zhì)控限度的雜質(zhì)，且經(jīng)研究確認(rèn)原研藥也出現(xiàn)同樣的雜質(zhì)，但原研藥該雜質(zhì)量低于注冊產(chǎn)品，則可以接受，但是需要進(jìn)行相關(guān)的安全性研究或提供文獻(xiàn)資料證明其安全性。 雜質(zhì)譜對比的技術(shù)要求：分別對低于鑒定限的、低于質(zhì)控限的、高于質(zhì)控限的雜質(zhì)進(jìn)行對比，主要是對高于質(zhì)控限度的雜質(zhì)嚴(yán)格控制，低的可以不一致。 特性鑒定 雜質(zhì)譜分析 （ 3） 與原研藥進(jìn)行雜質(zhì)譜的對比分析：是雜質(zhì)譜分析的重要內(nèi)容之一，在相應(yīng)雜質(zhì)物質(zhì)一致性的求證中，分析手段不能等同于日常檢測，分離技術(shù)（如 HPLC法）與光譜分析（質(zhì)譜或二極管陣列檢測）相結(jié)合或使用分析標(biāo)識物（如雜質(zhì)對照品）、多種洗脫條件下的相對保留時間的比較等手段，以便從色譜行為、 UV特征、分子量及分子碎片特征等信息共同把握其物質(zhì)一致性。 ②通過雜質(zhì)譜分析明確可能的雜質(zhì)來源和去向，在制備工藝設(shè)置相應(yīng)雜質(zhì)的針對性控制措施，并通過產(chǎn)品包裝和貯藏條件的研究，有效抑制藥品的降解，實(shí)現(xiàn)從雜質(zhì)產(chǎn)生的源頭主動性地把控藥品雜質(zhì)。 （ 2）雜質(zhì)譜分析的基本思路：①由傳統(tǒng)的 “以終為始 ”的被動思維上升到 “以源為始 ”的主動控制模式。 此處不是具體的研究資料，是整個資料中雜質(zhì)研究情況的總結(jié)。 對于降解產(chǎn)物可結(jié)合加速穩(wěn)定性和強(qiáng)力降解試驗(yàn)來加以說明；對于最終質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中是否進(jìn)行控制以及控制的限度，應(yīng)提供依據(jù)。 （ 3）手性化合物構(gòu)型的確認(rèn)：單晶 X衍射是最佳方法；也可以與對照藥物通過手性柱峰的一致性來證明。 主要問題 ： （ 1） 對用什么樣品進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證不清楚。 如用到對照品，應(yīng)明確其來源、純度、批號等 *：可以與對照品同時進(jìn)行對比（如 6類），也可以不對比，按照新藥的方式做研究（無法獲得對照品的情況下 ） 。 以上部分資料可以在“ ”部分詳細(xì)提供，此部分主要是以總結(jié)的形式表現(xiàn)。 目前絕大部分申請人采取的研究流程 小試研究 中試研究及 3批樣品制備 方法學(xué)驗(yàn)證、質(zhì)量及 穩(wěn)定性研究 3批生產(chǎn)工藝驗(yàn)證樣品制備 注冊申報 工藝、質(zhì)量的 SOP 也是被接受的一種注冊流程方式，但需要完善穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù) 注冊生產(chǎn)樣品批量的最新要求： 在今后大生產(chǎn)的生產(chǎn)線上按照 GMP驗(yàn)證過的可正常生產(chǎn)的最低以上批量制備注冊生產(chǎn)用的三批樣品，商業(yè)化大生產(chǎn)與此批量相同，或在此基礎(chǔ)上放大 23倍。 存在的主要問題： （ 1）從實(shí)驗(yàn)室研究規(guī)模直接跳躍到注冊批，無與生產(chǎn)設(shè)備原理基本一致的中間規(guī)模的多批次中試研究 可靠性差，生產(chǎn)工藝參數(shù)無依據(jù)！ （ 2）批量低，與商業(yè)化大生產(chǎn)不相匹配 無法證明大生產(chǎn)的可行性！ （ 3）把注冊批的工藝驗(yàn)證誤認(rèn)為就是“工藝驗(yàn)證”！只能“將錯就錯”，否則缺乏該項(xiàng)內(nèi)容省局不會受理！ 按照中國特色的方式處理 生產(chǎn)信息 — 工藝驗(yàn)證和評價 ? （ 1）符合國外采用的一報一批，臨床、等效性實(shí)行備案制的注冊制度，只是在中間缺乏了臨床或等效性的階段。 則第一批不能算工藝驗(yàn)證批次 工藝驗(yàn)證 是指商業(yè)化大生產(chǎn)規(guī)模的驗(yàn)證 按照工藝驗(yàn)證方案在今后商業(yè)化大生產(chǎn)的實(shí)際生產(chǎn)線上進(jìn)行的工藝驗(yàn)證，進(jìn)一步確認(rèn)申報工藝的大生產(chǎn)可行性。 工藝驗(yàn)證是指按照研究確定的工藝操作規(guī)程和參數(shù)、連續(xù)不變的制備 3批以上樣品！任何改變均不能算作工藝驗(yàn)證批次，只能屬于工藝不成熟所進(jìn)行的工藝研究范疇，需要重新驗(yàn)證。即在注冊批生產(chǎn)前應(yīng)完成所有的標(biāo)準(zhǔn)和 SOP，而不是在生產(chǎn)之后申報前完成！ 3類藥注冊臨床前可以僅建立初步的規(guī)程和標(biāo)準(zhǔn)，及標(biāo)準(zhǔn)的方法學(xué)驗(yàn)證容許有未完成的項(xiàng)目。 常見問題： 沒有或批次極少的中試研究，很多從實(shí)驗(yàn)室水平直接上到注冊臨床 /生產(chǎn)批；且注冊臨床 /生產(chǎn)批次的批量過低，遠(yuǎn)達(dá)不到可以實(shí)現(xiàn)商業(yè)化大生產(chǎn)的水平。 此時應(yīng)結(jié)合對工藝的了解，重點(diǎn)對關(guān)鍵工藝步驟、關(guān)鍵工藝參數(shù)及放大可能存在問題的步驟等進(jìn)行研究，確定適合商業(yè)化生產(chǎn)的工藝，并制訂注冊批樣品的生產(chǎn)批記錄與驗(yàn)證方案。 生產(chǎn)信息 — 工藝驗(yàn)證和評價 中試階段研究 根據(jù)小試工藝規(guī)模與擬定的大生產(chǎn)工藝規(guī)模（制劑規(guī)格、臨床需求量、生產(chǎn)設(shè)備能力等）之間的差距，進(jìn)行必要的 逐級 中試放大研究。 上述信息對于評價申報工藝的合理性是必不可少的，可根據(jù)信息量的大小，酌情在“ ”部分提供相關(guān)資料（或單獨(dú)成冊作為附件 )。 各影響因素的控制策略 (起始原料、中間體質(zhì)量的控制，各物料的投料量與配比，需控制的反應(yīng)參數(shù)及其范圍，粗品的收率范圍與純度，分離純化的方式與控制指標(biāo)等 )。 請切記這是最重要的資料?。。? 生產(chǎn)信息 — 工藝驗(yàn)證和評價 （ 3） 工藝評價的基本要素 要證明申報工藝的合理性與大生產(chǎn)的可行性，至少應(yīng)進(jìn)行以下研究并提供相應(yīng)的資料。驗(yàn)證方案、驗(yàn)證報告、批生產(chǎn)紀(jì)錄等應(yīng)有編號及版本