【正文】 這種遍在性體細(xì)胞突變因此又稱為 微衛(wèi)星 DNA不穩(wěn)定性（ microsatellite DNA instability） 。 而且在遺傳性非多發(fā)息肉型結(jié)腸癌 (hereditary mompolyposis colorectal cancer, HNPCC)中，這種體細(xì)胞突變可發(fā)生于 HNPCC家系的幾乎所有腫瘤病人的腫瘤 細(xì)胞中。由此可見，酵母 MMR修復(fù)體系對酵母基因組的穩(wěn)定性起重要調(diào)節(jié)作用。 隨后從酵母中也分離到三種 MMR基因，其中 MSH2基因與大腸桿菌中的 mutS基因同源，而 MLH1和 MPS1基因則與大腸桿菌的 mutL基因同源。這一修復(fù)途徑主要依賴于 mutH、 mutL、 mutS和 mutU等基因所編碼的酶分子來完成。 人體細(xì)胞中由于 MMR系統(tǒng)的存在可保持基因組的完整性和穩(wěn)定性，避免基因突變的產(chǎn)生保證 DNA復(fù)制的高保真度。 其中多種原因造成的雙鏈 DNA分子的 堿基錯配 是導(dǎo)致突變的主要 DNA損傷類型之一。 這類抑癌基因包括一些錯配修復(fù)基因hMSH hMLH hPMS hPMS GTBP等，以及 BRCA BRCA ATM等。此時由于各種原因造成的 DNA損傷得不到及時修復(fù)，便突變逐漸積累，最終導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。 二、 參與 DNA修復(fù)的抑癌基因 與經(jīng)典的抑癌基因不同，有一些基因并不直接抑制細(xì)胞增殖或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，但在細(xì)胞DNA修復(fù)中起重要作用。推測DPC4的功能可能是在 TGF β 受體介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)通路中作為一種重要的中心轉(zhuǎn)錄因子。 DPC4基因的功能目前尚不清楚，但其蛋白 產(chǎn)物 Smad4的氨基酸序列與黑腹果蠅（ drosophila）的 Mad基因以及線蟲（ caenorhabditis elegans）的 Mad同源基因 Sma2, Sma3, Sma4具有高度同源性，同源性最高的是外顯子 l， 2， 11(高達(dá) 85％ )，而外顯子 8， 9， 10的同源性較低（ 75％）。 14． DPC4基因 DPC4（ deleted in pancreatic cancer locus 4）是 Haln等于 1996年新近克隆出的定位于人第18號染色體長臂（ ）的基因，其 cDNA長 2680 hp，編碼 552個氨基酸殘基，有 11個外顯子和 10個內(nèi)含子。 這些資料充分說明， PTEN是一個 典型的抑癌基因。這些突變分別為無義突變和錯義突變，均發(fā)在 PTEN編碼蛋白的主要結(jié)構(gòu)功能區(qū)（酪氨酸磷酸酶核心基序）的 DNA序列上。 Cowden（ CD）綜合癥是一種常染色體隱性遺傳性腫瘤綜合癥，其特征為多個臟器發(fā)生錯構(gòu)瘤，包括甲狀腺、乳腺、皮膚及女性生值系統(tǒng)，而且很容易發(fā)展成甲狀腺癌和乳腺癌。 PTEN可顯擇性地抑制 ERK激活的 MAPK途徑，使其不受整合素和生長因子的影響，從而對細(xì)胞增殖起抑制作用。 ③ 絲裂原激活的蛋白激動（ mitogen activated protein kinase,MAPK）途徑 有報道整合素可激活 MAPK途徑及其細(xì)胞外調(diào)節(jié)激酶（ ERK）。這些酶可促使細(xì)胞進(jìn)入分裂周期 ,并阻止細(xì)胞周亡。 生長因于與膜上受體結(jié)合，激活 PI3激酶，從而使信使前體 PIP2磷酸化生成 PIP3。 ② 三磷酸脂酸肌醇（ PI3）激酶途徑 三磷酸磷脂酸肌醇（ PIP）位于細(xì)胞膜上，是一種細(xì)胞生長調(diào)控途徑中的關(guān)鍵分子，主要作用是刺激細(xì)胞生長和阻斷凋亡。整合素通過與細(xì)胞外基質(zhì)相互作用而被活化，繼而激活FAK，促使細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。 在第 122～ 123位的氨基酸序列（ IHCKAGKGRTG） 符合酪氨酸磷酸酶的核心基序（ HCXXGXGRX）， 是迄今發(fā)現(xiàn)的第一個具有磷酸酶活性的抑癌基因。共有 9個外顯子， mRNA為 kb。 PTEN基因又名 MMAC1和 TEP1。 有報道在 38例有第 3號染色體復(fù)制（ chromosomal duplication）異常的非小細(xì)胞肺癌病人中， 50%有 3p特定序列的缺失，83%有 FHIT基因的雜合性丟失（ loss of heterozygosity, LOH),說明 FHIT等位基因的丟失可能在腫瘤發(fā)生中起著重要作用。 FHIT基因 cDNA全長 ，具有 10個外顯子，其開放閱讀讀框（ open reading frame）起于外顯子 5，止于外顯子 9。 12． FHIT基因 FHIT基因是 1996年 Ohta等用外顯子捕獲法克隆到的一個人類基因。 細(xì)胞內(nèi) DNA聚合酶作用的發(fā)揮依賴于 H1組蛋白磷酸化介導(dǎo)的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變化，抑制 H1組蛋白的磷酸化也就間接地抑制了 DNA的合成。 這些資料說明，抑制細(xì)胞周期的最關(guān)鍵因素是細(xì)胞內(nèi)游離 p27Kip1的量，而不是其總量。 在 TGF β 處理的細(xì)胞中加入過量的CyclinD1 大量實驗證明，在 TGFβ 處理的細(xì)胞系、有接觸抑制的細(xì)胞系及多種外源性生長抑制因子作用的細(xì)胞系中 p27Kip1表達(dá)量明顯增多。 153～ 169位的 17個氨基酸序列為核定位序列，該序列在 Kip的三個成員平均存在，與其細(xì)胞周期調(diào)控功能密切相關(guān)。 人 p27Kip1是由 198個氨基酸殘基組成的熱 穩(wěn)定蛋白，與 p21Cip1 在 N端有高度同源性。 CDK2的濃度是細(xì)胞通過細(xì)胞 周期關(guān)卡的關(guān)鍵因素，而 p27Kip1則特異地抑制 CyclinE CDK4 緊密結(jié)合，其活性的發(fā)揮依賴于三者間的化學(xué)劑 量關(guān)系。 它在體外與 CyclinE 在 43例非小細(xì)胞性肺癌及其對應(yīng)的正常組織中，通過 mRNA檢測及免疫組化顯示，在正常肺組織中 p21mRNA及蛋白表達(dá)很低，而在肺癌組織中 p21mRNA及蛋白均高表達(dá)，其機(jī)理尚不太清楚。 在大多數(shù)腫瘤細(xì)胞中未發(fā)現(xiàn) p21突變，而只見到其表達(dá)改變。 ② 非依賴 p53途徑 生長因子（ PDGF、 FGF、 EGF、 TGF β ）等作為細(xì)胞外信號，刺激 p53 /的靜止期細(xì)胞，通過細(xì)胞分裂素活化的蛋白激酶 (mitogenactivated protein kinase， MAPK)途徑調(diào)節(jié) p21轉(zhuǎn)錄。 CDK2結(jié)合使其喪失磷酸激酶活性，使 pRb不能發(fā)生磷酸化，從而使細(xì)胞周期停滯于 G1期； ? p21蛋白還能與增殖細(xì)胞核抗原（ Proliferating cell nuclear antigen, PCNA）結(jié)合，使 PCNA不能與 DNA聚合酶 δ 形成復(fù)合物，從而抑制 DNA合成。 ? p21蛋白能與 CyclinD1 它能與多種 Cyclin其 N末端第 21~26個氨基酸殘基可與 CyClinD,E結(jié)合，C末端第 124~164氨基酸殘基可與 PCNA結(jié)合，中間第 49～ 72對氨基酸殘基可與 CDK2結(jié)合。其 cDNA長約 。并根據(jù)其功能給予了不同的命名，如 CDK相互作用蛋白（ CDK interacting protein 1， Cip 1），野生型 p53活化的片段（ wild type p53activated fragment 1,WAF 1)等。 CDK2 CyclinA CDK4 CyclinD1 p27Kip1與 p21Cip1 N端間具有 42％的同源性， p27Kip1與 p57 Kip2N端間具有 47％的同源性?，F(xiàn)己知的 Kip包括 p21Cip1 （ cyclin inhibition protein 1）、 p27Kip1(kinase inhition protein) 及 p57Kip2三種細(xì)胞周期抑制蛋白。 由此可見， pl6 INK4a 基因的異常甲基化也可能在腫瘤發(fā)生中起著重要的作用。 pl6 INK4a基因中最常見的 失活機(jī)理 為純合性缺失，其他兩種可能的機(jī)理則為突變和甲基化。在肉瘤和其他一些腫瘤中， MDM2過度表達(dá)，所以盡管 wtp53基因本身無突變，卻檢測不到 wtp53 mRNA的存在。 pl6 INK4a失活可導(dǎo)致細(xì)胞周期紊亂。 兩種 抑癌機(jī)理 ； pl6 INK4a ／ pRb途徑 p19ARF ／ p53途徑 ? pl6 INK4a ／ pRb途徑： pl6 INK4a與 CyclinD1競爭性結(jié)合 G1期激酶 CDK4／ CDK6．，抑制其對 Rb蛋白（ pRb）的磷酸化作用，使游離的轉(zhuǎn)錄因子 E2Fl與未磷酸化的 pRb結(jié)合，結(jié)果依賴于 E2F1轉(zhuǎn)錄的基因不能被轉(zhuǎn)錄，從而抑制 DNA合成，抑制細(xì)胞由 G1期進(jìn)入 S期，抑制細(xì)胞分裂。 pl6 INK4a基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物由外顯子 l α ，外顯子 2和外顯子 3組成，而 ARF基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物則由外顯子 1β ，外 顯子 2和外顯子 3組成。 α 產(chǎn)物編碼 pl6 INK4a ， β 產(chǎn)物編碼分子量為 19kD的蛋白質(zhì)稱之為 p19ARF （ alternative reading frame，ARF）。該類蛋白質(zhì)的 N末端具有 Cyclin box同源框及由 4個回鉤狀重疊組成的二級結(jié)構(gòu)，該保守結(jié)構(gòu)中氨基酸變異與腫瘤發(fā)生之間的相關(guān)性高于其他氨基酸部位。 pl6 INK4a基因長約 85 kb，包括 3個外顯子和 2個內(nèi)含子， cDNA全長 444 bp，編碼由 148個氨基酸殘基組成的。 為 pl6 INK4a、 p15INK4b編碼的基因位于第 9號染色體長臂 9q21區(qū)。 CDK的磷酸化激酶活性。 CDK4和 cylinD1 9. INK4基因 INK4基因的蛋白產(chǎn)物是一種細(xì)胞周期抑制蛋白（ CKI）。 最后從這些克隆中分離到一個能特異地抑制上述細(xì)胞惡性表型的 cDNA片斷，命名為Krevl基因。 近年來的研究表明，野生型 erbA基因是一種抑癌基因編碼正常甲狀腺素受體．可抑制細(xì)胞增值，促進(jìn)終未分化，而突變型 erbA基因也象 p53基因那樣僅有顯性負(fù)效應(yīng)，不但無抑癌作用，反而能抑制野生型 erbA的作用。 7. ErbA基因 同 P53基因一樣， erbA基因以前一直被認(rèn)為是癌基因。 推測其突變基因可能也象突變型 p53那樣，表現(xiàn)出顯性負(fù)效應(yīng)。 表達(dá)有發(fā)育階段特異性及組織特異性： ? 在胚胎腎上皮、睪丸和卵巢，及一些造血細(xì)胞中有表達(dá)．但在成人細(xì)胞中不表達(dá)。 6. WT1基因 WT1（ Wilms tumors type 1）為 Wilms瘤(腎惡性胚胎瘤 )的易感基因，定位于第 17號染色作短臂（ 17p13），基因全長約 59 kb，轉(zhuǎn)錄成 3kb mRNA，編碼 345個氨基酸殘基的蛋白。 NF1蛋白可能為抗增殖蛋白，表現(xiàn)為對 ras p21蛋白的負(fù)調(diào)節(jié)和阻止 ras介導(dǎo)的有絲分 裂信號。 基因全長約 6okb，轉(zhuǎn)錄成 11~13kb mRNA，編碼 2485個氨基酸殘基的蛋白。 在結(jié)腸癌中可見到 DCC基因的丟失。其序列同神經(jīng)細(xì)胞粘附分子有同源性。 MCC不僅同 FAP及結(jié)腸癌有關(guān)，還同小細(xì)胞肺癌及非小細(xì)胞肺癌等有關(guān)。 ? MCC（ mutated colorectal c