蛋白質(zhì)的測(cè)定使用凱氏定氮法解說(參考版)
2024-08-27 00:23本頁面
【正文】 當(dāng) 加入甲醛時(shí)，氨基與甲醛結(jié)合，其堿性消失，使羧基顯示出酸性， 這樣就可以用氫氧化鈉溶液滴定 COOH，并用間接法測(cè)定氨基酸的總量。 試劑 除硫酸銅與硫酸鉀制成片劑外，其他試劑與常量測(cè)定相同。 ? （ 2）特點(diǎn) ? 快速、污染少、操作簡(jiǎn)單、省時(shí) ? 國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定蛋白質(zhì) 第二法 ? 改良式凱氏裝置 江蘇畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院 泰州市質(zhì)監(jiān)局 ? 自動(dòng)凱氏定氮法 同常量凱氏定氮法 自動(dòng)凱氏定氮儀： 該裝置內(nèi)具有自動(dòng)加堿蒸餾裝置，自動(dòng)吸收和滴定裝置以及自動(dòng)數(shù)字顯示裝置。 ? 若要測(cè)定樣品的蛋白氮 ,則需要向樣品中加入 三氯乙酸 溶液 ,使其最終濃度為 5%,然后測(cè)定未加入三氯乙酸的樣品及加入三氯乙酸溶液后樣品中的含氮量 ,進(jìn)一步計(jì)算出蛋白質(zhì)含量 : 蛋白氮 =總氮 非蛋白氮 任務(wù)五：試驗(yàn)器具的清洗整理 【 拓展學(xué)習(xí) 】 ? 其他蛋白質(zhì)測(cè)定方法 —— 分光光度法 ? （ 1）原理 ? 食品中的蛋白質(zhì)在催化加熱條件下被分解，分解產(chǎn)生的氨與硫酸結(jié)合生成 硫酸銨 ，在 pH 的 乙酸鈉 乙酸 緩沖溶液中與 乙酰丙酮 和 甲醛 反應(yīng)生成 黃色 的 3,5二乙酰 2,6二甲基 1,4二氫化 吡啶化合物 。 ? ②酸式滴定管的正確使用 項(xiàng)目名稱 檢測(cè)日期 樣品名稱 檢驗(yàn)依據(jù) 內(nèi)容 1 2 3 空白 樣品質(zhì)量 m/g V初 /mL V終 / mL 消耗的體積 V1 /mL 吸取消化液體積 V3 /mL 蛋白質(zhì)含量（ g/100g） 平均值（ g/100g） 兩次測(cè)定之差 /平均值 精密度 Cy （ g/100g） F：牛乳及其制品的蛋白質(zhì)換算系數(shù) 任務(wù)四、數(shù)據(jù)記錄與計(jì)算 ? 有效數(shù)字： ? 蛋白質(zhì)含量 ≥1 g/100 g時(shí)，結(jié)果保留 三位 有效數(shù)字 ? 蛋白質(zhì)含量 ＜ 1 g/100 g時(shí)，結(jié)果保留 兩位 有效數(shù)字。 ? ⑧所用的試劑溶液 必須用 無氨蒸餾水 配制。 原理 :NH4+或NH3遇奈氏試劑會(huì)反應(yīng)生成綜紅色的碘化汞銨化合物，如NH4+或 NH3含量較少，試紙呈黃色，若含量過多，呈棕黃色或棕紅色的沉淀反應(yīng) ? ⑥在蒸餾時(shí)， 蒸汽發(fā)生要均勻充足 ，蒸餾過程中不得?；饠嗥?,否則會(huì)發(fā)生
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