微生物限度檢驗(yàn)操作規(guī)程(20xx年版)(參考版)
2024-08-05 16:21本頁面
【正文】 檢測周期：67個工作日。挑取疑似菌落接種至念珠菌顯色培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)24～48小時（必要時延長至72小時），或采用其他適宜方法進(jìn)一步鑒定。 選擇和分離培養(yǎng) 取上述培養(yǎng)物劃線接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，30～35℃培養(yǎng)24～48小時。取相當(dāng)于1g或1ml供試品的供試液，接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）的沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中，混勻。 培養(yǎng)基 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基等。 用具大、小橡皮乳頭，潔凈工作服、口罩、醫(yī)用手套、接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、滅菌剪刀、滅菌鑷子、不銹鋼藥匙、試管架、火柴、記號筆、薄膜過濾膜等。 白色念珠菌 設(shè)備、儀器及用具 設(shè)備微生物限度檢測室、陽性菌檢測室、生物安全柜、凈化工作臺、電熱恒溫水浴鍋、烘箱、滅菌柜、紫外燈等。 選擇和分離培養(yǎng) 取上述培養(yǎng)物劃線接種于甘露醇氯化納瓊脂培養(yǎng)基平板上，30～35℃培養(yǎng)18～72小時。取相當(dāng)于1g或1ml供試液，接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，混勻。 培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基等。 用具大、小橡皮乳頭，潔凈工作服、口罩、醫(yī)用手套、接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、滅菌剪刀、滅菌鑷子、不銹鋼藥匙、試管架、火柴、記號筆、薄膜過濾膜等。 金黃色葡萄球菌 設(shè)備、儀器及用具 設(shè)備微生物限度檢測室、陽性菌檢測室、生物安全柜、凈化工作臺、生化培養(yǎng)箱（30350C）、電熱恒溫水浴鍋、烘箱、滅菌柜、紫外燈等。 結(jié)果判斷 若溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基平板上有菌落生長，且氧化酶試驗(yàn)陽性，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行適宜的鑒定試驗(yàn)，確證是否為銅綠假單胞菌。取上述平板上生長的菌落進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)，或采用其他適宜方法進(jìn)一步鑒定。取相當(dāng)于1g或1ml供試液，接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）的胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中，混勻，在30～35℃培養(yǎng)18～24小時。 培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基等。 用具大、小橡皮乳頭，潔凈工作服、口罩、醫(yī)用手套、接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、滅菌剪刀、滅菌鑷子、不銹鋼藥匙、試管架、火柴、記號筆、薄膜過濾膜等。 銅綠假單胞菌 設(shè)備、儀器及用具 設(shè)備微生物限度檢測室、陽性菌檢測室、生物安全柜、凈化工作臺、生化培養(yǎng)箱（30350C）、電熱恒溫水浴鍋、烘箱、滅菌柜、紫外燈等。 結(jié)果判斷 若木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基平板上有疑似菌落生長，且三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基的斜面為紅色、底層為黃色，或斜面黃色、底層黃色或黑色，應(yīng)進(jìn)一步進(jìn)行適宜的鑒定試驗(yàn)，確證是否為沙門菌。沙門菌在木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基平板上生長良好，菌落為淡紅色或無色、透明或半透明、中心有或無黑色。 選擇和分離培養(yǎng) ， 30～35℃培養(yǎng)24～48小時。 培養(yǎng)基胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基、RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基、木糖賴氨酸脫氧酸鹽瓊脂培養(yǎng)基、三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基等。 用具大、小橡皮乳頭，潔凈工作服、口罩、醫(yī)用手套、接種環(huán)、酒精燈、酒精棉球、滅菌剪刀、滅菌鑷子、不銹鋼藥匙、試管架、火柴、記號筆、薄膜過濾膜等。 沙門菌 設(shè)備、儀器及用具 設(shè)備微生物限度檢測室、陽性菌檢測室、生物安全柜、凈化工作臺、生化培養(yǎng)箱（30350C）、電熱恒溫水浴鍋、烘箱、滅菌柜、紫外燈等。表2 耐膽鹽革蘭陰性菌的可能菌數(shù)（N）各供試品量的檢出結(jié)果每1g（或1ml）供試品中可能的菌數(shù)cfu＋＋＋－＋＋－－＋－－－N＞103102＜N＜10310＜N＜102N＜10注：（1）+代表紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂平板上有菌落生長；—代表紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂平板上無菌落生長。 結(jié)果判斷 若紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上有菌落生長，則對應(yīng)培養(yǎng)管為陽性，否則為陰性。 定量試驗(yàn) 選擇和分離培養(yǎng) 、（、）供試品的預(yù)培養(yǎng)物或其稀釋液分別接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）腸道菌增菌液體培養(yǎng)基中，30℃～35℃培養(yǎng)24～48小時。 定性試驗(yàn) 除另有規(guī)定外，取相當(dāng)于1g或1ml供試品的上述預(yù)培養(yǎng)物接種至適宜體積（經(jīng)方法適用性試驗(yàn)確定）腸道菌增菌液體培養(yǎng)基中，30℃～35℃培養(yǎng)24～48小時后，劃線接種于紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，30℃～35℃培養(yǎng)18～24小時。 試液、指示液 、。 儀器及器皿顯微鏡、托盤天平、錐形瓶、研缽、培養(yǎng)皿、量筒、試管及塞、吸管、注射器、注射針頭、載玻片、蓋玻
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