【正文】 效價(jià)測定結(jié)果的有效數(shù)字按藥典規(guī)定及數(shù)字修約的原則取舍。對(duì)于檢驗(yàn)結(jié)果不符合規(guī)定的樣品，應(yīng)有可靠性測驗(yàn)及可信限率均符合規(guī)定，且測定結(jié)果在估計(jì)效價(jià)（原料藥）或標(biāo)示量（制劑）177。 實(shí)驗(yàn)計(jì)算所得效價(jià)低于估計(jì)效價(jià)的90%或高于估計(jì)銷假的110%，則檢驗(yàn)結(jié)果僅作為初試，應(yīng)調(diào)整供試品估計(jì)效價(jià)，予以重試。 可信限率 其可信限率除另有規(guī)定外，應(yīng)不大于5%。即（）法，回歸、劑間P，偏離平行P。 三劑量（）法效價(jià)計(jì)算公式P=log1[（T3+T2+T1－S3－S2－S1）]100% S3+T3－S1－T1式中 S3為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度所致吸光度的總和； S2為標(biāo)準(zhǔn)品中間濃度所致吸光度的總和； S1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度所致吸光度的總和； T3為供試品高濃度所致吸光度的總和； T2為標(biāo)準(zhǔn)品中間濃度所致吸光度的總和； T1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度所致吸光度的總和； I為高、低濃度劑量之比的對(duì)數(shù)值，1:08時(shí)，I=。 平行線測定法 效價(jià)計(jì)算 二劑量（）法效價(jià)計(jì)算公式P=log1[T2＋T1－S2－S1）I]100% T2＋S2－T1－S1式中 P為供試品效價(jià)（相當(dāng)于標(biāo)示量或估計(jì)效價(jià)的百分?jǐn)?shù)）； S2為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度溶液所致吸光度的總和； S1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度溶液所致吸光度的總和； T2為標(biāo)準(zhǔn)品高濃度溶液所致吸光度的總和； T1為標(biāo)準(zhǔn)品低濃度溶液所致吸廣度的總和； I為高、低劑量之比的對(duì)數(shù)值，2:1時(shí)，I=。 可信限率 考核試驗(yàn)的精密度，除藥典各論另有規(guī)定外，本法的可信限率不得超過5%。 回歸系數(shù)的顯著性檢查 判斷回歸得到的方程是否成立，即X、Y是否存在著回歸關(guān)系，可采用t檢驗(yàn)。斜率（b）=∑（x－ⅹ）∑（y－y）∑（x－ⅹ）2 截距（a）=y－bx 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程 Y=bX＋a式中 x為抗生素標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度或濃度的數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換值；X為抗生素標(biāo)準(zhǔn)品溶液的濃度或濃度的數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換值的平均值；y為各標(biāo)準(zhǔn)品溶液的吸光度；y為標(biāo)準(zhǔn)品溶液吸光度的平均值。15 記錄與計(jì)算 試驗(yàn)記錄要求與管碟法相同。 空白試驗(yàn) ，其中在一支試管中立即加入12%，混勻，作為空白對(duì)照，另一支試管同法培養(yǎng)作為試驗(yàn)菌生長對(duì)照。 標(biāo)準(zhǔn)品及樣品測定 取適宜的大小厚度均勻的已滅菌試管，立即混勻，按隨機(jī)區(qū)組分配將各管在規(guī)定條件下培養(yǎng)至適宜測量的濁度值（通常約為4小時(shí)）。 供試品溶液 根據(jù)估計(jì)效價(jià)或標(biāo)示量，取供試品按標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備方法，選擇2個(gè)或3個(gè)劑量。 平行線測定法（二劑量（）和三劑量（）法） 標(biāo)準(zhǔn)品溶液 按中國藥典該品種含量測定項(xiàng)下的要求，制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)品貯備液。 線性試驗(yàn) 取適宜的大小厚度均勻的已滅菌試管，立即混勻，按隨機(jī)區(qū)組分配將各個(gè)試驗(yàn)管放置于恒溫水浴內(nèi)，在規(guī)定的條件下培養(yǎng)（通常約4小時(shí)）至適宜測量的濁度值（吸光度值）。 含試驗(yàn)菌液體培養(yǎng)基的制備 臨用前，取規(guī)定的試驗(yàn)菌懸液適量（35～37℃培養(yǎng)3～～），加入到各液體培養(yǎng)基管中，混合均勻，使在試驗(yàn)條件下能得到滿意的劑量－反應(yīng)關(guān)系和適宜的測定濁度（吸光度）。在該品種項(xiàng)下規(guī)定的劑量反應(yīng)線性范圍內(nèi)，以線性濃度范圍的中間值作為中間濃度，標(biāo)準(zhǔn)品溶液選擇5個(gè)劑量，劑量間的比例應(yīng)適宜（通常為1:）。 稀釋 標(biāo)準(zhǔn)品與供試品溶液的稀釋應(yīng)使用經(jīng)標(biāo)定的量瓶，每步稀釋的量取量以不少于2ml為宜，稀釋步驟一般不超過3步。 白色念珠菌（Candida albicans）懸液 取白色念珠菌[CMCC（F）98 001]的改良馬丁瓊脂斜面的新鮮培養(yǎng)物，接種于10ml培養(yǎng)基Ⅸ（中國藥典2005年版二部附錄Ⅺ A 抗生素微生物檢定法）中，在35～37℃培養(yǎng)8小時(shí)，再用培養(yǎng)基Ⅸ稀釋至適宜濃度，備用。 大腸桿菌（Eschehchia coli）懸液 取大腸桿菌[CMCC（B）44 103]的營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在35～37℃培養(yǎng)20～22小時(shí)。13 試驗(yàn)用菌液（Staphylococus aureus）懸液 取金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]的營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物，接種于營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在35～37℃培養(yǎng)20～22小時(shí)。根據(jù)這一原則，通過對(duì)培養(yǎng)基原材料的預(yù)試，挑選合適品牌廠家的產(chǎn)品使用。12 培養(yǎng)基 除同管碟法的要求外，比濁法使用的培養(yǎng)基應(yīng)澄清，顏色以盡量淺為佳，培養(yǎng)后培養(yǎng)基本身不得出現(xiàn)渾濁。11 試管 除同管碟法的要求外，比濁法用的緩沖液應(yīng)澄清無色，緩沖液配制后用垂熔玻璃漏斗濾過，除去沉淀等不溶物，使溶液澄清。如仍不能除去附著污物，可用1%～2%硝酸鈉的濃硫酸溶液浸泡后，再經(jīng)水洗滌。本身帶有攪拌或循環(huán)水系統(tǒng)的恒溫水浴箱，可不再配備電動(dòng)攪拌器。電熱恒溫水浴。 移液管 10ml或20ml刻度容量，管口需磨粗（大），以便快速分裝培養(yǎng)基。使用過的試管經(jīng)滅菌后，將培養(yǎng)基傾出，用水清洗，瀝干，再用硫酸－重鉻酸鉀洗液浸泡，清水沖洗干凈后，晾干，在160℃干烤2～3小時(shí)滅菌，保持潔凈，備用?？股匚⑸锉葷岱?0 儀器與用具 操作室 要求同管低法 分光光度計(jì) 應(yīng)有數(shù)字顯示功能和自動(dòng)記錄裝置，數(shù)顯精度應(yīng)在小數(shù)點(diǎn)后三位。 軟膏劑、眼膏劑 擦凈軟膏劑或眼膏劑軟管的外壁，切開封口，置于干燥器內(nèi)約1小時(shí)，取干燥的潔凈分液漏斗，帶手套操作，將膏劑軟管連同內(nèi)容物在天平上稱重，取出，將內(nèi)容物擠入分液漏斗，量約2g，再稱取膏劑軟管的重量，按減重法以前后稱量之差計(jì)算分液漏斗內(nèi)膏劑供試品的量，以不號(hào)過氧化物的乙醚或石油醚等作溶劑溶解基質(zhì)，但基質(zhì)中抗生素則應(yīng)不溶于或幾乎不溶于該有機(jī)溶劑中，以避免提取過程中抗生素的損失。量取適量稀釋制成供試品溶液。 膠囊劑 取裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混合均勻，研細(xì)，根據(jù)平均裝量，精密稱取約相當(dāng)于1粒膠囊的量或按標(biāo)示量、量瓶體積及抗生素儲(chǔ)備液濃度等計(jì)算的取樣量，置于量瓶中，加規(guī)定的溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，如供試品含有較多的輔料，則照片劑項(xiàng)下的方法進(jìn)行。糖衣片、腸溶片 取標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的片數(shù)，置于乳缽中，研細(xì)，分次加入規(guī)定的溶劑，研磨使其溶解，將研磨液轉(zhuǎn)移至瓶口放有小漏斗的量瓶中，量瓶體積根據(jù)供試品標(biāo)示量、所取片數(shù)及抗生素儲(chǔ)備液濃度（一般為1000單位/ml）選定，用規(guī)定溶劑稀釋至刻度，搖勻，靜置，使輔料下沉而抗生素已溶解在溶液內(nèi)，精密吸取量瓶中的上層液適量，作進(jìn)一步稀釋。注意點(diǎn)：研磨時(shí)應(yīng)注意環(huán)境干燥，可在干燥操作柜內(nèi)操作，研磨要迅速，避免吸濕，因片劑內(nèi)含輔料較多，輔料可能漂浮于溶液表面，稀釋時(shí)量取供試溶液應(yīng)讀取輔料下層的溶液切面；如沉淀較多，須待其下沉后再量取上層液；有些輔料吸附抗生素，應(yīng)加以注意。素片、薄膜衣片 稱取