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綠茶多糖對ⅱ型糖尿病小鼠治療機制研究的設(shè)計書doc(參考版)

2025-07-21 13:35本頁面
  

【正文】 參考文獻(xiàn)[1] 劉超, [J]. 安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 1999, 18(5): 8385. [2] 易鳳英, 劉素純, [J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2010, 38(6): 29112913. [3] 李雷, 汪東風(fēng), [J]. 茶葉科學(xué), 2006, 26(2): 102107. [4] [J]. 生意通, 2007(6): 79. [5] 陳海霞, [J]. 營養(yǎng)學(xué)報. 2002, 24(1): 8586. [6] 傅博強, 謝明勇, 、組成及藥理作用研究進展[J]. 南昌大學(xué)學(xué)報(理科版), 2001, 25(4): 358364. [7] [J]. 瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2004, 27(3): 258259. [8] 芮莉莉. 蕭建中, [J]. 中日友好醫(yī)院學(xué)報. 2005, 19(2): 9396. [9] 吳建芬, 馮磊, [J]. 浙江預(yù)防醫(yī)學(xué), 2003, 15(9): 1011, 13. [10] 徐梓輝, 周世文, 、SOD活性變化的影響[J]. 成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報, 2002, 25(1): 38. [11] 徐梓輝, 周世文, [J]. 中國糖尿病雜志, 2002, 10(1): 4448. [12] 徐梓輝, 周世文, 、T淋巴細(xì)胞亞群的影響[J]. 湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報, 2001, 21(1): 1719. [13] 倪德江, 陳玉瓊, . 茶葉科學(xué), 2003, 23(1): 1115. [14] 楊澤, [J]. 中國糖尿病雜志, 2003, 11(2): 78. [15] 倪德江, 陳玉瓊, [J]. 2004, 26(1): 5760. [16] 王黎明, [J]. 2010, 29(3): 354358. 21。雖然困難重重,自己的設(shè)計也不盡完美,但是我仍然感謝,因為這只是我學(xué)業(yè)路上一個新的起點。把這些東西落實成為思路順暢、切實可行的實驗指導(dǎo)真不是一件容易的事情,細(xì)心、耐心、信心、恒心一樣都不能少。我的設(shè)計《綠茶多糖對Ⅱ型糖尿病小鼠治療機制研究的設(shè)計》也正是以此為突破口,希望能有所成果。因此我決定自己的研究課題從此著手。老師的指點也讓我少走了很多彎路:先查資料——確定大體知識范圍——整理內(nèi)容——撰寫內(nèi)容——根據(jù)內(nèi)容——擬定題目,按照這個步驟我一步步摸索前行。對于我,科研性質(zhì)的專業(yè)論文可以說是可望而不可及的東西,雖然我的專業(yè)需要學(xué)生廣泛閱讀相關(guān)期刊文獻(xiàn),但我由于自己的惰性和自以為無用的思想,一直未曾碰觸。通過為期三周的課設(shè),我有很多的收獲。 綠茶多糖對糖尿病小鼠胰島素產(chǎn)量影響以往的研究實驗是通過直接測定代謝情況和胰島素產(chǎn)生水平。王黎明等[16]研究時采用測定糖類物質(zhì)在代謝途徑中量的改變,得出茶多糖影響糖代謝的結(jié)論。本設(shè)計采用層析的方法將粗提取的綠茶多糖進行純化,期望得到的綠茶多糖含量高并且具有較高的活性,使在作用于試驗用糖尿病小鼠是有較好的降血糖作用,有利于實驗數(shù)據(jù)的測量和機理的探究分析。因此我在借鑒前人實驗的基礎(chǔ)上,更加具體詳盡了實驗步驟,運用了更加精確的實驗儀器,進行全面的深入的分析,下面我分點介紹本設(shè)計的特點。但是茶多糖到底是怎樣在機體內(nèi)作用,怎樣達(dá)到降低血糖的目的,到目前為止還沒有文章把這復(fù)雜的機制研究明白。茶葉中具有降血糖效果的成分是TPS,國內(nèi)外對TPS的組分及降糖作用也有報道[14]。以往的研究表明,茶葉中除含有茶多酚、生物堿、揮發(fā)油等成分外,近年來還發(fā)現(xiàn)有另一種組分為茶多糖(TPS)。其中以茶多糖的降糖作用最為突出。近年來國內(nèi)外對茶葉的深入研究也表明,茶葉富含多種礦物質(zhì)、氨基酸等營養(yǎng)成分以及茶多酚、茶色素等具有多種保健作用的功能因子,特別是對茶葉降糖作用的研究成果為糖尿病患者提供了一種簡便易行、便于長期堅持且十分經(jīng)濟的控制病程發(fā)展的方法。對于Ⅱ型糖尿病德預(yù)防和治療,已經(jīng)成為當(dāng)今社會的最熱點為題之一。社會的快速發(fā)展促使人們生活水平的不斷提高,糖尿病作為一種由此導(dǎo)致的“富貴病”已經(jīng)成為繼腫瘤、心血管疾病之后的第三大嚴(yán)重慢性非傳染性疾病。對于C和c組,C組以最適濃度的綠茶多糖、c組以等體積生理鹽水連續(xù)灌胃8周。測定時取出。8周末時處死動物后,取出肝臟,.測定肝臟SOD和GSH—Px活性以及葡萄糖激酶活性。小鼠再禁食12小時后,腹腔注射四氧嘧啶(200mg/Kg體重);造模后實驗組和對照組均不再進行灌胃;造模后3天測定小鼠空腹血糖。實驗組分別以最適濃度的綠茶多糖、對照組以等體積生理鹽水連續(xù)灌胃。首先將準(zhǔn)備好的原材料粗老綠茶按照工藝:粗提取——茶多糖的離交換柱層析和凝膠柱層析純化——純化組分糖含量測定——糖組分體外活性分析。酶比活性計算:計算公式為:△A/min I/ V總/V樣10001000,其中△A是每分鐘吸光度的變化,.V總表示反應(yīng)總體積,V樣表示吸取上清液的量,兩個1000分別是毫摩爾轉(zhuǎn)化為微摩爾和單位IU轉(zhuǎn)化為mlU的轉(zhuǎn)化系數(shù),酶比活性單位為mlU/min/g肝組織。上述溶液混勻后置30℃預(yù)溫5min,再加肝勻漿上清液20ul反應(yīng)。 mol/L。因此測定其活性可以糖尿病小鼠的糖代謝狀況。在上述反應(yīng)中谷胱甘肽過氧化物酶是整個反應(yīng)體系的限速步驟,因此NADPH的減少量和谷胱甘肽過氧化物酶的活力線性相關(guān),可以直接用谷胱甘肽過氧化物酶檢測試劑盒進行測定。 50% (NU/mg protein) 對照管吸光度 反應(yīng)液總體積(ml)—————————— 247。組織中SOD活力計算:定義:每毫克組織蛋白在lml反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)50%時所對應(yīng)的SOD量為一個亞硝酸鹽單位(NU)。操作步驟一總SOD(TSOD)活力的測定:按試劑盒測定步驟進行,具體操作如下:試劑 測定管 標(biāo)準(zhǔn)管1號試劑(ml) 1%肝勻漿(μl) 50 —蒸餾水(ml) 2號試劑(ml) 3號試劑(ml) 4號試劑(ml) 用旋渦混勻器充分混勻,置37℃恒溫水浴40分鐘。(SOD) [9]原理:通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應(yīng)系統(tǒng)產(chǎn)生超氧陰離子自由基,后者氧化羥胺形成亞硝酸鹽,在顯色劑
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