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分子標(biāo)記技術(shù)(參考版)

2025-07-21 10:57本頁(yè)面

　　

【正文】謝謝。設(shè)計(jì)的專(zhuān)用引物 3’端還延伸出 1~10個(gè)數(shù)量不等的隨機(jī)核苷酸堿基，通過(guò)選用不同數(shù)量這種堿基可以調(diào)節(jié) AFLP產(chǎn)物的條帶特異性和數(shù)量，從而提供較多基因組多態(tài)性信息。具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，為了使酶切濃度大小分布均勻，一般采用兩個(gè)限制性?xún)?nèi)切酶，一個(gè)酶的切點(diǎn)數(shù)較多，另一個(gè)酶的切點(diǎn)數(shù)較少，因而 AFLP分析中產(chǎn)生的主要是由兩個(gè)酶共同酶切的片段。這樣就只有那些兩端序列能與選擇堿基配對(duì)的限制性酶切片段被擴(kuò)增，再在高分辨力的測(cè)序膠上分開(kāi)這些擴(kuò)增產(chǎn)物。 ? AFLP實(shí)際上是 RFLP與 PCR相結(jié)合的產(chǎn)物，其基本原理是將基因組 DNA進(jìn)行限制性?xún)?nèi)切酶酶切，然后選擇特定的片段進(jìn)行 PCR擴(kuò)增，使用雙鏈人工接頭與基因組DNA的酶切片段相連接作為擴(kuò)增反應(yīng)的模板，接頭與接頭相鄰的酶切片段的幾個(gè)堿基序列作為引物的結(jié)合位點(diǎn)。（四） AFLP標(biāo)記 ? 擴(kuò)增片

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2025-07-21 10:57

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2024-11-06 17:36

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