【正文】 2023年 3月 11日星期六 8時 45分 7秒 20:45:0711 March 2023 ? 1一個人即使已登上頂峰，也仍要自強不息。 2023年 3月 11日星期六 下午 8時 45分 7秒 20:45: ? 1最具挑戰(zhàn)性的挑戰(zhàn)莫過于提升自我。勝人者有力，自勝者強。 :45:0720:45Mar2311Mar23 ? 1越是無能的人，越喜歡挑剔別人的錯兒。 , March 11, 2023 ? 閱讀一切好書如同和過去最杰出的人談話。 2023年 3月 11日星期六 8時 45分 7秒 20:45:0711 March 2023 ? 1空山新雨后，天氣晚來秋。 。 :45:0720:45:07March 11, 2023 ? 1意志堅強的人能把世界放在手中像泥塊一樣任意揉捏。 :45:0720:45Mar2311Mar23 ? 1世間成事，不求其絕對圓滿，留一份不足，可得無限完美。 , March 11, 2023 ? 很多事情努力了未必有結(jié)果，但是不努力卻什么改變也沒有。 2023年 3月 11日星期六 8時 45分 7秒 20:45:0711 March 2023 ? 1做前，能夠環(huán)視四周；做時，你只能或者最好沿著以腳為起點的射線向前。 。 :45:0720:45:07March 11, 2023 ? 1他鄉(xiāng)生白發(fā)，舊國見青山。 :45:0720:45Mar2311Mar23 ? 1故人江海別，幾度隔山川。 , March 11, 2023 ? 雨中黃葉樹，燈下白頭人。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 橋聯(lián)法 ABCELISA（ avidinbiotinplexELISA）夾心法測抗原的過程 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)實驗研究的各個領(lǐng)域，既可用于微量抗原、抗體及受體的定量、定性檢測及定位觀察研究，亦可制成親和介質(zhì)用于上述各類反應(yīng)體系中反應(yīng)物的分離、純化。由于 1個親和素分子有4個生物素分子 的結(jié)合位置，可以連接更多的生物素化的分子，形成一種類似晶格的復(fù)合體。末端羧基可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成生物素化的產(chǎn)物。 ? 生物素 （ biotin）。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 ? 親和素 是一種糖蛋白，可以和 4個生物素分子親密結(jié)合。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 ABCELISA (應(yīng)用親和素和生物素的ELISA) 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 生物素 親合素系統(tǒng) (biotinavidin system， BAS)，是 70年代后期應(yīng)用于免疫學(xué)，并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。 ? 非肽類激素如 T T 雌激素 、 皮質(zhì)醇等 。 病毒如肝炎病毒 、風(fēng)疹病毒 、 皰疹病毒 、 輪狀病毒等；細菌如鏈球菌 、 結(jié)核分枝桿菌 、 幽門螺桿菌和布氏桿菌等；寄生蟲如弓形體 、 阿米巴 、 瘧原蟲等 。陽性反應(yīng)的條帶清晰可辨，并可根據(jù) SDAPAGE加入的分子量標準，確定各組分的分子量。此分階段分離的蛋白質(zhì)條帶肉眼仍不可見。 類型：免疫滲濾試驗：穿流形式 免疫層析試驗：橫流形式 斑點酶免疫吸附試驗（ dotELISA） 免疫印跡法 (Western blot) 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 免疫印跡法（ immunoblottingtest， IBT） 亦被稱為 Western blot 分三個階段進行 : ? SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳（ SDSPAGE） ? 電轉(zhuǎn)移 ? 酶免疫定位 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 ? SDSPAGE 抗原等蛋白樣品經(jīng) SDS處理后帶陰電荷，在聚丙烯胺凝膠中從陰極向陽泳動，分子量越小，泳動速度就越快。 基本原理： 固相抗 IgM 待檢標本 (IgM) 抗原 (與特異抗體結(jié)合 ) E 酶標抗體 底物 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 第三節(jié) 膜載體的酶免疫測定 固相膜免疫測定與 ELISA相類似 ,其特點是以微孔膜作為固相 .標記物可用酶和各種有色微粒子 ,如彩色乳膠、膠體金等。 ? 反應(yīng)后，結(jié)合與固相載體上復(fù)合物中被測定的酶標 Ag（ Ab）的量（酶活性）與樣品中非標記Ag（ Ab）的濃度成反比。 ? 酶標 Ag（ Ab）與樣品或標準品中的非標記 Ag（ Ab）具有相同的與固相 Ab(Ag)結(jié)合的能力。 ? 加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺進行定性或定量分析 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 ELISA技術(shù)類型： ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體，在這種測定方法中有 3種必要的試劑： ?固相的抗原或抗體， ?酶標記的抗原或抗體， ?酶作用的底物。如 ELISA。 液相 EIA：分離劑分離游離的和結(jié)合的標記物。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 酶免疫技術(shù)的分類 酶免疫組化 用于檢測組織切片或細胞涂片中的抗原和抗體 酶免疫技術(shù) 均相酶免疫測定 酶免疫測定 固相酶免疫測定 異相酶免疫測定 （ ELISA） 液相酶免疫測定 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 ? 均相酶免疫測定 Ag+AbE Ag AbE + AbE 基本原理：利用酶標抗體結(jié)合抗原形成復(fù)合物后，標記酶的活性發(fā)生改變的原理，在不將復(fù)合物與游離酶標抗體分離的情況下，直接測定系統(tǒng)中總的標記酶活性的改變，進而推算出待檢樣品中的抗原量。 一般采用偏堿性（ ）的碳酸鹽溶液（ ELISA板）。 硝酸纖維素膜（ NC）、尼龍膜等微孔濾膜，廣泛應(yīng)用于定性或半定量的斑點 ELISA。 免疫學(xué)及免疫學(xué)檢驗 ? 固相載體的種類與選擇 材料經(jīng)濟，